WT1特異的不死化細胞傷害性T細胞クローンを用いたヒト白血病の免疫遺伝子治療

使用 WT1 特异性永生化细胞毒性 T 细胞克隆对人类白血病进行免疫基因治疗

• 批准号: 11140251
• 负责人: 安川 正貴
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140251/
• 关键词: 白血病; 免疫遺伝子治療; WT1; 細胞傷害性T細胞; HLA; Herpesvirus saimiri

白血病の新たな免疫遺伝子治療の開発を目的に研究を行い、下記の研究成果を得た。1)急性白血病ならびに慢性骨髄性白血病急性転化で高率に発現されるWT1のアミノ酸配列から、日本人の約60%が陽性であるHLA-A^*2402結合モチーフを同定した。2)このモチーフを有する9merペプチドを作製し、健常者末梢血単核球から誘導した樹状細胞(DC)にパルスし、自己CD8陽性T細胞をくり返し刺激した。この方法によって、WT1ペプチド特異的HLA-A24拘束性細胞傷害性T細胞クローンTAK-1を樹立した。3)TAK-1は、WT1を発現したHLA-A24陽性白血病細胞に対して特異的に細胞傷害性を示し、正常細胞には全く傷害性を示さなかった。4)健常者骨髄細胞の増殖にも全く影響は認められなかった。5)TAK-1を新世界猿のウイルスであるHerpesvirus saimiri(HVS)により不死化させた。HVS不死化TAK-1は、抗原刺激なくして長期間培養でき、本来のTAK-1同様の抗原特異性を示した。5)この不死化TAK-1に自殺遺伝子を導入する目的で、Herpes simplex virus-1由来thymidine kinase(tk)遺伝子を組み込んだレトロウイルスベクターを作製した。現在、このベクターを用いて不死化TAK-1にtk遺伝子を導入している。以上の結果から、新たなヒト白血病特異的標的抗原が明らかとなり、自殺遺伝子を導入したHVS不死化細胞傷害性T細胞は、白血病に対する免疫遺伝子治療に有用であると考えられる。

The research on the treatment of leukemia with new たな immune progeny 伝 was carried out with the を objective of に research on を and the following is the research result of を た. 1) acute leukemia な ら び に acute leukaemia of sex of bone marrow and chronic planning the で high rate に 発 now さ れ る WT1 の ア ミ ノ acid with column か ら, Japanese の about 60% positive が で あ る HLA - A ^ * 2402 combined モ チ ー フ を with fixed し た. 2) こ の モ チ ー フ を have す る 9 killing ペ プ チ ド を cropping し 単 nuclear ball, health often peripheral blood か ら induced し た dendritic cells (DC) に パ ル ス し, their positive CD8 T cells を く り return し stimulus し た. こ の way に よ っ て, WT1 ペ プ チ ド specific HLA - A24 at cell damaging T cells ク ロ ー ン を TAK - 1 set し た. は TAK - 1, 3) WT1 を 発 now し た HLA - A24 positive leukemia cells に し seaborne て specific に cell damaging を し, normal cells に は く all harmful を shown さ な か っ た. 4) In healthy individuals, the <s:1> proliferation of bone marrow cells に く affects the く recognition められな った った. 5) TAK - 1 を の world ape ウ イ ル ス で あ る Herpesvirus saimiri (HVS) に よ り die change さ せ た. HVS immortality TAK-1 なく, antigen stimulation なく て long-term culture で なく, original <s:1> TAK-1 similar <s:1> antigen specificity を shows た た. 5) こ の に suicide die change TAK - 1 heritage 伝 son を import す る purpose で, Herpes simplex virus get 1 origin thymidine kinase (tk) posthumous son 伝 を group み 込 ん だ レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を cropping し た. Now, こ の ベ ク タ ー を with い て die change TAK - 1 に tk legacy 伝 son を import し て い る. の above results か ら, new た な ヒ ト leukemia antigen specific target が Ming ら か と な り, suicide but 伝 を import し た HVS undead は cell damaging T cells and leukemia に す seaborne る immune heritage 伝 son treatment に useful で あ る と exam え ら れ る.

项目成果

Yasukawa, M., et al.: "Latent infection and reactivation of human herpesvirus 6 in two novel myeloid cell lines" Blood. 93. 991-999 (1999)

Yasukawa, M., et al.：“两种新型骨髓细胞系中人类疱疹病毒 6 的潜伏感染和重新激活”血液。

Yasukawa M., et al: "Analysis of HLA-DRB1 alleles in Japanese patients with chronic myelogenous leukemia"American Journal of Hematology. 63. 99-101 (2000)

Yasukawa M.等人：“日本慢性粒细胞白血病患者的HLA-DRB1等位基因分析”美国血液学杂志。

Ohminami,H.,et al.: "HLA class I-restricted lysis of leukemia cells by a CD8+ cytotoxic T-lymphocyte clone specific for WT1 peptide"Blood. 95. 286-293 (2000)

Ohminami,H.,et al.：“针对 WT1 肽的 CD8 细胞毒性 T 淋巴细胞克隆对白血病细胞进行 HLA I 类限制性裂解”血液。

Yasukawa,M.,et al.: "Fas-independent cytotoxicity mediated by human CD4+ CTL directed against herpes simplex virus-infected cells"Journal of Immunology. 162. 6100-6106 (1999)

Yasukawa, M., et al.：“人 CD4 CTL 介导的针对单纯疱疹病毒感染细胞的不依赖于 Fas 的细胞毒性”免疫学杂志。

Ohminami,H.,et al.: "Fas-independent and nonapoptotic cytotoxicity mediated by a human CD4+ T-cell clone directed against acute myelogenous leukemia-associated DEK-CAN"Blood. 93. 925-935 (1999)

Ohminami, H., 等人：“由人 CD4 T 细胞克隆介导的针对急性髓性白血病相关 DEK-CAN 的不依赖于 Fas 的非凋亡细胞毒性”血液。