薬剤性腎障害発現におけるアポトーシスの役割に関する研究

细胞凋亡在药物性肾损伤中作用的研究

• 批准号: 09877435
• 负责人: 乾 賢一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877435/
• 关键词: 薬剤性腎障害; シスプラチン; アポトーシス; ネクローシス; 細胞障害; LLC-PK_1; DNA断片化; 頂側膜酵素

薬剤性腎障害における尿細管細胞死は、これまで、ネクローシス(壊死)と考えられてきた。一方、アポトーシスは、プログラムによる自発的細胞死であり、個体の恒常性維持や生体防御のために必須の機能であると考えられる。そこで、近位尿細管に特有の性質を保持しているブタ腎由来培養上皮細胞LLC-PK_1を用い、腎障害性薬物による障害発現におけるアポトーシス誘導とその役割に関する検討を行った。1.LLC-PK_1細胞のシスプラチン障害におけるアポトーシス誘導とその役割:コンフルエントに達したLLC-PK_1細胞を30μMシスプラチンで処理したところ、24時間後、既にヌクレオソーム単位ごとのDNA断片化及び核クロマチン凝集が認められ、アポトーシスの誘導されていることが明らかとなった。さらに、同条件で培養を継続したところ、培養液中へのLDH遊離、並びに細胞ホモジネート中の頂側膜酵素活性の低下が認められ、障害の発現が確認された。さらに、シスプラチンとグルタチオンとの同時処理を行ったところ、細胞障害及びアポトーシス誘導は共に抑制された。したがって、シスプラチンによるアポトーシス誘導は、細胞障害発現と関連することが示唆された。一方、高濃度(1mM)のシスプラチンでLLC-PK_1細胞を処理したところ、12時間以内に障害の発現が認められたが、DNA断片化及び核クロマチンの凝集は認められなかったことから、高濃度シスプラチン処理における障害発現はネクローシスによることが推察された。2.他の腎障害性薬物によるアポトーシス誘導:他の腎障害性薬物であるゲンタマイシン、シクロスポリンAで24時間処理した場合にも、DNA断片化が認められたことから、種々の薬剤性腎障害の発現にアポトーシスの関与する可能性が示唆された。

薬 kidney tonic sex handicap of に お け る urine tubule cells die は, こ れ ま で, ネ ク ロ ー シ ス (壊 die) と exam え ら れ て き た. Side, ア ポ ト ー シ ス は, プ ロ グ ラ ム に よ る since 発 cells die で あ り, individual の constancy to maintain や raw body defense の た め に must の function で あ る と exam え ら れ る. そ こ で, proximal tubule urine に の unique nature を keep し て い る ブ タ renal origin LLC - culture of epithelial cells PK_1 を with い, renal handicap of sexual 薬 に よ る handicap of 発 now に お け る ア ポ ト ー シ ス induced と そ の service cut に masato す る 検 line for を っ た. 1. の LLC - PK_1 cells シ ス プ ラ チ ン handicap of に お け る ア ポ ト ー シ ス induced と そ cut の service: コ ン フ ル エ ン ト に da し た LLC - 30 microns PK_1 cells を シ ス プ ラ チ ン で 処 Richard し た と こ ろ, after 24 time, both に ヌ ク レ オ ソ ー ム 単 a ご と の DNA fragment and び nuclear ク ロ マ チ ン agglutination が recognize め ら Youdaoplaceholder0, アポト シス シス <s:1> induce されて る る とが とが in ら となった となった となった. さ ら に, with conditions で cultivate を 継 続 し た と こ ろ, medium, へ の LDH, and free び に cells ホ モ ジ ネ ー ト の top side of the membrane enzyme activity in low の が recognize め ら れ, handicap of の 発 が now confirmed さ れ た. さ ら に, シ ス プ ラ チ ン と グ ル タ チ オ ン と の 処 principle at the same time line を っ た と こ ろ, cell handicap and び ア ポ ト ー シ ス induced は に rejection さ れ た. Youdaoplaceholder0, シスプラチ シスプラチ によるアポト によるアポト たがって シス シス induce, and the occurrence of cellular disorders is と related to する する とが inciting された. Side, high concentration (1 mm) の シ ス プ ラ チ ン で LLC - PK_1 cells を 処 Richard し た と こ ろ, 12 time within に handicap of の 発 が now recognize め ら れ た が, DNA fragment and び nuclear ク ロ マ チ ン の agglutination は recognize め ら れ な か っ た こ と か ら, high concentration シ ス プ ラ チ ン 処 Richard に お け る handicap of 発 now は ネ ク ロ ー シ ス に よ る こ と Youdaoplaceholder0 infer された. 2. He の renal handicap of sexual 薬 content に よ る ア ポ ト ー シ ス induction: he の renal handicap of sexual 薬 content で あ る ゲ ン タ マ イ シ ン, シ ク ロ ス ポ リ ン A で 24 time 処 し た occasions に も, DNA fragment が recognize め ら れ た こ と か ら, kind of 々 の 薬 kidney tonic sex handicap of の 発 now に ア ポ ト ー シ ス の masato and す が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

T.Nakamura: "Renal excretion of vancomycin in rats with acute renal failure." J.Pharm.Pharmacol.49(2). 154-157 (1997)

T.Nakamura：“急性肾衰竭大鼠中万古霉素的肾排泄。”

M.Okuda: "Characterization of organic ion transporters involved in renal excretion of xenobiotics." Jpn.J.Physiol.47(S1). S58-S59 (1997)

M.Okuda：“参与异生物质肾脏排泄的有机离子转运蛋白的表征。”

S.Masuda: "Interactions of nonsteroidal anti-inflammatory drugs with rat renal organic anion transporter,OAT-K1." J.Pharmacol.Exp.Ther.283・3. 1039-1042 (1997)

S.Masuda：“非甾体类抗炎药与大鼠肾有机阴离子转运蛋白 OAT-K1 的相互作用”，J.Pharmacol.Exp.Ther.283·3（1997）。

J.Nagai: "Inhibition of PAH transport by parathyroid hormone in OK cells:involvement of protein kinase C pathway." Am.J.Physiol.273(5). F674-F679 (1997)

J.Nagai：“甲状旁腺激素在 OK 细胞中抑制 PAH 转运：蛋白激酶 C 途径的参与。”