シナプス伝達機序に対するATPのフィードバック修飾の細胞生理学的解析

ATP反馈修饰对突触传递机制的细胞生理分析

• 批准号: 05680720
• 负责人: 八尾 寛
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05680720/
• 关键词: 自律神経節; シナプス前終末; ATP; アデノシン受容体; カルシウムチャネル; 細胞内カルシウム; ω-ユノトキシン; fura-2

1.孵卵14-15日のニワトリ胚を断頭し、動眼神経と毛様体神経節を同定した。蛍光Ca^<2+>指示薬のFura-2を結合したdextran(fura-dextran)を動眼神経の断端に投与することにより、杯状シナプス前終末を選択的に標識した。1個のシナプス前終末から、活動電位各々に応答する細胞内Ca^<2+>濃度の変化が捉えられた。シナプス前終末のCa^<2+>濃度は、静止状態で20-60nM(n=10)、単一活動電位により、10-20nM上昇した。2.ATPは、興奮性シナプス電流(EPSC)を抑制すると同時に活動電位に伴うシナプス前終末のCa^<2+>上昇を著明に抑制した。これらのATPの作用は、アデノシンA1受容体特異的な阻害薬の8-cyclopentyltheophylline(CPT、1μM)により拮抗された。また、アデノシンにより、EPSCおよびシナプス前終末のCa^<2+>上昇が抑制され、CPTにより拮抗された。以上により、ATPは速やかにアデノシンに分解され、アデノシンA1受容体を活性化することにより、シナプス前終末のCa^<2+>上昇が抑制され、その結果、伝達物質の放出が抑制されることが分かった。3.杯状シナプスには、ω-コノトキシン感受性と抵抗性の2種類のCa^<2+>チャネルサブタイプが存在している。アデノシンは、ω-コノトキシン感受性のCa^<2+>流入を抑制するのに対し、ω-コノトキシン抵抗性のCa^<2+>流入を抑制しない。すなわち、ω-コノトキシン感受性のCa^<2+>チャネルが、アデノシンにより選沢的に修飾されることが示された。アデノシンの作用の大部分がCa^<2+>チャネルの抑制により説明される。4.アデノシンがω-コノトキシン感受性のCa^<2+>チャネルを特異的に抑制することから、アデノシン受容体とこのCa^<2+>チャネルが近接していることが考えられる。他の可能性として、ω-コノトキシン抵抗性のCa^<2+>チャネルには、A1受容体の情報伝達系と反応するような分子ドメインが存在しないことが考えられる。

1. Incubation 14-15 days after the embryo is cut off, the eyes move, and the hair is fixed. The light Ca^<2+> indicates that Fura-2 binds to dextran(fura-dextran), which is the symbol of the end of the eye. 1. Changes in intracellular Ca^<2+> concentration at the end of each activity potential. Ca^<2+> concentrations before and after treatment varied from 20-60nM(n=10) to 10 -20nM(n=10) at rest and from 10-20nM at active potential. 2. ATP and excitatory current (EPSC) are inhibited simultaneously with Ca^<2+> increase at the terminal of ATP and EPSC. This ATP action was antagonized by the receptor-specific inhibitor 8-cyclopentyltheophylline(CPT, 1μM). The Ca^<2+> increase in the end of the treatment was inhibited and antagonized by CPT. The above results show that ATP can be rapidly decomposed and activated in A1 receptor, and Ca^<2+> can be inhibited before and after ATP release. 3. Two kinds of Ca^<2+>-Ca2 +-Ca2 +-Ca2 Ca ^<2 +> influx inhibition of omega-3 receptor and omega-3 receptor The sensitivity of Ca^<2+> is not obvious. Most of the effects of Ca^<2+> 2 + on the growth of the cell were explained. 4. The Ca^<2+> generation of receptivity is closely related to the Ca^<2 +> generation. Other possibilities, ω-C, Ca^<2+>, Ca^<2+>, Ca ^<2 +

项目成果

八尾 寛: "ω-Conotoxin-sensitive and resistant transmitter release from the chick ciliary presgnapfic terminal." Journal of Physiology(London). (印刷中).

Hiroshi Yao：“鸡睫状体妊娠末期对 ω-芋螺毒素敏感且具有抗性的递质释放。”《生理学杂志》（伦敦）（正在出版）。

八尾寛: "An improved method for perforated patch recordings using nystatin-fluorescein mixture." Japanese Journal of Physiology. 43. 267-273 (1993)

Hiroshi Yao：“使用制霉菌素-荧光素混合物进行穿孔贴片记录的改进方法。”日本生理学杂志 43. 267-273 (1993)

八尾 寛: "Preferential inhibition of ω-conotoxin-sensitive presgnapfic Ca^<2+> channels by adenosine autoreceptors." Nature. 365. 256-258 (1993)

Hiroshi Yao：“腺苷自身受体对 ω-芋螺毒素敏感的前 Ca^<2+> 通道的优先抑制。” Nature 365. 256-258 (1993)

八尾 寛: "Modulation of presgnapfic calcium channels by neurotransmitters." Biomedical Research. (印刷中).

Hiroshi Yao：“神经递质对妊娠前钙通道的调节”。（生物医学研究）。