造血幹細胞をニッシェに導くホーミングレセプターのクローニング

克隆引导造血干细胞到达微环境的归巢受体

基本信息

批准号：
14657239
负责人：
中内啓光
金额：
$ 2.05万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657239/
关键词：
造血幹細胞ニッシェホーミング

项目摘要

昨年度は骨髄移植後の造血幹細胞の骨髄への到達状況について表面マーカーを利用して定量的に解析し、移植後6時間から12時間後に骨髄中に再現性を持ってGFP陽性c-Kit+Sca-1+Lin-(KSL)細胞の出現ピークが観察されることを明らかにした。また、脾臓には移植直後からGFP陽性KSL細胞の集積が認められたが、明確なピークは存在しなかった。しかし、これはあくまで造血前駆細胞をマーカーで見ているだけであり、本当に移植後の造血幹細胞に骨髄出現ピークがあるかどうかは不明であった。そこで今年度は機能的な側面から造血前駆細胞のホーミングを解明することを目的として研究を進めた。FACSで骨髄細胞中のCD34-KSL細胞(造血幹細胞)、CD34+KSLFLT3+細胞(造血前駆細胞)、CD34+KSLFLT3-細胞(より未分化な造血前駆細胞)の3つの分画の細胞をソーティングし、それぞれ200個の細胞を致死量放射線照射したマウスに移植した。移植1日後、2日後、3日後に脾臓細胞および骨髄細胞を回収してコロニーアッセイを行ったところ、いずれの分画も移植1日後では脾臓にのみコロニー産生細胞の存在を認めた。CD34-KSL細胞およびCD34+KSLFLT3-細胞を移植した群では2日目から骨髄にコロニー産生細胞を認め、3日目にかけてその数は増加する傾向が見られた。一方、CD34+KSLFL3+細胞を移植した群では脾臓でのコロニー産生細胞が移植1日後には認められたものの、2日目以降は減少した。骨髄には1日目2日目ともに頃に産生細胞を認めなかったが3日目よりその数は急増する傾向が認められた。このように、造血幹細胞や未分化な造血前駆細胞のホーミングはいきなり骨髄に行くよりも一度脾臓に行ってある程度分裂してから骨髄に移動する可能性が強く示唆される結果となった。一方で、造血前駆細胞の分化段階によってホーミングの場所が異なる可能性も示唆されており、ホーミングレセプター発現クローニングに用いる細胞の種類や細胞を回収する組織について貴重な情報が得られた。

去年，我们定量分析了使用表面标记在骨髓移植后到达骨髓的造血干细胞的状态，表明在植入后6至12小时的骨玛格中观察到在骨玛格中观察到GFP阳性C-KIT+SCA-1+LIN-（KSL）细胞的峰值。此外，尽管移植后立即在脾脏中观察到GFP阳性KSL细胞的积累，但没有明显的峰。然而，这仅显示造血祖细胞作为标志物，尚不清楚移植后造血干细胞中是否出现峰值骨髓。因此，今年我们进行了研究，目的是从功能性的角度阐明造血祖细胞的归巢。 CD34-KSL细胞（造血干细胞），CD34+KSLFLT3+细胞（造血祖细胞）和CD34+KSLFLT3-细胞（更不差异驱动的造血祖细胞）的三个馏分中的细胞被面部和200个细胞分类，每个细胞都将其分类。植入后1、2和3天收集脾细胞和骨髓细胞，并进行菌落测定。在这两个部分中，仅在植入后仅在脾脏中观察到产生菌落的细胞的存在。 In the group transplanted with CD34-KSL cells and CD34+KSLFLT3- cells, colony-producing cells were observed in the bone marrow from day 2, and the number of these cells tended to increase over day 3. On the other hand, in the group transplanted with CD34+KSLFL3+ cells, colony-producing cells in the spleen were observed one day after implantation, but decreased from the second day向后。在第1天或第2天，在骨髓中都没有发现细胞，但是从第3天开始倾向于急剧增加。因此，强烈建议，造血干细胞的归位和未差异的造血祖细胞可能会脾脏一次，然后再散发到一定程度上，然后再分开到一定程度上，而不是在骨骨髓上移动，而不是突然转移到骨骼摩洛。另一方面，还有人提出，归巢的位置可能取决于造血祖细胞的分化阶段，从而提供了有关用于表达寄养受体和收集细胞组织的细胞类型的宝贵信息。