インスリンシグナル伝達におけるフォスファチジル・イノシトール-3キナーゼの役割

磷脂酰肌醇 3 激酶在胰岛素信号传导中的作用

• 批准号: 05670128
• 负责人: 林 日出喜
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670128/
• 关键词: PI-3キナーゼ; インスリンシグナル伝達; グルコーストランスポータータイプ4

本研究は、インスリンレセプターチロシンキナーゼによりチロシンリン酸化され、さらに活性化されたPI3-キナーゼがインスリンシグナル伝達のうちGLUT4の細胞膜へのtranslocationに関与するのか検討した。GLUT4は膜を12回貫通するタンパクでインスリンの標的細胞では通常細胞内の膜分画に存在しているが、インスリン刺激によりこのGLUT4をのせている膜分画は細胞膜と融合することによりGLUT4は細胞膜上に現われグルコースを取り込む。我々はc-mycエピトープ14アミノ酸からなるペプチドをコードする合成DNAをGLUT4cDNA上の第1番目の細胞外ループに挿入し、それを脂肪細胞で発現させたところ、内在性のGLUT4と同様にインスリン刺激でtranslocationもするし、糖の取り込みも促進する事がわかった。またこのtranslocationはc-mycエピトープに対する抗体による細胞表面上での結合により簡単に定量的に検出することが可能となった。また脂肪細胞より扱いが簡単なチャイニーズハムスターの細胞(CHO細胞)でもこのキメラGLUT4がインスリン刺激でtranslocationすることが明らかになった。そしてこの細胞にPI3-キナーゼのinhibitorであるワートマニン(50nM)加えると、インスリンレセプター自己リン酸化、IRS-1のリン酸化が影響を受けることなくPI-3キナーゼ活性はほぼ完全に押さえられ、それと同時にGLUT4のトランスロケーションも完全に押さえられることからインスリン刺激により活性化されたPI-3キナーゼはGLUT4のtranslocationをmediateしている可能性が高いと思われる。

In this study, we found that there was no significant difference between the two groups in this study. In this study, we found that acidification, activation, PI3-, activation, activation, acidification, acidification, activation, acidification, activation, acidification, acidification, activation, activation, The cell of GLUT4 membrane is usually divided into two parts: intracellular membrane separation, stimulation, GLUT4, membrane separation, cell membrane fusion, membrane separation, cell membrane fusion, membrane separation, membrane separation, membrane fusion, cell membrane fusion, membrane separation, membrane fusion, membrane fusion, cell membrane fusion, cell membrane fusion, membrane separation, membrane separation, membrane fusion, membrane fusion, membrane separation, membrane separation, membrane fusion, membrane fusion, membrane separation, membrane fusion, membrane separation, membrane separation, membrane fusion, membrane fusion, membrane separation, membrane separation, membrane fusion, membrane fusion, membrane separation, membrane separation, membrane fusion, membrane fusion, membrane separation, membrane separation, membrane We found that there was no significant difference between the two groups in the synthesis of DNA GLUT4cDNA. The first item on the DNA GLUT4cDNA, the extracellular domain, the fat cell, the internal GLUT4, the translocation stimuli, the glucose extract, the first item, the fat cell, the cell, the fat cell, The quantity of antibody antibody on the cell surface of the cell was quantified by translocation

项目成果

Kanai,F.,Hayashi,H.et al.: "Insulin-stimulated GLUT4 translocation is relevant to the phosphorylation of IRS-1 and the activity of PI3-kinase" Biochem.Biophys.Res.Commun.195. 762-768 (1993)

Kanai,F.,Hayashi,H.等人：“胰岛素刺激的 GLUT4 易位与 IRS-1 的磷酸化和 PI3 激酶的活性有关”Biochem.Biophys.Res.Commun.195。

林日出喜、蛯名洋介他: "実験医学" 羊土社, 9 (1993)

Hideki Hayashi、Yosuke Ebina 等：《实验医学》Yodosha，9 (1993)

Nishiyama,T.,Hayashi,H.et al.: "Expression of the gene encoding the tyrosine kinase-deficient human insulin receptor in transgenic mice" Gene. (in press).

Nishiyama,T.,Hayashi,H.等人：“编码酪氨酸激酶缺陷型人胰岛素受体的基因在转基因小鼠中的表达”基因。

Hayashi,H.,Ebina,Y.et al.: "The α-type 85-kDa subunit of phosphatidylinositol 3-kinase is phosphorylated at tyrosines 368,580,and 607 by the insulin receptor." J.Biol.Chem.268. 7107-7117 (1993)

Hayashi, H.、Ebina, Y. 等人：“磷脂酰肌醇 3-激酶的 α 型 85-kDa 亚基在酪氨酸 368,580 和 607 处被胰岛素受体磷酸化。” -7117 (1993)

林日出喜、蛯名洋介他: "実験医学" 羊土社, 10 (1993)

Hideki Hayashi、Yosuke Ebina 等：《实验医学》Yodosha，10 (1993)