細胞寿命に関する転写因子レベルでの研究

转录因子水平的细胞寿命研究

基本信息

批准号：
18659108
负责人：
徳久剛史
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659108/
关键词：
老化遺伝子ゲノム癌ストレス

项目摘要

本研究では,マウスの胎児繊維芽細胞(Mouse Embryonal Fibroblast: MEF)の培養系をモデルとして,正常細胞がSenescenceから細胞死に至る過程における分子機構を,Bcl6によるゲノムの安定性や体細胞突然変異の導入抑制機構を含めた分子のレベルで明らかにすることを目的とした。すでにBcl6欠損マウス由来のMEF細胞を用いてSenescenceに入る時期が早くかつ,継代培養8-9代以降では細胞が死滅することを見出した。また,Bcl6欠損MEF細胞におけるIg遺伝子のスイッチ領域やc-Myc遺伝子の体細胞突然変異の頻度が,Senescenceに入る時期に増加することを見出した。すでにRNA修飾酵素Adenosine deaminase acting on RNA1(ADAR1)がBcl6の標的遺伝子の一つであり,Bcl6欠損MEF細胞で発現上昇していることを見出しているので,正常マウスやBcl6欠損マウス由来のMEF細胞の継代培養5代目の細胞にADAR1を遺伝子導入したところ,Ig遺伝子のスイッチ領域やc-Myc遺伝子における体細胞突然変異の頻度が著しく高くなることを見出した。この体細胞突然変異の導入とクロマチンヒストンのアセチル化との関係を解析したところ,Bcl6欠損マウス由来のMEF細胞では継代培養6代以降ですでにクロマチンヒストンのアセチル化が起きていた。また,Bcl6欠損マウス由来のMEF細胞を紫外線(UV)や過酸化水素(H2O2)で処理するとより低いドーズでSenescenceに入り,かつアポトーシスを起こしてくることを見出した。この時にもADAR1の発現誘導とクロマチンヒストンのアセチル化が起きて,体細胞突然変異の導入がみられた。現在,体細胞突然変異の導入と細胞寿命との相関を解析している。

在这项研究中，我们使用该模型来阐明从分子水平衰老到细胞死亡的正常细胞过程中的分子机制，包括BCL6基因组的稳定性以及抑制躯体突变引入的机制。有人发现，来自Bcl6缺陷型小鼠的MEF细胞已经被用来早早进入衰老，并且在亚培养物8-9后死亡。还发现，在进入衰老时，Ig基因开关区域中体细胞突变的频率和C-MYC基因的频率增加。 Since it has been discovered that the RNA-modifying enzyme Adenosine deaminase acting on RNA1 (ADAR1) is one of the target genes of Bcl6 and is increased in Bcl6-deficient MEF cells, ADAR1 was introduced into the fifth generation of subcultured cells of MEF cells derived from normal and Bcl6-deficient mice, the frequency of somatic mutations in the switch region of the Ig gene and C-MYC基因显着增加。当我们分析这种体细胞突变的引入与染色质组蛋白的乙酰化之间的关系时，在六代亚培养后，源自Bcl6缺陷小鼠的MEF细胞已经是染色质组蛋白的乙酰化。还发现，源自BCl6缺陷型小鼠的MEF细胞用紫外线（UV）或过氧化氢（H2O2）处理，并以较低剂量的衰老并引起细胞凋亡。目前，发生了ADAR1表达诱导和染色质组蛋白乙酰化，并引入了体细胞突变。目前，我们正在分析体细胞突变与细胞寿命之间的相关性。