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培養肝細胞を用いた機能と増殖を調節する肝組織構築の生化学的研究

使用培养的肝细胞调节功能和增殖的肝组织构建的生化研究

基本信息

批准号：
02454156
负责人：
市原明
金额：
$ 2.56万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至 1992
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02454156/
关键词：
肝細胞初代培養細胞接触細胞周期肝再生肝臓機能

项目摘要

(1)肝細胞Spheroid及び単層培養による細胞周期調節Primaria培養皿でラット肝細胞をinsulin.EGFを含むWilliams E(WE)培地で3日培養するとSpheroidを形成した。Spheroidでは増殖促進に十分な条件でもDNA合成はほとんどみられずAlbuminの強い発現がみられ典型的Go期にあると考えられた。Spheroidをcollagen塗布培養皿に移し培養すると徐々にSpheroidが崩れて単層を成形した。そして単層形成に従ってDNA合成の促進とAlbumin量の低下がみられた。更に培養すると分裂像がみられた。以上の結果は肝細胞の機能と増殖は細胞接触(或は細胞の形)によって強く相反的に調節されている事を示す。また単層培培養とSpheroid培養を相互に転換することにより細胞周期を調節できるようになり細胞周期を解析する為の有効なin vitro実験系が確立できた。(2)肝細胞における脂肪酸合成酵素肝特異酵素のPyruvate Lactateによる誘導肝細胞を高密度でinsulin、Dexamethasone、T3を含むWE培地にPyruvate又はLactateを30mM添加して6日間培養すると細胞の維持が良くFatty acid synthetase、Glucoseー6ーPhosphate dehydrogenase、Malic enzyme Citrate cleavage enzyme等の脂肪酸合成系の酵素とGlucokinaze,Aldolase B等の肝特異酵素の誘導が著明となった。この事からATPの受生と肝細胞の機能発現は特異的に相関していることが示唆された。(3)肝臓障害時の肝細胞増殖因子(HGF)の増加ラットに四塩化炭素を与えると一日後に肝HGF活性は20倍増加する。また肝硬変患者腹水中にも増加する。いづれも精製しその性質は吾々の発見したHGFと同じであることを確認した。

(1) Hepatic cell Spheroid and Williams E (WE) were incubated for 3 days to form Spheroid. The cell cycle was detected in Primaria petri dish and Williams E (WE) was detected in Spheroid cell. Spheroid colonization promotion is very important for the synthesis of DNA. This is a typical case of Goh phase in which Albumin is strongly detected. Spheroid, collagen, cloth, peel, peel, Spheroid, crumble, moulding, forming. The formation of different levels of DNA synthesis promotes the production of low levels of Albuminous. Even more so, it's like splitting up like a baby. The above results show that the liver cell mechanism can induce cell contact (or the shape of the cell) to strongly induce the opposite effect of cell contact. The cell cycle is different from each other in terms of cell cycle, cell cycle, Spheroid, cell cycle, cell cycle and cell cycle. (2) Fatty acid biosynthesis enzymes in liver cells Pyruvate Lactate enzymes lead liver cells to contain high-density insulin, Dexamethasone, T3 WE culture Pyruvate and Lactate culture 30mM to maintain good Fatty acid synthetase, Glucose 6-Phosphate dehydrogenase, Malic enzyme Citrate cleavage enzyme fatty acid synthesis enzymes such as enzyme Glucokinaze,Aldolase B and other enzymes. The ATP recipient's cell phone can detect special information about each other. (3) Hepatic cytopathic factor (HGF) was added during the period of liver failure, and the activity of hepatic HGF was increased 20 times after one day. The ascites of the patients with liver cirrhosis was added to the ascites. Please tell me that I am sorry to hear that HGF is the same as you are.