味蕾におけるカドヘリンファミリーの局在と機能および味覚障害との関連

【味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスの作成と解析】味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスは、味蕾細胞で強く発現するケラチン8遺伝子の発現調節領域の制御下でタモキシフェン投与によりN-カドヘリン遺伝子を不活性化できるマウスである。前年度の予備実験でこのマウスを用いて遺伝子組換えを起こさせるためには、タモキシフェンの投与量、回数などを再検討する必要があることがわかった。そこで本年度は、味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスの作成に利用したケラチン8-Cre/ERT2マウスをCreによるDNA組換え活性のレポーターマウスであるAi14マウスと交配し、タモキシフェンの投与を行い、タモキシフェンの投与量、回数などを決定した。また、次年度の本実験に向けてケラチン8-Cre/ERT2、floxed N-カドヘリン、Creレポーターを有するマウスを交配により作成中である。【Ⅱ型細胞の分化とNカドヘリンの発現との関係】　前年度の解析方法には問題があったため、今年度は再度実験を実施した。当初の仮説では、シナプス形成前の幼若なⅡ型細胞はPLCβ2が弱く、N-カドヘリンは強く発現し、その後N-カドヘリンの接着活性によりシナプスが形成されるとPLCβ2の発現が増加し、N-カドヘリンの発現は低下するのではないかと考えた。今回の結果では、Ⅱ型細胞に分化するとN-カドヘリンの発現は低いまま、PLCβ2の発現が先に増加し、最終分裂から10.5日以降の成熟したと考えられるⅡ型細胞でN-カドヘリンの発現が増加することが示唆され、仮説を支持する結果とはならなかった。【亜鉛欠乏マウスにおけるカドヘリンの局在】　亜鉛欠乏飼料及び対照飼料を4週間投与したマウスの有郭乳頭味蕾におけるN-カドヘリン、T-カドヘリンの局在を検討した。その結果、亜鉛欠乏群、対照群との間で両者の局在様式に大きな違いは認められなかった。

【味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスの作成と解析】味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスは、味蕾細胞で強く発現するケラチン8遺伝子の発現調節領域の制御下でタモキシフェン投与によりN-カドヘリン遺伝子を不活性化できるマウスである。前年度の予備実験でこのマウスを用いて遺伝子組換えを起こさせるためには、タモキシフェンの投与量、回数などを再検討する必要があることがわかった。そこで本年度は、味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスの作成に利用したケラチン8-Cre/ERT2マウスをCreによるDNA組換え活性のレポーターマウスであるAi14マウスと交配し、タモキシフェンの投与を行い、タモキシフェンの投与量、回数などを決定した。また、次年度の本実験に向けてケラチン8-Cre/ERT2、floxed N-カドヘリン、Creレポーターを有するマウスを交配により作成中である。【Ⅱ型細胞の分化とNカドヘリンの発現との関係】　前年度の解析方法には問題があったため、今年度は再度実験を実施した。当初の仮説では、シナプス形成前の幼若なⅡ型細胞はPLCβ2が弱く、N-カドヘリンは強く発現し、その後N-カドヘリンの接着活性によりシナプスが形成されるとPLCβ2の発現が増加し、N-カドヘリンの発現は低下するのではないかと考えた。今回の結果では、Ⅱ型細胞に分化するとN-カドヘリンの発現は低いまま、PLCβ2の発現が先に増加し、最終分裂から10.5日以降の成熟したと考えられるⅡ型細胞でN-カドヘリンの発現が増加することが示唆され、仮説を支持する結果とはならなかった。【亜鉛欠乏マウスにおけるカドヘリンの局在】　亜鉛欠乏飼料及び対照飼料を4週間投与したマウスの有郭乳頭味蕾におけるN-カドヘリン、T-カドヘリンの局在を検討した。その結果、亜鉛欠乏群、対照群との間で両者の局在様式に大きな違いは認められなかった。