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増殖抑制誘導能を持つ糖転移酵素遺伝子の解析

具有诱导生长抑制能力的糖基转移酶基因分析

基本信息

批准号：
08265263
负责人：
辻崇一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

GD3合成酵素遺伝子を発現させた細胞に何が引き起こされて増殖抑制が起こるのかを分子細胞生物学的に解明すること、他の糖鎖遺伝子に同様の作用を持つものがあるか否か検討することを目的とし解析を進めた。1.GD3合成酵素遺伝子を発現させたNeuro2a細胞の解析:本年度は、昨年度開発したテトラサイクリン系を用いたGD3合成酵素の発現のOn/Offを人為的に制御できる系を用いて、GD3合成酵素遺伝子発現後、ガングリオシドの合成と細胞表層での発現過程、ならびに、増殖抑制あるいは形態的に神経突起伸展に至るまでの過程を、それぞれ経時的に解析した。その結果、(i)当該遺伝子発現後、ほぼ2週間後に増殖が抑制されるとともに神経突起伸展が観察されること。(ii)GD3合成酵素遺伝子の発現をOnにした後、8時間後にはmRNAの発現が観察され、以後低レベルながらほぼ一定量の発現が見られた。(iii)GD3合成酵素遺伝子発現後4日後までは、GD3の合成・発現は増大し、以後経時的に減少していった。それに相反して、GD1b,GQ1bの発現量は次第に増加し、10日後以降ほぼ一定になることが明らかになった。これらの結果は、GD3の発現が直接増殖抑制に結びつくというよりは、幾つかの情報伝達系を経て増殖抑制に至ることを示唆している。今後、Differential display法などを用いてさらに詳細にGD3合成酵素の発現を誘導後、増殖抑制に至るまでなにが起こるのかを解析してゆく必要がある。2.他の糖鎖遺伝子に増殖抑制を促すものがあるか否かの検討:我々がクローニングした16種の糖転移酵素遺伝子の中にGD3合成酵素遺伝子と同様の作用を持つものがあるか否かを検討したが、本年度は新しい系を見つけることはできなかった。まだ幾つか検討しなければならない系が残っているので、今後も継続して調べてゆくことが必要である。

GD3 biosynthetic enzymes were isolated from the cells of the host cell, which led to the inhibition of colonization, the molecular biology of the cell biology, and the effect of the same enzyme on the biological function of the molecule. The analysis of 1.GD3 synthetic enzyme has shown that Neuro2a cell analysis: this year and last year, this year and last year, we began to use On/Off synthetic enzyme to control the use of On/Off synthetic enzyme. After the GD3 synthetic enzyme was used, the synthesis of GD3 synthetic enzyme was completed, and the synthesis process was improved. Colonization inhibits the extension of the epigastrium protuberance in the shape of the animal to the analysis of the process and the duration of the cycle. The results were as follows: (I) the colonization was inhibited and the protuberances were stretched out after the first two days of the experiment. (ii) the GD3 synthesis enzyme was detected by mRNA after 8: 00, and then by a certain amount of time after 8: 00. (iii) after 4 days of incubation of GD3 synthesis enzyme, GD3 synthesis showed a significant increase in temperature, and a decrease in temperature in the future. On the contrary, the amount of GD1b,GQ1b will be increased after 10 days, and you will know that after 10 days, you will know that you will know better. The results showed that the direct colonization inhibition was detected by GD3. The results showed that the direct colonization inhibition was caused by the direct colonization inhibition. In the future, after the Differential display method was used to detect the activity of GD3 synthesis enzyme, the colonization inhibition was detected. two。 The growth inhibition of GD3 biosynthesis enzymes in the 16 glucose transferase substrates has the same effect as that in the current year, and this year's new strategy is based on the same effect of the same enzyme. I don't know what to do. I don't know. I don't know if it's necessary.