Experimentelle Modulation der Telomerase-Aktivität in bovinen Embryonen

在这一阶段，我们将采用一种新的方法，在体外培养中引入人端粒酶质粒注射技术，人端粒酶RNA在体外培养中可以产生一种蛋白质。人端粒酶全酶的表达，也是牛端粒的表达。平行地，韦尔登也可以在内泽伦（ICM）和Trophektoderms的Zellen中发现一种差异性端粒序列，这种特异性的特异性是非常重要的。本研究通过动物实验，在体外建立了人端粒酶在牛基因组中的稳定整合，并在体内进行了研究。大足将人源化端粒酶介导的转座子-转座酶稳定地应用于整群奶牛。转基因Blastozysten韦尔登促进胚胎发育; Feten（am Tag 30 der Embryogenese）和Kälber韦尔登促进其发育和详细分析。这一发现将为端粒功能的生物学研究提供一个模型，如衰老和肿瘤的研究。

In der laufenden Förderperiode wurden mit einer neuen, im Labor der Antragssteller entwickelten Plasmid-Injektionstechnik humane Telomerase, humane Telomerase-RNA sowie ein Fluoreszenzprotein zuverlässig in Rinderembryonen ko-exprimiert. Sowohl die Expression des humanen Telomerase-Holoenzyms, als auch die Expression der Telomerase-Untereinheiten resultierten in einer signifikanten Verlängerung der bovinen Telomeren. Parallel dazu konnte gezeigt werden, dass es während der frühen Präimplantationsphase zu einer differentiellen Telomerenverlängerung in Zellen der Inneren Zellmasse (ICM) und des Trophektoderms kommt, die zudem spezies-spezifisch unterschiedlich ausgeprägt ist. Das beantragte Folgeprojekt hat zum Ziel, diese in vitro Ergebnisse zu vertiefen und nach stabiler Integration der humanen Telomerase im bovinen Genom, die Auswirkungen auf die in vivo Entwicklung zu studieren. Dazu wird die humane Telomerase mittels Transposon-Transposition stabil in das Rindergenom integriert. Transgene Blastozysten werden auf Empfängertiere übertragen; Feten (am Tag 30 der Embryogenese) und Kälber werden in ihrer Entwicklung im Detail analysiert. Diese Untersuchungen sollen das Rind als ein Modell zum Studium der Telomerenfunktion in verschiedenen biologischen Prozessen wie Seneszenz und Tumorbildung etablieren.