IL-12の発現調節及び作用機序に関する基礎的研究

IL-12表达调控及作用机制的基础研究

• 批准号: 09770212
• 负责人: 善本 隆之
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770212/
• 关键词: IL-12; NF-kB; EBウイルス; LMP1; B細胞; トランスフォーメーション; IL-12p40; トランスジェニックスマウス; Th1反応

以前よりEpstein-Barrウイルス(EB)ウイルス感染とIL-12発現は相関していることが示唆されているが、直接的関係の検討は未だなされておらず、今年度はこれらの点について検討した。まず、ヒト抹消血よりPrimary B細胞を精製しin vitroでEBウイルス産生細胞の上清と混ぜ感染させた後培養を行った。1-2週間するとB細胞が形態的にもトランスフォームし増殖してくるが、このころからEBウイルスの膜蛋白の一つであるLMPlの発現も見られるようになり、それに伴い培養上清中にIL-12p40産生が恒常的に検出された。こうして確立されたEBウイルスでトランスフォームしたB細胞では、IL-12p40とp35およびIL-12レセプターβ1とβ2の発現が増強されており、さらにPMAで刺激するとp40およびp35のmRNAレベルでの発現増強に伴いその培養上清中に蛋白レベルでIL-12p70も検出されるようになった。最近、LMPlが、活性型CD40と類似した構造を持ちNF-κBを活性化する能力かあることが報告された。以前、我々はCD40を介した刺激によりNF一κBが活性化されp40発現が誘導されることを明らかにした。そこで、ヒトB細胞リンパ腫瘍株Daudi細胞にLMPlの発現ベクターをトランスフェクトすると、NF-κBの活性化と共にp40産生が誘導されることが明らかになった。以上より、B細胞をin vitroでEBウ,イルスに感染させトランスフォームさせると恒常的にp40産生が誘導されること、この時、p40発現誘導にLMPl発現を介したNF-κBの活性化が関与していることが示唆された。EBウイルス感染によるIL-12発現誘導の意義としては、IL-12がEBウイルス感染B細胞の細胞増殖因子様として機能している可能性と、反対に宿主のCTLによる免疫監視機構の増強に効いている可能性の二つが考えられ、現在検討中である。

Before よ り Epstein - Barr ウ イ ル ス (EB) ウ イ ル ス infection と IL - 12 発 now は phase masato し て い る こ と が in stopping さ れ て い る が, direct masato is の beg は 検 not だ な さ れ て お ら ず, our は "こ れ ら の point に つ い て beg し 検 た. ま ず, ヒ ト effacement blood よ り を refined し Primary B cells in vitro で EB ウ イ ル ス cells の supernatant と mixed ぜ infection さ せ た line after cultivating を っ た. Between 1-2 weeks す る と に in the form of B cells が も ト ラ ン ス フ ォ ー ム し raised colonization し て く る が, こ の こ ろ か ら EB ウ イ ル ス の membrane protein の a つ で あ る LMPl の 発 も now see ら れ る よ う に な り, そ れ に with い culture supernatant of に IL - 12 p40 produce が constant に 検 out さ れ た. こ う し て establish さ れ た EB ウ イ ル ス で ト ラ ン ス フ ォ ー ム し た B cells で は, IL - 12 p40 と p35 お よ び IL - 12 レ セ プ タ ー beta 1 と beta 2 の 発 が now raised strong さ れ て お り, さ ら に PMA で stimulus す る と p40 お よ び p35 の mRNA レ ベ ル で の 発 now raised strong に with い そ の に in culture supernatant Protein レベ で でIL-12p70 検 検 されるようになった. Recently, LMPl が type, active CD40 と similar し た tectonic を hold ち nf-kappa B を activeness す る ability か あ る こ と が report さ れ た. Before, I 々 は CD40 を interface し た stimulus に よ り NF a kappa B predominate が activeness さ れ p40 発 now が induced さ れ る こ と を Ming ら か に し た. そ こ で, ヒ ト B cells リ ン パ swollen sores Daudi cell に LMPl の 発 now ベ ク タ ー を ト ラ ン ス フ ェ ク ト す る と, nf-kappa B の activeness と altogether に p40 produce が induced さ れ る こ と が Ming ら か に な っ た. Above よ り を, B cells in vitro で EB ウ, イ ル ス に infection さ せ ト ラ ン ス フ ォ ー ム さ せ る と constant に p40 produce が induced さ れ る こ と, こ の, p40 発 now induced に LMPl 発 を interface now し た nf-kappa B の activeness が masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た. EB ウ イ ル ス infection に よ る IL - 12 発 now induced の meaning と し て は, IL - 12 が EB ウ イ ル ス infection factor B cells の rights colonization others と し て function し て い と る possibility, anti polices に host の CTL に よ る immune surveillance agency の raised strong に unseen い て い る possibility の two つ が exam え ら れ, now 検 please で あ る.

项目成果

T. Yoshimoto: "IL-12 dependent mechanisms in the clearance of blood-stage murine malaria Plasmodium berghei XAT, an attenuated variant of Plasmodium berghei NK65." J. Infec. Dis.(in press).

T. Yoshimoto：“清除血期鼠疟疾伯氏疟原虫 XAT（伯氏疟原虫 NK65 的减毒变体）中的 IL-12 依赖性机制。”

T.Yoshimoto: "Inducton of interleukin-12 p40 transcript by CD40 ligation via activation of nuclear factor-kB." Eur.J.Immunol.27. 3461-3470 (1997)

T.Yoshimoto：“通过激活核因子-kB，通过 CD40 连接诱导白细胞介素 12 p40 转录本。”

T.Yoshimoto: "Interleukin-12 expression in B cells by transformation with Epstein-Barrvirus." Biochem. Biophys. Res. Commun.252. 556-560 (1998)

T.Yoshimoto：“通过 Epstein-Barrvirus 转化，B 细胞中白细胞介素 12 的表达。”

喜本隆之: "バイオディフェンスシリーズ 3" IL-12の産生・活性の制御と感染における役割, 191-204 (1998)

Takayuki Kimoto：“生物防御系列 3”IL-12 产生和活性的控制及其在感染中的作用，191-204 (1998)

T.Yoshimoto: "IL-12 dependent mechanisms in the clearance of blood-stage murine malaria Plasmodium berghei XAT, an attenuated variant of Plasmodium berghei NK65." J.Infect.Dis.177. 1674-1682 (1998)

T.Yoshimoto：“清除血期鼠疟疾伯氏疟原虫 XAT（伯氏疟原虫 NK65 的减毒变体）中的 IL-12 依赖性机制。”