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増殖抑制誘導能を持つ糖転移酵素遺伝子の解析

具有诱导生长抑制能力的糖基转移酶基因分析

基本信息

批准号：
07273274
负责人：
辻崇一
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

GD3合成酵素遺伝子を発現させた細胞に何が引き起こされて増殖抑制が起こるのかを分子細胞生物学的に解明すること、他の糖鎖遺伝子に同様の作用を持つものがあるか否か検討することを目的とし解析を進めた。1.GD3合成酵素遺伝子を発現させたNeuro2a細胞の解析:昨年度は、GD3合成酵素遺伝子を一過性に発現させるベクター(pcD-SRα系)を用いた。しかし、この系では、当該遺伝子発現後生じる現象を経時的に解析するには不向きである。そこで、TetによりGD3合成酵素の発現を調節できるベクター系を確立した。今後、この系を用いて、GD3合成酵素の発現を誘導後、増殖抑制に至るまで、経時的にガングリオシド各分子種の発現、各種がん遺伝子、なにびに、HPC-1、アセチルコリンエステラーゼなどの発現がどのように消長してゆくのかmRNA,タンパク質レベルで解析することが可能となった。2.他の糖鎖遺伝子に増殖抑制を促すものがあるか否かの検討:我々がクローニングした16種の糖転移酵素遺伝子の中ににGD3合成酵素遺伝子と同様の作用を持つものがあるか否かを検討した。その結果、H-タイプのα1,2-フコース転移酵素遺伝子を発現させると、Neuro2a細胞のガングリオシドはほとんどFuc-GM1だけになり、GD3合成酵素遺伝子にみられた分化とは異なった方向に分化しうることが明らかとなった。GD3合成酵素遺伝子の結果と合わせて考えると、細胞表層の糖脂質性糖鎖は細胞の状態をある程度規定していると考えられる。さらに、様々な糖転移酵素遺伝子を導入し発現させることにより、細胞表層の糖鎖を様々に改変することが可能であることを示している。これは、がん細胞の転移や増殖を抑制する新しい戦略の可能性を示唆するものである。いずれにしてもさらに詳細な検討が必要てある。

GD3 synthase gene expression in the cell how to trigger, growth inhibition and molecular cell biology to understand, other sugar chain gene related role in the development of the target analysis. 1. Analysis of Neuro2a cells with GD3 synthase gene expression: yesterday, GD3 synthase gene transient expression was detected in the pcD-SRα system. When the gene appears, the analysis of the gene will be carried out. GD3 synthase production is regulated by Tet and Tet. In the future, the gene expression of GD3 synthase will be induced, the growth inhibition period will be delayed, and the gene expression of each molecular species will be delayed. The gene expression of HPC-1 and the gene expression of GD3 synthase will be delayed. 2. Among the 16 sugar transfer enzyme genes, GD3 synthase gene and the same function are discussed. As a result, H-protein α1,2-subunit shift enzyme gene was developed in Neuro2a cells, and GD3 synthase gene was differentiated in different directions. GD3 synthetic enzyme gene results in the formation of lipid chains on the surface of cells and the state of cells. The introduction of sugar transfer enzymes into cells is possible. The possibility of cell migration and proliferation is discussed. In the middle of the day, we need to discuss in detail.