3次元細胞培養ゲル「ペプチドマトリックス」の創製

3D细胞培养凝胶“肽矩阵”的创建

• 批准号: 17650145
• 负责人: 野水 基義
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17650145/
• 关键词: 3次元細胞培養; インテグリン; キトサン; ペプチドマトリックス; 細胞接着; 神経突起伸長; 表皮細胞; 細胞移植; ペプチド; マトリックス

本研究は、ラミニン由来の機能ペプチドを多糖類に固定化することによって、3次元での細胞培養が可能なゲル「ペプチドマトリックス」を作成し、再生医学や組織工学分野に応用可能な医用生体材料を創製することを目的としている。我々は、組織の発生や修復・再生を調節している基底膜タンパク・ラミニンの機能部位を、ラミニン分子すべてをカバーしたペプチドを用いる網羅的なアプローチで約50種類の機能部位を同定してきた。まずインテグリンに作用するペプチド(10種類)に注目し、これらをキトサン膜に結合させることによりペプチドマトリックスを作成し、細胞接着をはじめとする生物活性を測定したところ、4種類のペプチドを固定化したペプチド-キトサン膜がインテグリン特異的な細胞接着を示した。抗インテグリン抗体を用いた細胞接着阻害実験から、A99(AGTFALRGDNPQG)-キトサン膜はインテグリンαVβ3を介して、EFIzz(ATLQLQEGRLHFXFDLGKGR)-キトサン膜はインテグリンβ1を介して細胞に接着していることがわかった。次に、PC12ラット副腎髄質クロム親和性細胞を用いた実験からA99-キトサン膜のみにPC12細胞神経突起伸長促進が確認された。これらの結果から、インテグリン特異的に作用するペプチドを固定化したペプチド-キトサン膜は、作用するインテグリンのタイプに依存して、作用が異なることが明らかとなったとともに、目的の細胞あるいは組織や用途に合わせたペプチド-キトサン膜の作成が可能性であることが示された。これらの結果は望月らBiopolymers誌に現在印刷中である。また、ペプチド-キトサン膜にヒト表皮細胞を接着させ、ヌードマウスへの移植実験を行ったところ、効率よくヒト表皮細胞がヌードマウスへの移植されることを見いだした。これら結果は、池本らJ Biomed Mater Res A.誌に報告した。

は, this study ラ ミ ニ ン origin の function ペ プ チ ド を polysaccharide に immobilized す る こ と に よ っ て, 3 dimensional で の cell culture が may な ゲ ル "ペ プ チ ド マ ト リ ッ ク ス" を make し, regenerative medicine や tissue engineering eset に 応 may use な medical raw material を created す る こ と を purpose と し て い る. I 々 は, organization の 発 raw や repair, regeneration を adjust し て い る basement membrane タ ン パ ク · ラ ミ ニ ン の functional parts を, ラ ミ ニ ン molecular す べ て を カ バ ー し た ペ プ チ ド を with い る snare of な ア プ ロ ー チ で を の function parts with about 50 kind し て き た. ま ず イ ン テ グ リ ン に role す る ペ プ チ ド に attention し (10 species), こ れ ら を キ ト サ ン membrane に combining さ せ る こ と に よ り ペ プ チ ド マ ト リ ッ ク ス を made し, cells then を は じ め と す る biological activity determination of を し た と こ ろ, 4 species の ペ プ チ ド を immobilized し た ペ プ チ ド - キ ト サ ン membrane が イ ン テ グ リ ン specific The な cells then を show た. Antibodies against イ ン テ グ リ ン を with い た cells and resistance against be 験 か ら, A99 (AGTFALRGDNPQG) - キ ト サ ン membrane は イ ン テ グ リ ン alpha V beta 3 を interface し て, EFIzz (ATLQLQEGRLHFXFDLGKGR) - キ ト サ ン membrane は イ ン テ グ リ ン beta 1 を interface し に て cells then し て い る こ Youdaoplaceholder0 った. に, PC12 ラ ッ ト adrenal mass marrow ク ロ ム affinity cells を using い た be 験 か ら A99 - キ ト サ ン membrane の み に PC12 cells god 経 swelled elongation promote が confirm さ れ た. こ れ ら の results か ら, イ ン テ グ リ ン specific に role す る ペ プ チ ド を immobilized し た ペ プ チ ド - キ ト サ ン membrane は, role す る イ ン テ グ リ ン の タ イ プ に dependent し て, role が different な る こ と が Ming ら か と な っ た と と も に, purpose の cells あ る い や は organization USES に close わ せ た ペ プ チ ド - キ ト サ ン membrane の が can consummate The ability である とが shows された. Youdaoplaceholder0 れら results れら Mochizuki らBiopolymers に is currently in print である. ま た, ペ プ チ ド - キ ト サ ン membrane に ヒ ト epidermal cells を then さ せ, ヌ ー ド マ ウ ス へ の transplant be 験 を line っ た と こ ろ, sharper rate よ く ヒ ト epidermal cells が ヌ ー ド マ ウ ス へ の transplantation さ れ る こ と を see い だ し た. Youdaoplaceholder6 れら results れら, ichimoto らJ Biomed Mater Res A. The chronicle に reports on た.

项目成果

人工基底膜の創製-ラミニン活性ペプチドの新たなチャレンジ-

人工基底膜的制作-层粘连蛋白活性肽的新挑战-

• 发表时间: 2005
• 期刊: 蛋白質核酸酵素 (印刷中)
• 作者: 望月麻友美ら

Cell morphology on biologically active peptide-conjugated chitosan membranes.

生物活性肽缀合壳聚糖膜上的细胞形态。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Peptide Science 2004
• 作者: Mochizuki Mayumi ら;Mochizuki Mayumi ら;Ikemoto Shigehiro ら;Natsumi Yamagataら;Shigehiro Ikemotoら;Tadashi Watanabeら
• 通讯作者: Tadashi Watanabeら

Laminin peptide-conjugated chitosan membrane : a new system for cell delivery in wounded skin.

层粘连蛋白肽缀合壳聚糖膜：一种用于受伤皮肤细胞输送的新系统。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J.Biomed.Mater.Res. (印刷中)
• 作者: Mochizuki Mayumi ら;Mochizuki Mayumi ら;Ikemoto Shigehiro ら;Natsumi Yamagataら;Shigehiro Ikemotoら
• 通讯作者: Shigehiro Ikemotoら

Laminin peptide-conjugated chitosan membrane: Application for keratinocyte delivery in wounded skin

• DOI: 10.1002/jbm.a.30804
• 发表时间: 2006-12-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOMEDICAL MATERIALS RESEARCH PART A
• 影响因子: 4.9
• 作者: Ikemoto, Shigehiro;Mochizuki, Mayumi;Kadoya, Yuichi
• 通讯作者: Kadoya, Yuichi

Angiogenic activitiy of syndecan-binding laminin peptide AG73 (RKRLQVQLSIRT)

• DOI: 10.1016/j.abb.2006.12.026
• 发表时间: 2007-03-15
• 期刊: ARCHIVES OF BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
• 影响因子: 3.9
• 作者: Mochizuki, Mayumi;Philp, Deborah;Nomizu, Motoyoshi
• 通讯作者: Nomizu, Motoyoshi