Construction of cell-culture based assay system to understand CGG repeat instability in Fragile X syndrome

构建基于细胞培养的检测系统以了解脆性 X 综合征中 CGG 重复不稳定性

• 批准号: 24770005
• 负责人: NAKAYAMA Yuji
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24770005/
• 关键词: 脆弱X症候群; トリプレットリピート; 染色体工学; 細胞融合; 脆弱エックス症候群

The human Fragile X mental retardation 1 (FMR1) gene, which contains CGG-trinucleotide repeat in its 5'UTR region, is responsible gene for Fragile X syndrome (FXS). The number of CGG-repeat is about 50 to 200 in carriers (so-called 'premutation allele') and more in patients. CGG-repeat becomes unstable and in most cases expands upon maternal inheritance of premutation allele to children. However, the mechanism underling CGG-repeat instability is unknown to date. In the present study, toward elucidation the molecular and cellular mechanism in CGG-repeat instability, we tried to establish a cell culture-based system that enables to reproduce CGG-repeat instability in vitro. We applied chromosomal engineering so that we could clone and handle CGG-repeat tract as a chromosomal domain stably. We successfully cloned natural and artificial chromosomes that contain varying size of CGG-repeats in rodent cell lines.

脆性X染色体智力低下1（Fragile X mental retardation 1，FMR 1）基因是脆性X综合征（Fragile X syndrome，FXS）的致病基因，其5 '端非翻译区含有CGG重复序列。CGG重复的数量在携带者中约为50至200（所谓的“前突变等位基因”），在患者中更多。CGG-重复变得不稳定，并且在大多数情况下，在前突变等位基因的母体遗传后扩展到儿童。然而，CGG重复不稳定性的机制至今尚不清楚。在本研究中，为了阐明CGG重复不稳定性的分子和细胞机制，我们试图建立一个基于细胞培养的系统，使CGG重复不稳定性在体外重现。我们应用染色体工程，使我们能够克隆和处理CGG重复序列作为一个染色体域稳定。我们成功地克隆了天然和人工染色体，包含不同大小的CGG重复在啮齿动物细胞系。

项目成果

染色体免疫沈降法(ChrIP)を用いた疾患関連リピート配列に結合する因子の探索

使用染色体免疫沉淀 (ChrIP) 寻找与疾病相关重复序列结合的因子

• 发表时间: 2012
• 作者: 砂村直洋;中山祐二;荻野由加利;難波栄二;押村光雄;久郷裕之
• 通讯作者: 久郷裕之

井上敏昭複数の遺伝子搭載が可能な人工染色体ベクターの構築

井上俊明 构建可携带多基因的人工染色体载体

• 发表时间: 2012
• 作者: 荻野由香加利;中山祐二;松森はるか;田中伸幸;押村光雄;難波栄二
• 通讯作者: 難波栄二

生命機能研究支援センター

生物功能研究支援中心

Electrophysiological Properties of Prion-Positive Cardiac Progenitors Derived From Murine Embryonic Stem Cells

鼠胚胎干细胞来源的朊病毒阳性心脏祖细胞的电生理特性

• DOI: 10.1253/circj.cj-12-0126
• 发表时间: 2012
• 期刊: Circulation Journal
• 影响因子: 3.3
• 作者: Fujii H;Ikeuchi Y;Kurata Y et al.
• 通讯作者: Kurata Y et al.

分裂期でのSIRT2脱アセチル化標的タンパクの探索

在有丝分裂过程中寻找 SIRT2 脱乙酰化靶蛋白

• 发表时间: 2012
• 作者: 末松知久;李艶沢;中山祐二;押村光雄;井上敏昭
• 通讯作者: 井上敏昭