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シナプス伝達機序に対するATPのフィードバック修飾の細胞生理学的解析

ATP反馈修饰对突触传递机制的细胞生理分析

基本信息

批准号：
05680720
负责人：
八尾寛
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.孵卵14-15日のニワトリ胚を断頭し、動眼神経と毛様体神経節を同定した。蛍光Ca^<2+>指示薬のFura-2を結合したdextran(fura-dextran)を動眼神経の断端に投与することにより、杯状シナプス前終末を選択的に標識した。1個のシナプス前終末から、活動電位各々に応答する細胞内Ca^<2+>濃度の変化が捉えられた。シナプス前終末のCa^<2+>濃度は、静止状態で20-60nM(n=10)、単一活動電位により、10-20nM上昇した。2.ATPは、興奮性シナプス電流(EPSC)を抑制すると同時に活動電位に伴うシナプス前終末のCa^<2+>上昇を著明に抑制した。これらのATPの作用は、アデノシンA1受容体特異的な阻害薬の8-cyclopentyltheophylline(CPT、1μM)により拮抗された。また、アデノシンにより、EPSCおよびシナプス前終末のCa^<2+>上昇が抑制され、CPTにより拮抗された。以上により、ATPは速やかにアデノシンに分解され、アデノシンA1受容体を活性化することにより、シナプス前終末のCa^<2+>上昇が抑制され、その結果、伝達物質の放出が抑制されることが分かった。3.杯状シナプスには、ω-コノトキシン感受性と抵抗性の2種類のCa^<2+>チャネルサブタイプが存在している。アデノシンは、ω-コノトキシン感受性のCa^<2+>流入を抑制するのに対し、ω-コノトキシン抵抗性のCa^<2+>流入を抑制しない。すなわち、ω-コノトキシン感受性のCa^<2+>チャネルが、アデノシンにより選沢的に修飾されることが示された。アデノシンの作用の大部分がCa^<2+>チャネルの抑制により説明される。4.アデノシンがω-コノトキシン感受性のCa^<2+>チャネルを特異的に抑制することから、アデノシン受容体とこのCa^<2+>チャネルが近接していることが考えられる。他の可能性として、ω-コノトキシン抵抗性のCa^<2+>チャネルには、A1受容体の情報伝達系と反応するような分子ドメインが存在しないことが考えられる。

1. On the 14th to 15th day of incubation, the embryo will be decapitated, the eyes will be moved, the hair will be raised, the body will be raised, and the body will be raised.荍光Ca^<2+> indicates 薬のFura-2をcombinationしたdextran(fura-dext ran) することにより, することにより, and the cup-shaped シナプス former terminal をselected に logo した. 1 のシナプス former terminal から, activity potential each 々に応respond する intracellular Ca^<2+>concentration の変化が取えられた. The pre-terminal Ca^<2+> concentration is シナプス, the resting state is 20-60nM (n=10), the single activity potential is により, and the 10-20nM rise is した. 2. ATP and excitatory current (EPSC) are suppressed and at the same time, the activity potential is accompanied by an increase in the pre-terminal Ca^<2+> and is suppressed.これらのATP's action は, アデノシンA1 receptor-specific なblocking 薬の8-cyclopentyltheophylline (CPT, 1μM) により antagonism された.また, アデノシンにより, EPSC およびシナプス former terminal のCa^<2+> rise がsuppression され, CPT により antagonism された. The above is the decomposition of ATP and the activation of ATP A1 acceptor and the activation of ATP.ナプス前TerminalのCa^<2+>rise and suppress され, そのresult, 伝达matterのreleaseが inhibit されることが分かった. 3. There are two types of cup-shaped シナプスには and ω-コノトキシン susceptibility and resistance のCa^<2+>チャネルサブタイプが existence している.アデノシンは、ω-コノトキシンsensitivityのCa^<2+>inflow suppressionするのに対し, ω-コノトキシンresistant のCa^<2+> inflow suppression しない.すなわち、ω-コノトキシンsensitivityのCa^<2+>チャネルが, アデノシンにより沢's にmodification されることがshows された. Most of the action of アデノシンののCa^<2+>チャネルの inhibits により explanation される. 4.アデノシンがω-コノトキシンsensitivity のCa^<2+>チャネルをspecific にinhibition することから, アデノシンReceiver とこのCa^<2+>チャネルが close contact していることが考えられる. His possibility, ω-コノトキシン resistance, Ca^<2+>チャネルには, A1 The information of the recipient is the existence of the anti-intellectual element とするようなmolecule and the existence of the holder.