パルボウイルスB19によるG2期停止/アポトーシス誘導機構と宿主特異性因子の研究

细小病毒B19 G2期阻滞/凋亡诱导机制及宿主特异性因素研究

• 批准号: 14657072
• 负责人: 菅村 和夫
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657072/
• 关键词: ヒトパルボウイルスB19; 細胞周期停止; p21; WAF1; 赤芽球系細胞; B19ウイルス; 非構造蛋白NS1; 細胞周期; DNAヘアピン構造

ヒトパルボウイルスB19の唯一の感染標的細胞は赤芽球である。B19ウイルスは赤芽球へ感染し、細胞周期停止とアポトーシスを誘導することによって、赤血球分化を抑制し、貧血をもたらす。本研究では、このようなB19ウイルスによる宿主細胞への影響を解析するために、B19ウイルスに高感受性のエリスロポエチン(Epo)依存性赤芽球系細胞株UT7クロン(UT7/Epo-S1)を樹立した。これまでUT7/Epo-S1細胞にB19ウイルスを感染させると細胞周期のG1期とG2期の両期で停止がみられ、G1期停止にはB19ウイルスの非構造蛋白質NS1が必須であること、G2期停止はNS1を発現できない不活化ウイルスによっても誘導されることを明らかにしてきた。本年度は、先ず、NS1によるG1期停止のメカニズムを詳細に調べた。その結果、293T細胞にNS1遺伝子導入をすると細胞周期抑制因子として知られているp21/WAF1発現が誘導され、このp21/WAF1発現誘導がSp1転写因子の活性化を介していることを明らかにした。すなわち、NS1がSp1に会合し、p21/WAF1プロモーターの活性化が惹起されていることが分かった。さらに、p21/WAF1欠損細胞ならびに、p21/WAF1特異的siRNAを用いたp21/WAF1発現欠損あるいは低下した条件下では、NS1遺伝子導入によるG1期停止が解除されることを明らかにした。以上の結果から、NS1によるG1期停止はp21/WAF1発現誘導を介していることが示唆された。他方、G2期停止に関わるウイルス側因子として、アデノ随伴ウイルスの場合のようにウイルスDNA末端のヘピン構造が重要であることが推察された。

The only infected cell in B19 is the red bud ball. B19 was infected with red bud ball, cell cycle was stopped, red blood cell differentiation was inhibited, and blood cell differentiation was inhibited. In this study, the host cell was isolated from the host cell, and the host cell strain UT7 strain (UT7/Epo-S1) was isolated from the dependent red bud coccidiosis strain (Epo). The cell line B19

项目成果

Chisaka, H., Morita, E., Murata, K., Ishii, N., Yaegashi, N., Okamura, K., Sugamura, K.: "A transgenic mouse model for non-immune hydrops fetails induced by the NS1 gene of human parvovirus B19"Journal of General Virology. 83. 273-281 (2002)

Chisaka, H., Morita, E., Murata, K., Ishii, N., Yaegashi, N., Okamura, K., Sugamura, K.：“由 NS1 诱导的非免疫性水肿胎儿的转基因小鼠模型

Chisaka, H., Morita, E., Tada, K., Yaegashi, N., Okamura, K, Sugamura, K.: "Establishment of multifunctional monoclonal antibody to the nonstructural protein, NS1. of human parvovirus B19."J.Infection. 47. 236-242 (2003)

Chisaka, H.、Morita, E.、Tada, K.、Yaegashi, N.、Okamura, K、Sugamura, K.：“针对人细小病毒 B19 非结构蛋白 NS1 的多功能单克隆抗体的建立。”

Kanazawa, C., Morita, E., Yamada, M., Ishii, N., Miura, S., Asao, H., Yoshimori, T., Sugamura, K.: "Effects of deficiencies of STAMs and Hrs, mammalian class E Vps proteins, on receptor downregulation"Bioch.Biophys.Res.Comm.. 309. 848-856 (2003)

Kanazawa, C.、Morita, E.、Yamada, M.、Ishii, N.、Miura, S.、Asao, H.、Yoshimori, T.、Sugamura, K.：“STAM 和 Hrs 缺陷的影响，哺乳动物

Morita, E., Sugamura, K.: "Human parvovirus B19-induced cell cycle arrest and apoptosis"Springer Seminars in Immunopathology. 24. 187-199 (2002)

Morita, E., Sugamura, K.：“人类细小病毒 B19 诱导的细胞周期停滞和细胞凋亡”施普林格免疫病理学研讨会。

Morita, E., Nakashima, A., Asao, H., Sato, H., Sugamura, K: "Human parvovirus B19 non-structural protein (NS1) induces cell cycle arrest at G1 phase."J.Virol.. 77. 2915-2921 (2003)

Morita, E.、Nakashima, A.、Asao, H.、Sato, H.、Sugamura, K：“人类细小病毒 B19 非结构蛋白 (NS1) 诱导细胞周期停滞在 G1 期。”J.Virol.. 77