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膵β細胞GABA分泌特性の細胞生理学的研究

胰腺β细胞GABA分泌特性的细胞生理研究

基本信息

批准号：
08877006
负责人：
八尾寛
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.マウス膵臓ランゲルハンス島からβ細胞をRorsman & Trube(1986)の方法で単離した。これを小脳培養細胞の細胞体を接触させ、両者にパッチクランプ法を適用した。β細胞に脱分極パルスを与えることにより、Ca^<2+>電流を観察したにも関わらず、小脳培養細胞に GABA誘発電流を認めなかった。2.同様の実験をニスタチン穿孔パッチ法を用いて行ったが、脱分極やグルコース刺激にを与えたときのβ細胞からのGABAの遊離を認めなかった。3.ラット膵臓ランゲルハンス島をサンプリングチューブに集め、遊離されるGABAをHPLC法により定量した。細胞内総GABA量の2.5-6%が浮遊液中に放出された。4.グルコース刺激によるGABA遊離の上昇は認められなかった。5.以上により、グルコース刺激や脱分極により、GABAが放出されない可能性が考えられる。GABAの分泌は他のメカニズムにより制御されていかも知れない。他の可能性として、グルコースや脱分極により分泌されるGABAは、自発的に遊離されるものに比べわずかであることが考えられる。測定精度を上げることにより、以上の可能性を明らかにしていく必要がある。また、GABAの遊離とインシュリンの分泌を比較する必要がある。6.膵α細胞由来の株細胞のαTC6は、GABA_A受容体を発現していることが報告さている(Gaskins et al.1995)。これを単離β細胞と共培養し、密着した細胞どうしから記録することにより、GABAの分泌を捉えることを計画している。

1. Rorsman & Trube(1986) The cell body of the cultured cell is contacted with the cell body of the cultured cell, and the cell body is contacted with the cell body of the cultured cell.β-cell depolarization and Ca^2+> current detection, GABA induced current detection 2. In the same way, we can use the method of "depolarization" to stimulate the beta cells. 3. HPLC method for quantitative determination of GABA 2.5-6% of intracellular GABA was released into suspension. 4. GABA free rise due to stimulation 5. The possibility of GABA release is examined. GABA secretion is controlled by other drugs. The possibility of GABA release is different from that of GABA secretion. The accuracy of the measurement is high, and the above possibilities are clear. A comparison of GABA release and secretion is necessary. 6. It has been reported that α TC6, the cell line from which α cells originated, and GABA_A receptors have been discovered (Gaskins et al. 1995). This is a plan for co-culture of isolated beta cells and for the secretion of GABA.