アンチセンス転写で形質発現に破綻をきたすダブルジーントラップマウスの開発

开发通过反义转录破坏性状表达的双基因陷阱小鼠

• 批准号: 14658271
• 负责人: 桑野 良三
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14658271/
• 关键词: ジーントラップ; ES細胞; アンチセンス

[ジーントラップ系統マウスGT3-11の再作出]既報のジーントラップ系統マウスGT3-11(Zoolog Sci.,1996,13:277-283)の生殖系列キメラマウスを複数匹得るために、GT3-11 ES細胞(129系統マウス由来)を用いて再作出を試みした。この系統ではジーントラップベクター(GTV)挿入部位において、その上流に位置するEif4al遺伝子と下流に位置するFxr2h遺伝子から、収束性の転写(センス-アンチセンス転写)が認められている(Gene,1999,237:53-60;第25回日本分子生物学会,プログラム・講演要旨集,P679,2002)。従って、この系統マウスは本研究プロジェクトのモデルマウスと位置付けることができると考えられ、再作出により上記収束性転写の再現性が確認できると思われる。その結果、GT3-11ES細胞を注入した118個の胚盤胞をICR (CRJ Inc.)偽妊娠マウスに移植し、28匹のキメラマウス(♂:♀:21:7)を得た。C57BL/6J (CRJ Inc.)と交配し、生殖系列キメラマウスと確認されたものは8匹(♂:♀=7:1)であった。そのうち高率な生殖系列キメラマウス4匹.(全て♂)をC57BL/6J♀と交配し、得られた胎児を用いて以下の実験を遂行し、今現在解析を進めている。1)RT-PCR法2)ノーザン法3)X-ga1染色4)胎齢13.5日胚由来初代線維芽細胞を用いたネオマイシン耐性実験

[ジ ー ン ト ラ ッ プ system マ ウ ス GT3-11 の again make] both the の ジ ー ン ト ラ ッ プ system マ ウ ス GT3-11 (Zoolog Sci., 1996, 13:277-283) series の reproductive キ メ ラ マ ウ ス を plural horse must る た め に, GT3-11 ES cells (origin of the 129 system ウス ウス)を is then used to make を test み た た た. こ の system で は ジ ー ン ト ラ ッ プ ベ ク タ ー (GTV) scions into parts に お い て, そ の upper position に す る Eif4al heritage 伝 と obscene に location す る Fxr2h posthumous son 伝 か ら, 収 beam の planning to write (セ ン ス - ア ン チ セ ン ス planning write) が recognize め ら れ て い る (Gene, 1999237:53-60; 25th Japanese Society for Molecular Biology,プログラム · Proceedings of lectures,P679,2002). 従 っ て, こ の system マ ウ ス は this study プ ロ ジ ェ ク ト の モ デ ル マ ウ ス と position pay け る こ と が で き る と exam え ら れ, again make に よ り written 収 beam availability planning write の reproducibility が で き る と think わ れ る. を そ の results, GT3-11 es cells into し た 118 の blastoderm cell を ICR (CRJ Inc.) pseudo pregnancy マ ウ ス し に transplantation, 28 horse の キ メ ラ マ ウ ス (♂ ♀ : when) を た. C57BL / 6 j (CRJ Inc.) と mating し series, reproductive キ メ ラ マ ウ ス と confirm さ れ た も の は 8 horse (: ♂ ♀ = 7:1) で あ っ た. そ の う ち な reproductive series high rate キ メ ラ マ ウ ス 4 horses. (full て ♂) を C57BL / 6 j ♀ と し, and mating ら れ た tire where を with い て の below be 験 を conducts し, today now parse を into め て い る. 1) rt-pcr method 2) ノ ー ザ ン method 3) X - 4) tire 齢 ga1 dyeing line 13.5 days early embryonic origin generation d を bud cells with い た ネ オ マ イ シ ン patience be 験

项目成果

Chika Kutuwada et al.: "Investigation of the transcription in C6 cells trapped by a novel gene trap vector of convergent type"Acta Medica et Biologica. 51-1(印刷中). (2003)

Chika Kutuwada 等人：“由聚合型新型基因捕获载体捕获的 C6 细胞中的转录的研究”Acta Medica et Biologica 51-1（印刷中）。