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自然宿主モデルを用いた細菌感染の感受性と特異性に関与する因子の探索

使用自然宿主模型探索细菌感染的易感性和特异性相关因素

基本信息

批准号：
21H02360
负责人：
度会雅久
金额：
$ 10.98万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

細胞内寄生菌は増殖するステージと共生(休眠)するステージがあることが知られている。宿主内における増殖と共生の双方に関与する因子の同定は、宿主の感受性の差異を解明する手がかりとなる。本研究では自然宿主感染モデルを用いて、共生と感染の間で機能する新規因子群を探索する。細胞内寄生菌の代表として野兎病菌およびノビシダ菌、レジオネラを用い、終宿主感染モデルとしてのマクロファージと自然宿主モデルとして原生生物のゾウリムシを用いて検討を行なった。ゾウリムシはレジオネラや野兔病菌の自然宿主になり得る。しかし、全てのゾウリムシが自然宿主として機能するのではなく、その適合性は種や株に依存することが報告されている。ゾウリムシは接合型やシンジェンなどの差異によって多くの種や株が存在するが、形態学的にこれを分別することは困難である。そこで、random amplified polymorphic DNA (RAPD)法を応用した遺伝学的手法により、ゾウリムシを簡便に分類・同定する手法の構築を試みた。その結果、RAPD法の結果を元に構築したmultiplex PCRを併用することで、複数の株を特異的に識別することが可能となった。今後は病原細菌の自然宿主となり得るゾウリムシ株を同定・検出する技術に発展させていく予定である。野兎病菌は宿主免疫を抑制することが知られているが、そのメカニズムは不明である。宿主免疫抑制に関与する菌側因子を同定するために、ノビシダ菌を用いて、トランスポゾンによるランダム挿入変異体ライブラリーを作成し、U937細胞感染時における免疫抑制効果に与える影響を解析した。その結果、免疫抑制因子としてノビシダ菌のジヒドロオロターゼをコードするpyrC遺伝子の欠損株は宿主免疫抑制機能が低下することが示された。詳細な機能解析により、宿主免疫抑制機構の一端を明らかにすることができると考えられた。

Intracellular parasites grow in symbiosis (dormancy). The identity of factors and the differences in host susceptibility between the two sides of the symbiosis are explained. This study explored new gene groups for the role of natural host infection, symbiotic infection, and intercurrent function. The representative of intracellular parasites is the use of fungi, protozoa, and end-host infections. It is a natural host of rabbit pathogens. All species are natural hosts and functional, and all species are adaptive and dependent. It is difficult to distinguish between different species and different morphological species. Therefore, we are trying to build a method that uses random amplified polymorphic DNA (RAPD) to make classification and identification simple by using genetic methods. The result of RAPD is that multiplex PCR can be used to identify multiple strains. In the future, the natural host of pathogenic bacteria will be identified and the technology for detection will be developed. The host immune system of wild bacteria is inhibited. Analysis of immunosuppressive effects on U937 cells infected with host cells As a result, immunosuppressive factors in the host cells of the defective strain of pyrC gene were reduced. Detailed functional analysis, host immunosuppressive mechanism at one end of the study

项目成果

期刊论文数量（21）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Francisella novicida can utilize Paramecium bursaria as its potential host

新杀弗朗西斯菌可以利用草履虫作为其潜在宿主

DOI：
10.1111/1758-2229.13029
发表时间：
2021
期刊：
Environmental Microbiology Reports
影响因子：
3.3
作者：
Watanabe Kenta;Motonaga Akane;Tachibana Masato;Shimizu Takashi;Watarai Masahisa
通讯作者：
Watarai Masahisa

Comparative Analysis Between Paramecium Strains with Different Syngens Using the RAPD Method