新規無針注入器によるDNA・蛋白質の皮内投与によるワクチン効果と遺伝子治療増強

使用新型无针注射器皮内注射 DNA/蛋白质，增强疫苗功效和基因治疗

• 批准号: 22K12772
• 负责人: 善本 隆之
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K12772/
• 关键词: 無針注射器; 抗腫瘍ワクチン; アジュバントフリー; ワクチン; アジュバント

2022年度は、新規無針注射器Pyro-drive jet injector（PJI）を用いて、モデル抗原として鶏卵白アルブミン（OVA）の発現プラスミドDNA投与による抗腫瘍ワクチン効果の増強とその作用機序について検討を行った。① 抗腫瘍ワクチン効果：OVA反応性のT細胞受容体のトランスジェニックマウスOT-IおよびOT-IIマウス由来のそれぞれCD8+T細胞とCD4+T細胞を前日に移入したマウスに、OVAプラスミドpOVAをPJIおよび通常の有針注射器を用いて皮内投与を行い、1週間後所属リンパ節細胞を蛍光標識したMHCクラスI/IIのOVA peptideテトラマーと抗CD4/抗CD8抗体で染色しFACS解析した。その結果、有針注射器に比べPJIによる投与により、より強い抗原特異的CD8+T細胞の誘導と、IFN-gおよびIL-4産生、抗原再刺激による細胞増殖誘導がされた。さらに、抗原特異的細胞傷害性T細胞の誘導によるin vivoのKilling活性や、抗原特異的抗体産生も増強された。次に、OVA-E.G7腫瘍を用いて、有針注射器に比べPJIにより、より強いCD8+T細胞依存性の腫瘍増殖の抑制効果や、予防効果も見られた。ヒトに通常用いられる水酸化アルミニウムAlumでエマルジョンを作ったOVA蛋白質投与と比較しても、同等かより強い抗原特異的CD8+T細胞の誘導と抗腫瘍のワクチン効果が増強された。② 作用機序の解明：その作用機序として、GFP発現ベクターを用いて有針注射器およびPJIを用いて皮内投与し、皮膚局所でのFACS解析により、CD11c+樹状細胞に、GFPによるより強い蛍光強度が増強された。さらに、皮膚局所より細胞溶解液を調製し、ウエスタンブロット解析を行うと、PJIにより投与3日頃をピークに、皮膚局所でのOVAの蛋白質レベルでのより強い発現増強が見られた。

2022 annual は, new rules without needle syringe Pyro - drive jet injector (PJI) を い て, モ デ ル antigen と し て 鶏 albumen ア ル ブ ミ ン (OVA) の 発 now プ ラ ス ミ ド DNA cast and に よ る resistance swollen sores ワ ク チ ン unseen fruit の raised strong と そ の function machine sequence に つ い て 検 line for を っ た. ① Anti-swelling effect: ワ チ チ OVA anti 応 sex の T cells by the capacity of body の ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス OT -i お よ び OT - II マ ウ ス origin の そ れ ぞ れ CD8 + T cells と CD4 + T cells を yesterday に move し た マ ウ ス に, OVA プ ラ ス ミ ド pOVA を PJI お よ needle syringe を び の usually have to use い て intradermal cast with を い after 1 week Genus リ ン パ ganglion cells を 蛍 light logo し た MHC ク ラ ス I/II の OVA peptide テ ト ラ マ ー と anti-stress CD4 / CD8 antibody で dyeing し both FACS parsing し た. そ の results, a needle syringe に than べ PJI に よ る cast with に よ り, よ り strong い antigen specific CD8 + T cells induced の と, IFN - g お よ び IL - 4 generation, antigens to stimulate に よ る cells induced が rights colonization さ れ た. Youdaoplaceholder0, antigen-specific cytotoxic T cells <s:1> induce によるin vivo <s:1> Killing activity や, antigen-specific antibody production <s:1> enhance された. に, OVA - um participant swollen sores を "7" い て, a needle syringe に than べ PJI に よ り, よ り strong dependence の い CD8 + T cells swollen sores rights colonization の inhibition of unseen fruit や, to prevent unseen fruit も see ら れ た. ヒ ト に usually use い ら れ る water acidification ア ル ミ ニ ウ ム Alum で エ マ ル ジ ョ ン を as っ た OVA protein cast compared with と し て も, same か よ り strong い antigen specific CD8 + T cells induced と の resistance swollen sores の ワ ク チ ン unseen fruit が raised strong さ れ た. (2) role machine の interpret: そ の function machine sequence と し て, GFP 発 now ベ ク タ ー を with い て a needle syringe お よ び PJI を with い て cast and し, intradermal skin bureau で の both FACS parsing に よ り, CD11c + dendritic cells に, GFP に よ る よ り strong い 蛍 light intensity が raised strong さ れ た. さ ら に, skin bureau よ り lysis liquid を し modulation, ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト parsing line を う と, PJI に よ り cast with 3 hectares of を ピ ー ク に, skin bureau で の OVA の protein レ ベ ル で の よ り strong い 発 now raised strong が see ら れ た.

项目成果

Potent antitumor effects of the conditioned medium of bone marrow-derived mesenchymal stem cells via IGFBP-4.

• DOI: 10.1111/cas.15789
• 发表时间: 2023-06
• 期刊: Cancer science
• 影响因子: 5.7

Conditioned medium of immortalized stem cells from human exfoliated deciduous tooth exhibit protective effect on the peripheral neuropathy of experimental autoimmune neuritis.

人脱落乳牙永生干细胞条件培养基对实验性自身免疫性神经炎周围神经病变具有保护作用。

• 发表时间: 2022
• 作者: Sakamoto E;Hasegawa H;Katahira Y;Miyakawa S;Watanabe A;Mizoguchi I;Yoshimoto T.
• 通讯作者: Yoshimoto T.

アデノウイルス由来の小分子核酸「VA-RNA」を内包した細胞外小胞の IFN誘導機能と抗腫瘍効果

含有腺病毒来源的小核酸“VA-RNA”的细胞外囊泡的IFN诱导功能和抗肿瘤作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 小山 義之;伊藤 智子;杉浦 喜久弥;善本 隆之;溝口 出
• 通讯作者: 溝口 出