Die Rolle einer Halogenase und einer "Nicht-Häm-Haloperoxidase" in der Biosynthese des Glykopeptidantibiotikums Balhimycin

在Wohlleben教授的工作组中，通过Klonierung方法转化Balhimycin-产品地中海拟无枝酸菌韦尔登。生物合成-代谢物韦尔登是通过荣格教授的研究小组在国外进行的。生物合成的Ziel蛋白质是一种卤代酶和一种卤代过氧化物酶，其功能和底物特异性通过克隆实验和随后的结构分离得到证实。卤代酶基因工程的研究进展.卤代过氧化物酶-基因作用于代谢物的化学特性。Mögliche Substrate aus Kulturfiltraten müssen für enzymkinetische Arbeiten spektroskopisch charakterisiert韦尔登和在gereinigter形式vorliegen。Das Potential an instrumentalanalytischen Methoden und unsere Expertise ermöglichen eine Bearbeitung der Thematik mit folgendem Arbeitsablauf：1.转化体培养滤液生物合成-代谢产物-混合物的质谱特性; 2.代谢产物的分离、色谱分析和NMR光谱特征; 3.代谢物的分离和合成。potentieller Substrate für Substratuntersuchungen; 4.微生物和酶促生物转化和酶促底物分析（含卤代酶bzw。“Nicht-Häm-Halperoxidase”）。合作1。和2.作者：W. Wohlleben，zu 3.和4.与K教授- H.货车皮。

Transformanten des Balhimycin-Produzenten Amycolatopsis mediterranei werden in den Arbeitsgruppen Prof. Wohlleben durch Klonierung hergestellt. Die Biosynthese-Metabolite werden im beantragten Vorhaben durch die Arbeitsgruppe von Prof. Jung isoliert und in ihrer Struktur charakterisiert. Die Zielproteine der Biosyntheseuntersuchung sind die Halogenase und ein Haloperoxidase-ähnliches Enzym, deren Funktion und Substratspezifität durch Klonierungsexperimente mit nachfolgender Isolierung sowie Strukturaufklärung untersucht wird. Der Nachweis der gentechnologischen Inaktivierung der Halogenase- bzw. Haloperoxidase-Gene erfolgt ausschließlich über die chemische Charakterisierung der Metabolite. Mögliche Substrate aus Kulturfiltraten müssen für enzymkinetische Arbeiten spektroskopisch charakterisiert werden und in gereinigter Form vorliegen. Das Potential an instrumentalanalytischen Methoden und unsere Expertise ermöglichen eine Bearbeitung der Thematik mit folgendem Arbeitsablauf: 1. Massenspektrometrische Charakterisierung der Biosynthese-Metaboliten-Mischungen aller Kulturfiltrate von Transformanten; 2. Isolierung, chromatographische Aufreinigung und NMR-spektroskopische Charakterisierung dieser Metabolite; 3. Isolierung und Synthese einzelner Metabolite bzw. potentieller Substrate für Substratuntersuchungen; 4. Analytik von biotransformierten und enzymatisch umgesetzten Substraten mit Mikroorganismen und überexprimierten Enzymen (mit Halogenase bzw. "Nicht-Häm-Haloperoxidase"). Kooperation zu 1. und 2. mit Prof. W. Wohlleben, zu 3. und 4. mit Prof. K.-H. van Pée.