权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

WT1特異的不死化細胞傷害性T細胞クローンを用いたヒト白血病の免疫遺伝子治療

使用 WT1 特异性永生化细胞毒性 T 细胞克隆对人类白血病进行免疫基因治疗

基本信息

批准号：
12217104
负责人：
安川正貴
金额：
$ 3.14万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12217104/
关键词：
白血病細胞傷害性T細胞免疫療法遺伝子治療 WT1 HLA

项目摘要

白血病に対する免疫遺伝子治療の開発の目的で研究を遂行し、以下の結果が得られた。転写因子であるWT1は多くの白血病細胞で高発現されているが正常細胞にはほとんど発現されていないことから、WT1は白血病免疫療法の理想的標的抗原と考えられた。まず、日本人の60%以上が陽性であるHLA-A24(HLA-A*2402)のアンカーモチーフを有する9merのWT1由来ペプチドを作製した。健常人末梢血単球から誘導した樹状細胞にWT1ペプチドをパルスし、CD8陽性T細胞を繰り返し刺激した。その結果、WT1ペプチド特異的HLA-A24拘束性CD8陽性細胞傷害性T細胞(CTL)クローンを樹立し、TAK-1と名付けた。TAK-1はWT1を高発現している白血病細胞のうちHLA-A24陽性細胞に対してのみ細胞傷害性を示したが、HLA-A24陰性ならびにWT1発現を認めないリンパ腫由来細胞に対しては細胞傷害性を示さなかった。また、線維芽細胞や末梢血リンパ球などの正常細胞は、HLA-A24の有無に関わらず細胞傷害性を受けず、TAK-1は正常骨髄細胞増殖にも影響を与えなかった。次に、WT1特異的CTLクローンにHerpesvirus saimiri(HVS)を接種し、HVSによってTAK-1を不死化させた。不死化TAK-1は、本来の機能を維持したまま長期間の培養が可能であった。さらに、Herpes simplex virus thymidine kinase(TK)遺伝子をレトロウイルスベクターを用いて不死化TAK-1に導入した。現在、TK遺伝子導入不死化CTLの生体内での白血病細胞増殖抑制効果とガンシクロビルによる人為的排除を、ヒトがん細胞移入SCIDマウスの実験系で検討中である。本研究から得られた結果は、白血病に対する新たな免疫遺伝子治療の開発に結びつくものと考えられ、臨床応用を目指した検討を進めている。

The aim of developing immunogen therapy for leukemia was achieved. The following results were obtained. WT1 is an ideal target antigen for leukemia immunotherapy. More than 60% of Japanese are positive for HLA-A24(HLA-A*2402) and 9mer WT1 is controlled. Healthy human peripheral blood cells were induced to stimulate WT1 cells and CD8 positive T cells. As a result, WT1-specific HLA-A24-binding CD8-positive cytotoxic T cells (CTL) were established and TAK-1-specific T cells were identified. TAK-1 is highly expressed in leukemic cells, HLA-A24 positive cells and WT-1 negative cells. TAK-1 has an effect on proliferation of normal bone marrow cells, and the presence or absence of HLA-A24 is associated with cell nociception. WT1-specific CTL vaccine against Herpesvirus saimiri(HVS), HVS against TAK-1 It is possible to maintain the original function of TAK-1 after long-term cultivation. In addition, Herpes simplex virus thymidine kinase(TK) gene was introduced into the medium without killing TAK-1. Now, TK gene is introduced into the leukemia cell proliferation inhibition effect in vivo of immortal CTL. The artificial exclusion of TK gene into SCID cells is discussed in this paper. The results of this study suggest that the development of novel immunogen therapy for leukemia may be further explored in clinical trials.