膜融合タンパク質の活性化とウイルス感染のトポロジー
膜融合蛋白的激活和病毒感染的拓扑结构
基本信息
- 批准号:05670143
- 负责人:
- 金额:$ 1.22万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1993
- 资助国家:日本
- 起止时间:1993 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
パラミクスウイルスはRNAウイルスであり,エンベロープを有しているが,エンベロープに局在する膜融合活性をもつ糖蛋白質Fが本ウイルスの動物細胞への感染に重要な役割を果している。F蛋白質は宿主動物細胞の結合型ポリゾームで膜融合活性のない前駆体蛋白質F_oとして生合成される。本ウイルスはプロテアーゼの遺伝子を有していないので,F_oは宿主細胞内のプロテアーゼの作用を受けて膜融合能を有するF_1+F_2のヘテロニ量体を形成する。我々は,パラミクソウイルスの一種であるニューカッスル病ウイルス(NDV)のF蛋白質の生合成と細胞内プロセシング,ウイルス粒子形成と動物細胞への感染の機構に宿主細胞内のトランスゴルジ膜でのプロセシングプロテアーゼによる活性化が関与していることを明らかにした。NDVには強毒株(Miyadera等)と弱毒株(D26)があるが夫々のF_oのプロセッシングプロテアーゼによる切断点のアミノ酸配列は,強毒株ではArg-Gin-Arg-Argのカルボキシル側であり,弱毒株ではArg-Gln-Gly-Argのカルボキシル側である。前者はトランスゴジル膜のプロテアーゼで切断され,後者は細胞膜表面で切断される。一方,オルトミクソウイルスの一種であるインフルエンザウイルスにおいては,エンベローブに局在するヘマグルチニン(HA)が膜融合活性を有するがNDVのFと同様に宿主細胞内で活性化される。我々は,HAもFと同じ宿主細胞内のオルガネラで活性化が起こることを明らかにした。次に,ラット肝よりトランスゴルジ膜を調製して,膜結合性のプロセシングプロテアーゼを可溶化,精製した。F_o活性化酵素3種類が見出され,そのうち1つはfurinであったが,F_o活性化を最も強く起こすプロテアーゼはCa依存性のセリンプロテアーゼであったが,furinとは異なる新しいプロテアーゼであった。
パ ラ ミ ク ス ウ イ ル ス は RNA ウ イ ル ス で あ り, エ ン ベ ロ ー プ を have し て い る が, エ ン ベ ロ ー プ に bureau in す る membrane fusion activity を も つ sugar protein F が this ウ イ ル ス の animal cell へ の infection に important な "を cut fruit し て い る. F protein is a host animal cell <s:1> binding type ポリゾ ムで ムで membrane fusion activity <s:1> な 駆 prosome protein F_oと て て biosynthesis される. This ウ イ ル ス は プ ロ テ ア ー ゼ の heritage 伝 son を し て い な い の で, F_o は within the host cell の プ ロ テ ア ー ゼ の role を by け て membrane fusion can have す を る F_1 + F_2 の ヘ テ ロ を ニ quantity body formation す る. I 々 は, パ ラ ミ ク ソ ウ イ ル ス の a で あ る ニ ュ ー カ ッ ス ル disease ウ イ ル ス の (NDV) の F protein biosynthesis と intracellular プ ロ セ シ ン グ, ウ イ ル ス particles と animal cell へ の institutions に の infection within the host cell の ト ラ ン ス ゴ ル ジ membrane で の プ ロ セ シ ン グ プ ロ テ ア ー ゼ に よ る activeness が masato and し て い る こ と Youdaoplaceholder0 Ming ら た に た た. NDV に は virulent strain (Miyadera etc) と weak strain (D26) が あ る が husband 々 の F_o の プ ロ セ ッ シ ン グ プ ロ テ ア ー ゼ に よ る cutoff point の ア ミ ノ match column は acid, strong strain で は Arg - Gin - Arg - Arg の カ ル ボ キ シ ル side で あ り, weak strain で は Arg - Gln - Gly - Arg の Youdaoplaceholder0 ボキシ ボキシ である side である. The former <s:1> トラ スゴジ スゴジ スゴジ スゴジ <s:1> membrane <s:1> プロテア ゼで ゼで ゼで cuts され, while the latter で membrane surface で cuts される. Side, オ ル ト ミ ク ソ ウ イ ル ス の a で あ る イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス に お い て は, エ ン ベ ロ ー ブ に bureau in す る ヘ マ グ ル チ ニ ン (HA) が membrane fusion activity を す る が NDV の F と with others に で within the host cell activeness さ れ る. I 々 は, HA も F と with じ within the host cell の オ ル ガ ネ ラ で activeness が up こ る こ と を Ming ら か に し た. Time に ラ ッ ト liver よ り ト ラ ン ス ゴ ル ジ membrane を modulation し て, membrane associativity の プ ロ セ シ ン グ プ ロ テ ア ー ゼ を solubilization, refined し た. F_o active phenoloxidase out 3 kinds が さ れ, そ の う ち 1 つ は furin で あ っ た が, F_o activeness を since most strong も く こ す プ ロ テ ア ー ゼ は Ca dependency の セ リ ン プ ロ テ ア ー ゼ で あ っ た が, furin と は different な る new し い プ ロ テ ア ー ゼ で あ っ た.
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
A.Tsuji et al: "Identification of nevel cDNAs encoding human kexin like protease,PACE4 isoforms." Biochem.Biophys.Res.Commn.(in press). (1994)
A.Tsuji 等人:“编码人类 Kexin 样蛋白酶、PACE4 亚型的新 cDNA 的鉴定。”
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- 影响因子:0
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松田佳子: "メジカルビュー社" プロテアーゼとそのインヒビター, 359 (1993)
松田芳子:《医学观点出版》蛋白酶及其抑制剂,359(1993)
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
A.Tsuji et al: "Lysosomal enzyme replacement using α_2-macroglobulin as a transport vehicle." J.Biochem.115 (in press). (1994)
A.Tsuji 等人:“使用 α_2-巨球蛋白作为运输载体的溶酶体替代酶。”J.Biochem.115(出版中)。
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- 作者:
- 通讯作者:
A.Tsuji et al: "Identification of the targeting proteinase for rat α_1-macrogloburin in vivo." Biochemical Journal. 298. 79-85 (1994)
A.Tsuji 等人:“大鼠 α_1-巨球蛋白体内靶向蛋白酶的鉴定”,《生化杂志》298. 79-85 (1994)。
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