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GDAP-1の機能解析

GDAP-1的功能分析

基本信息

批准号：
11480184
负责人：
辻崇一
金额：
$ 4.99万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11480184/
关键词：
GDAP P19細胞 Neuro2a細胞細胞分化ディファレンシャル・ディスプレイ

项目摘要

本年度は昨年度に引き続きGDAP-1〜-10のORFのクローニングとその解析を行った。その結果、1)GDAP-群の発現解析:これらはマウスの発生過程で見る限りいずれもE16-P7の時期に神経系に特異的に発現していた。また、P19細胞を神経系に分化させたときもGDAP-群の発現が同様に見られることが明らかになった。2)GDAP-1の解析:マウス、ヒトのcDNAライブラリーからORFを含む複数のクローンを得た。いずれも358アミノ酸をコードしており、94%の相同性をもつことが明らかとなった。従って、マウスとヒトとの間で高度に保存されたアミノ酸配列を持つタンパク質であることが明らかになった。現在のところデータべ一スに登録されておらず、新規タンパク質である。C-、N-末端側それぞれにMyc,FLAGを融合させNeuro2aに発現させると、N-末端側が細胞質、C-末端側がERに存在していた。アミノ酸配列を見ると、C-末端側近傍に一回膜貫通領域と推定される配列が見られる。また、細胞質領域に核移行シグナルに似た配列があることがあきらかになった。さらに、Two-hybrid systemを用いて、細胞質領域のGDAP-1と相互作用をするタンパク質を検索し、幾つかの候補を得たのでその同定・解析をも開始した今後、これらGDAP-群の解析やTwo-hybrid systemなどにより、この細胞増殖抑制機構を解明して行く予定である。

This year is the first year since the introduction of GDAP-1 ~-10 ORF analysis. The results are as follows: 1) Analysis of GDAP-group occurrence: The occurrence of GDAP-group in E16-P7 period is limited to E16-P7 period. P19 cell line differentiation and development of GDAP-1 2) Analysis of GDAP-1: The ORF of GDAP-1 was obtained from the cDNA library. The 358-year-old is 94% identical. In addition, the quality of the product is not limited to the quality of the product. Now, the new rules are in place. C-and N-terminal sides are fused with Myc,FLAG, and Neuro2a, and N-terminal sides are cytoplasmic and C-terminal sides are ER. A membrane penetration field near the C-terminal side is presumed to be located in the vicinity of the acid alignment. In the cytoplasmic domain, nuclear migration occurs. In addition, the use of the Two-hybrid system, the cytoplasmic domain of GDAP-1 interaction, the quality of the search, the number of candidates to obtain the same determination, analysis began, in the future, the GDAP-group analysis and the Two-hybrid system, the cell growth inhibition mechanism to understand the predetermined determination.