ケキシンファミリー,PACE4アイソフォームの生成機構と細胞機能制御

PACE4亚型Kexin家族、产生机制及细胞功能调控

• 批准号: 09267223
• 负责人: 松田 佳子
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09267223/
• 关键词: PACE4アイソフォーム; クローニング; ルシフェラーゼ活性; 転写開始点; SPC4; bHLH転写因子; Ebox

本研究においては,PACE4Aおよび申請者らにより同定されたPACE4C,PACE4D,PACE4Eの4つよりなるPACE4アイソフォームの細胞特異的発現機構及びその生理機能の違いを解明するため,PACE4遺伝子5'-上流域の機能解析,アイソフォームの酵素学的性質,脳,内分泌器官における分布を明らかにした.特に,PACE4Cはインスリン産生との関連,PACE4Eは脳内神経ペプチド産生との関連を追求した.antisense RNAの発現系を作製し,PACE4によるペプチド産生への寄与を解析した.PACE4遺伝子の5'-上流域をコードするDNA断片をクローニングし,プライマーエクステンション法を用いて,各種培養細胞及び各種臓器より分離したpoly(A)+RNAを鋳型として転写開始点の決定を行い,各アイソフォームの転写開始点の違いを明らかにした.5'-上流域DNA断片をレポタ-ジーンであるルシフェラーゼ発現ベクターに組み込み,培養細胞にトランスフェクションを行い,発現したルシフェラーゼ活性を測定することにより,プロモーター領域とくにbHLH転写因子による発現調節を行うシスエレメントを同定した.

In this study, PACE 4A and PACE4C,PACE4D and PACE 4E were identified as the four components of PACE 4A and PACE 4E, and the cell-specific mechanisms and physiological functions of PACE 4A and PACE 4E were elucidated. In particular,PACE4C gene expression and correlation,PACE 4E gene expression and correlation in the pursuit of antisense RNA production system,PACE 4C gene expression and correlation, PACE 4E gene expression and correlation, PACE 4C gene expression and A variety of cultured cells and a variety of apparatus were used to isolate poly(A)+RNA, determine the start point of transcription, and determine the start point of transcription of each protein. The DNA fragment in the 5'-upstream region was detected. The field of vision and vision is the same as the field of vision.

项目成果

A.Tsuji, Y.Matsuda, et al.: "Gene Organization and Alternative Splicing of Human PACE4,Subtilisin-like Proprotein Convertase" FASEB.J.11. A1224 (1997)

A.Tsuji、Y.Matsuda 等人：“人类 PACE4、枯草杆菌蛋白酶样前蛋白转化酶的基因组织和选择性剪接”FASEB.J.11。

A.Tsuji, Y.Matsuda, et al.: "Genomic Organization and Alternative Splicing of Human PACE4 (SPC4),Kexin-Like Processing Endoprotease" J.Biochem (Tokyo). 122. 438-452 (1997)

A.Tsuji、Y.Matsuda 等人：“人类 PACE4 (SPC4)、Kexin 样加工内切蛋白酶的基因组组织和选择性剪接”J.Biochem（东京）。

T.Akamatsu, Y.Matsuda, et al.: "Developmental Expression of a Novel Kexin Family Protease,PACE4E,in the Rat Olfactory System" Histochem.Cell Biol. 108. 95-103 (1997)

T.Akamatsu、Y.Matsuda 等人：“新型 Kexin 家族蛋白酶 PACE4E 在大鼠嗅觉系统中的发育表达”Histochem.Cell Biol。

松田佳子, 辻明彦: "前駆体蛋白質の活性化とケキシンファミリー,プロセシングプロテアーゼ" 蛋白質核酸酵素. 42. 2355-2361 (1997)

Yoshiko Matsuda、Akihiko Tsuji：“前体蛋白和 Kexin 家族的激活，加工蛋白酶”蛋白质核酸酶。 42. 2355-2361 (1997)

K.Mori, Y.Matsuda, et al.: "A Novel Human PACE4 Isoform,PACE4E Is an Active Processing Protease Containing a Hydrophobic Cluster at the Carboxy Terminus" J.Biochem (Tokyo). 121. 941-948 (1997)

K.Mori、Y.Matsuda 等人：“一种新型人类 PACE4 同工型，PACE4E 是一种在羧基末端含有疏水簇的活性加工蛋白酶”J.Biochem（东京）。