エリスロポエチンレセプターからのチロシンリン酸化を介した細胞内情報伝達機構の解析

促红细胞生成素受体酪氨酸磷酸化介导的细胞内信号转导机制分析

基本信息

批准号：
06671076
负责人：
三浦修
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

私達はこれまでに,エリスロポエチン(エポ)レセプターのC末端領域はPhosphatidylinositol3-kinase(PI3K)と結合することを見出しているが,この領域が増殖刺激伝達以外のどのような機能を担っているかを検討するため,この領域を欠如したレセプターおよび細胞内膜近位部の点突然変異によりJak2キナーゼ活性化能を失ったレセプターを,BaF3細胞に発現させエポ刺激によるヘモグロビンの発現を指標に赤芽球系への分化誘導能の検討を行った.その結果,PI3Kとの結合能を有するレセプターのC末端領域は分化誘導にも必要でなく,Jak2活性化能を有する膜近位部がやはり分化にも必要であることが判明した(投稿準備中).また,私達はエポレセプターC末端領域の機能を探る過程で,SH2領域を有するチロシンホスファターゼであるHematopoietic cell phosphatase(HCP)が,やはりこの領域のチロシンリン酸化に依存してエポレセプターと結合することを見出した(Blood85:87-95,1995).この結合は,C末端領域による増殖刺激抑制に関与している可能性が高く,今後より詳細な検討を要する.エポ刺激によるRas/MAPキナーゼ経路活性化につき検討したところ,エポ刺激はRas活性化に関与しているShcのチロシンリン酸化とGrb2/Ashとの結合を誘導することを見出した.これらの現象はC末端部を欠いたレセプターではほとんど認められなかった.さらに,エポ刺激はRasの下流にあるMAPキナーゼの活性化ももたらしたが,この活性化もやはりレセプターのC末端領域に依存性を示した.これらのことよりエポレセプターはShcのチロシンリン酸化とGrb2/Ashとの結合を介してRas/MAPキナーゼ経路を活性化すると考えられる.しかし,この経路の活性化は増殖シグナル伝達に必須ではないレセプターのC末端領域に依存しており,レセプターからのシグナル伝達における意義の解明は今後の課題である(J.Biol.Chem.269:29962-69,1994).

We have previously found that the C-terminal region of the erythropoietin (epo) receptor binds to Phosphatidylinositol3-kinase (PI3K), but to investigate what functions this region plays other than proliferation stimulation transmission, we have expressed receptors that lack this region and receptors that have lost their ability to activate Jak2 kinase due to point mutations in the proximal endometrial region of the cell.使用PO刺激将血红蛋白表达为指数，我们研究了诱导分化成红细胞系统的能力。结果，发现具有与PI3K结合的受体的C末端区域对于分化不是必需的，并且具有激活JAK2的能力的近端膜也需要分化（准备发布）。此外，在探索Eporeceptor的C末端区域的功能中，造血症，造血，一种带有SH2区域的酪氨酸磷酸酶。我们的细胞发现，磷酸酶（HCP）再次与e骨受体结合，具体取决于该区域的酪氨酸磷酸化（血液85：87-95，1995）。这种结合可能参与C末端区域抑制增殖刺激，需要进一步研究。当我们通过eposulation研究RAS/MAP激酶途径的激活时，我们发现中学诱导SHC的酪氨酸磷酸化，该SHC参与RAS激活，并与GRB2/Ash结合。这些现象很少在缺乏C末端区域的受体中观察到。此外，登录还导致RAS下游的MAP激酶的激活，这也显示出对受体的C末端区域的依赖。从这些发现中，可以相信Eporeceptor通过SHC的酪氨酸磷酸化激活RAS/MAP激酶途径并与Grb2/Ash结合。然而，该途径的激活取决于受体的C末端区域，这对于增殖信号并不是必不可少的，并且阐明了来自受体信号的重要性是未来的挑战（J.Biol。Chem。269：29962-69，1994）。