ヒトiPS細胞による脂肪萎縮症の脂肪細胞再生―脂肪萎縮症ヌードマウスによる検討
使用人 iPS 细胞再生脂肪萎缩患者的脂肪细胞 - 使用脂肪萎缩裸鼠进行的研究
基本信息
- 批准号:21659233
- 负责人:
- 金额:$ 1.98万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
我々はin vitroでiPS細胞の脂肪細胞への分化誘導を世界で最初に示した(FEBS Lett. 2009; 583:1029)。さらにin vivoでヒトiPS・ES細胞由来の分化細胞が生着し、機能するかに関しては外胚葉系細胞以外ではほとんど研究されていない。今回、脂肪萎縮性糖尿病の細胞治療の実現へ向けてin vitroにおいてヒトiPS・ES細胞由来脂肪細胞の分化誘導と分化細胞のヌードマウス生体内での生着に関する検討を行った。ヒトiPS細胞とヒトES細胞を胚様体形成を介する方法で脂肪細胞への分化誘導を行い、細胞(1×107個相当)を回収しmatrigelに懸濁し、8週齢の雄性ヌードマウスの皮下へ移植を行った。移植後、2週、4週で組織を摘出の後、パラフィン切片および凍結切片を作製し組織学的検討を行った。また2週のサンプルから核酸を抽出し脂肪細胞関連遺伝子の発現を検討した。In vitroの分化誘導において脂肪蓄積とPPARγ2やC/EBPα, aP2, Leptin, Adiponectinなどの脂肪細胞関連遺伝子の発現を認めた。分化誘導後のヒトiPS・ES細胞を移植後2週、4週で摘出した組織においてHE染色で菲薄化した細胞質と扁平な核を持つ脂肪細胞様組織構造を認めた。さらにヒトvimentin特異的抗体を用いてヒト細胞由来であることを示した。Oil Red O染色でも脂肪滴が染色された。移植後2週の組織を摘出し、PCRにて脂肪細胞関連遺伝子であるPPARγ2, C/EBPβ, aP2, LeptinのmRNA発現が確認された。In vitroの分化誘導においてヒトiPS・ES細胞が脂肪細胞に分化することを示しヒトiPS・ES細胞由来脂肪細胞がin vivoにおいて生着することを初めて示した。脂肪萎縮性糖尿病に対するiPS細胞を用いた細胞治療法の開発への着実なステップとなると考えられる。
The induction of adipocyte differentiation of iPS cells in vitro was first demonstrated in the world (FEBS Lett. 2009; 583:1029)。In vivo, iPS·ES cells are derived from differentiated cells, and their functions are related to the development of cells other than ectodermal cells. In recent years, cell therapy for lipoatrophic diabetes has been carried out in vitro, iPS and ES cells have been induced to differentiate from adipocytes, and the development of adipocytes in vivo has been discussed. Methods for the induction of adipocyte differentiation by iPS cells and ES cells were used. Cells (1×107 equivalent) were recovered, matrigel suspended, and 8-week-old male embryos were transplanted subcutaneously. After transplantation, 2 weeks and 4 weeks, tissue extraction, preparation of frozen sections and histological evaluation were performed. 2 weeks later, nucleic acids were extracted and adipocyte-associated genes were detected. In vitro differentiation induction, fat accumulation, PPARγ2, C/EBPα, aP2, Leptin, Adiponectin and adipocyte related gene development are identified. After differentiation induction, iPS and ES cells were harvested 2 weeks and 4 weeks after transplantation. HE staining showed that the cytoplasm was thin and the nucleus was flat. Tissue structure of adipocytes was recognized. The vimentin specific antibody is used in cell culture. Oil Red O stain is a fat drop stain. Two weeks after transplantation, tissue was extracted and PCR was used to detect mRNA expression of adipocyte-associated genes PPARγ2, C/EBPβ, aP2 and Leptin. In vitro differentiation is induced in iPS·ES cells and adipocyte differentiation is induced in vivo in iPS·ES cells Development of cell therapy for lipoatrophic diabetes using iPS cells
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Translational research of novel hormones : lessons from animal models and rare human diseases for common human diseases
新型激素的转化研究:动物模型和罕见人类疾病对人类常见疾病的教训
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Nakao K;Yasoda A;Ebihara K;Hosoda K;Mukoyama M.
- 通讯作者:Mukoyama M.
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- 影响因子:0
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- 通讯作者:中尾一和
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- DOI:10.1128/mcb.00225-09
- 发表时间:2009-09
- 期刊:
- 影响因子:5.3
- 作者:N. Sawada;H. Itoh;K. Miyashita;Hirokazu Tsujimoto;Masakatsu Sone;K. Yamahara;Z. Arany;F. Hofmann;K. Nakao
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- DOI:
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- 期刊:
- 影响因子:0
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- 通讯作者:et al
Translational Research -Lessons from Animal Models and Rare Human Diseases-
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- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Yang;Q.;Saito;T.;Isogai;A.;森正樹;Kazuwa Nakao
- 通讯作者:Kazuwa Nakao
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