Metabotrop-vermittelte Signalkaskaden in Neuronen und Gliazellen

在den herkömmlichen Ganzzellableitungen des贴片钳verfahrens werden kleinere molek<s:2> le ber die贴片移液器ausgewaschen。Die Geschwindigkeit dieser Zelldialyse hängt sowohl vom Pipettendurchmesser als auch von der Größe der Zelle ab. In kleineren Zellen (bis 10 μ m) kann der Auswascheffekt schon nach wenigen Minuten einterten。Dadurch gehen dem Cytoplasma häufig auch "Second Messenger"- molek<s:1> le verloren, so daß intrazelluläre Signalkaskaden unterbrochen werden。研究对象为谷氨酸工业、钾离子、钙离子、钙离子、钙离子、钙离子、钙离子、钙离子、钙离子、钙离子。Wir möchten nun festellen， ob Auswirkungen代谢因子wirkender primärer信号（神经递质和调制器）在der herkömmlichen Ganzzell-Ableitung generell beeinträchtigt werden。大祖planen wir， verschiedene Agonisten aufven - and gliazicen in kulr and holnschnitt in perfor穿孔补片技术，beder der Auswaschen intrazellulärer molek<e:1> le unterbleibt, zuuntersuchen and mit de herkömmlichen Ganzzell-Ableitung zuvergleichen。Dabei wollen与auch die Technik der intrazellulären Ionenmessungen mit萤光法（钙，氯，pH）在组合中，der Ableitung elektrischer signal in perfor穿孔贴片verfahren weter verbesseren and standardisen。

In den herkömmlichen Ganzzellableitungen des Patch-ClampVerfahrens werden kleinere Moleküle über die Patch-Pipette ausgewaschen. Die Geschwindigkeit dieser Zelldialyse hängt sowohl vom Pipettendurchmesser als auch von der Größe der Zelle ab. In kleineren Zellen (bis 10 µm) kann der Auswascheffekt schon nach wenigen Minuten eintreten. Dadurch gehen dem Cytoplasma häufig auch "Second Messenger"-Moleküle verloren, so daß intrazelluläre Signalkaskaden unterbrochen werden. Einen derartigen Zusammenhang konnten wir bei glutamatinduzierten Kaliumstrom-Oszillationen feststellen, die durch Aktivierung metabotroper Rezeptoren und rhythmisch freigesetztes Calcium hervorgerufen werden. Wir möchten nun feststellen, ob Auswirkungen metabotrop wirkender primärer Signale (Neurotransmitter und -modulatoren) in der herkömmlichen Ganzzell-Ableitung generell beeinträchtigt werden. Dazu planen wir, verschiedene Agonisten auf Nerven- und Gliazellen in Kultur und im Hirnschnitt in der Perforated-Patch-Technik, bei der ein Auswaschen intrazellulärer Moleküle unterbleibt, zu untersuchen und mit der herkömmlichen Ganzzell-Ableitung zu vergleichen. Dabei wollen wir auch die Technik der intrazellulären Ionenmessungen mit Fluoreszenzfarbstoffen (Calcium, Chlorid, und pH) in Kombination mit der Ableitung elektrischer Signale im Perforated-PatchVerfahren weiter verbessern und standardisieren.