感染マクロファージのアポトーシスの関与するカスパーゼファミリーの解析

参与感染巨噬细胞凋亡的Caspase家族分析

• 批准号: 11771371
• 负责人: 小関 健由
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771371/
• 关键词: Actinobacillus actinomycetemcomitans; アポトーシス; 歯周病; マクロファージ; caspase

若年性歯周炎の病原菌であるActinobacillus actinomycetemcomitansをマクロファージに感染させるとアポトーシスが誘導され、さらにこの菌の産生する新規毒素もマクロファージにアポトーシスを誘導することを我々は報告した。ここで歯周炎発症機序を解析するにあたり、この歯周病原菌によるアポトーシスの細胞内メカニズムの解析が大きな課題となった。一方、細胞のアポトーシスの実行分子は、カスパーゼと呼ばれる蛋白質分解酵素ファミリーであり、細菌の細胞内感染によるアポトーシス発症機序の場合のカスパーゼの関与は、サルモネラ菌および赤痢菌がCaspase-1を活性化してIL-1βの分泌を促進すること、およびレジオネラ菌がCaspase-3を活性化してアポトーシスを誘導することが報告されている。そこで本研究では、下位カスパーゼであるCaspase-1及びCaspase-3を活性化する上位カスパーゼであるCaspase-8及びCaspase-9の両者を検索した。J774.1細胞では、A.actinomycetemcomitansの感染マクロファージのアポトーシスの過程で両者が活性化することが示された。しかしながらどちらのCaspaseの活性化経路が重要であるかは、さらなる検証が必要であることも示された。そこで、A.actinomycetemcomitansの感染マクロファージのアポトーシスの過程をこれまでの実験に使用しているJ774.1細胞に加えて、レジオネラ菌の実験に使用されるマクロファージ細胞株RAW264.7細胞へのA.actinomycetemcomitansの感染実験系を確立した。さらにこのRAW264.7細胞にてアポトーシス抑制効果のあるBcl-2及びBcl-X_Lの形質転換株を作製した。この株を使用して上位のCaspaseの活性化経路を検索し、詳細を見当した。

If the pathogen of periodontitis is Actinobacillus actinomycetemcomitans, the infection may be induced and the production of new toxins may be reported. The analysis of the mechanism of periodontitis is a big problem. The expression of Caspase-1 and IL-1β in the expression of Caspase-1 in the expression of Caspase-1β. Caspase-3 is activated by the enzyme and is induced by the enzyme. In this study, Caspase-1 and Caspase-3 were activated, and Caspase-8 and Caspase-9 were activated. J774.1 cells were infected with A.actinomycetemcomitans, and the activation of the virus was demonstrated. The activation pathway of Caspase is important. The infection process of A. actinomycetemcomitans was established by using J774.1 cell line RAW264.7 cell line. In this study, RAW264.7 cells were transfected with Bcl-2 and Bcl-X_L, which inhibited the growth of Bcl-2 and Bcl-X_L. The use of this protein in the activation pathway of Caspase is described in detail below.

项目成果

Sakamoto M.et al.: "Phylogenetic analysis od saccharolytic oral treponemes isolated from human subgingival plaque"Microbiol.Immunol.. 43. 711-716 (1999)

Sakamoto M.等人：“从人类龈下菌斑中分离出的解糖口腔密螺旋体的系统发育分析”Microbiol.Immunol.. 43. 711-716 (1999)

Yamato,K., et al: "Dissociation of bone morphogenetic protein-mediated growth arrest and apoptosis of mouse B cells by HPV-16 E6/7"Experimenal Cell Research. 257. 198-205 (2000)

Yamato,K. 等人：“HPV-16 E6/7 解离骨形态发生蛋白介导的小鼠 B 细胞生长停滞和凋亡”实验细胞研究。

Inohara,N., et al: "An induced proximity model for NF-kappaB activation in the Nod1/RICK and RIP signaling pathways"Journal of Biological Chemistry. 275. 27823-27831 (2000)

Inohara,N. 等人：“Nod1/RICK 和 RIP 信号通路中 NF-kappaB 激活的诱导邻近模型”生物化学杂志。

Okahashi,N., et al: "Osteoclast differentiation is associated with transient upregualtion of cyclin-dependent kinase inhibitor p21WAF1/CIP1 and p27KIP1"Journal of Cellular Biochemistry. 80. 339-345 (2001)

Okahashi,N. 等人：“破骨细胞分化与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p21WAF1/CIP1 和 p27KIP1 的瞬时上调有关”《细胞生物化学杂志》。

Inohara N.et al.: "Nod1,an Apaf-1-like activator of caspase-9 and NF-kB"J.Biol.Chem.. 274. 14560-14567 (1999)

Inohara N.等人：“Nod1，caspase-9 和 NF-kB 的 Apaf-1 样激活剂”J.Biol.Chem.. 274. 14560-14567 (1999)