血管作動性ペプチドの臨床的意義に関する分子生物学的研究

血管活性肽临床意义的分子生物学研究

• 批准号: 05454320
• 负责人: 中尾 一和
• 金额: $ 4.61万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05454320/
• 关键词: ナトリウム利尿ペプチド; 脳性ナトリウム利尿ペプチド; トランスジェニックマウス; 心筋症ハムスター; エンドセリン; エンドセリン受容体; 転写調節; エンドセリン受容体遺伝子

I.ナトリウム利尿ペプチドファミリーに関する分子生物学的研究1)BNP遺伝子過剰発現トランスジェニックマウス(TGM)の開発:肝臓で発現するヒトSerum amyloid P componentのプロモーターに我々のクローニングしたマウスBNP遺伝子を連結し、複数系統のTGMを得た。マウスBNPの特異的RIAにて測定したTGMの血中BNP濃度は対照マウスの10〜100倍と著しく上昇しており、更に有意の血中cGMP濃度の上昇が認められた。これらのTGMの平均血圧は対照マウスと比べて明らかに低値を示した。このことより、BNPの慢性ホルモン作用が証明され、その治療薬としての長期投与の有用性が示唆された。2)ハムスターBNPのcDNAクローニングと心筋症ハムスターにおける遺伝子発現の検討:ハムスター心臓から作成したcDNAライブラリーより、ハムスターBNPcDNA全長をクローニングし、32アミノ酸よりなるハムスターBNPの構造を明らかにした。32週齢の肥大型心筋症ハムスター及び拡張型心筋症ハムスターにおいて、心室のBNPmRNA濃度は対照の3倍以上に増加し、更に血中BNP濃度は7倍以上に上昇して100fmol/mlに達し、同じく上昇を認める血中ANP濃度(40fmol/ml)の3倍であった。このことより、心筋症ハムスターがヒト心疾患におけるBNPの病態生理的意義の検討に有用なモデルであることが明らかとなった。II.エンドセリン(ET)受容体に関する分子生物学的研究1)ET-A及びET-B受容体遺伝子の転写調節機構:ヒトET-A受容体遺伝子の5'隣接領域の5kb断片とレポーター遺伝子(ルシフェラーゼ)とのfusion plasmidを作製し、functional assayを行った。培養ラット糸球体メサンギウム細胞にトランスフェクションした結果、コントロールに比し約200倍のルシフェラーゼ活性の亢進を認めた。更に、この断片を5'端より欠失させて作製した種々のdeletion mutantsを用いた検討により、ATGコドンの上流0.6-0.1kbの領域にpositive regulatory elementsの存在が、また5-1.3kbの領域にnegative regulatory elementsの存在が明らかになり転写調節に関与するシス配列の存在が示唆された。ET-B受容体遺伝子についても同様の検討を行っている。

i. The study on molecular biology of diuresis was not effective. 1) the BNP gene was used to analyze the molecular biology (TGM). The results showed that there was no significant difference between the two groups (TGM). The results showed that there was a significant difference between the two groups (TGM). The results showed that there was a significant difference between the two groups in the study of molecular biology. the results showed that there were significant differences between the two groups. The RIA of the BNP instrument determines the BNP concentration in the blood of the TGM. The radiation dose is 10100 times higher than that of the cGMP in the blood, and more intentionally. The average blood of the TGM shows that the light is lower than the light. The long-term investment and usefulness of the long-term investment and the usefulness of the long-term investment and the usefulness of the long-term investment in the treatment of chronic diseases, such as BNP, chronic diseases, chronic diseases and chronic diseases. 2) in this case, you can see that the heart disease is affected by BNP

项目成果

H.Arai,et al.: "The human endothelin-B receptor gene-structural organization and chromosomal assignment-." J.Biol.Chem.268. 3463-3470 (1993)

H.Arai 等人：“人内皮素 B 受体基因结构组织和染色体分配。”

G.Shirakami et al.: "Low doses of endothelin-I inhibit atrial natriuretic peptide secretion." Endocrinology. 132. 1905-1912 (1993)

G.Shirakami 等人：“低剂量的内皮素-I 抑制心房钠尿肽的分泌。”

E.Morita et al.: "Increased plasma levels of brain natriuretic peptide in patients with acute myocardial infarction." Circulation. 88. 82-91 (1993)

E.Morita 等人：“急性心肌梗塞患者血浆脑钠肽水平升高。”

H.Itoh et al.: "Brain natriuretic peptide levels in the umbilical venous plasma are elevated in fetal distress." Biology of the Neonate. 64. 18-25 (1993)

H.Itoh 等人：“胎儿窘迫时，脐静脉血浆中的脑钠肽水平升高。”

G.Shirakami et al.: "Central action of C-type natriuretic peptide on vasopressin secretion in conscious rats." Neuroscience Letters. 159. 25-28 (1993)

G.Shirakami 等人：“C 型利钠肽对清醒大鼠加压素分泌的中枢作用。”