増殖抑制誘導能を持つ糖転移酵素遺伝子の解析

具有诱导生长抑制能力的糖基转移酶基因分析

• 批准号: 08265263
• 负责人: 辻 崇一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265263/
• 关键词: ガングリオシド; 増殖抑制; 糖転移酵素; シアル酸転移酵素; テトラサイクリン

GD3合成酵素遺伝子を発現させた細胞に何が引き起こされて増殖抑制が起こるのかを分子細胞生物学的に解明すること、他の糖鎖遺伝子に同様の作用を持つものがあるか否か検討することを目的とし解析を進めた。1.GD3合成酵素遺伝子を発現させたNeuro2a細胞の解析:本年度は、昨年度開発したテトラサイクリン系を用いたGD3合成酵素の発現のOn/Offを人為的に制御できる系を用いて、GD3合成酵素遺伝子発現後、ガングリオシドの合成と細胞表層での発現過程、ならびに、増殖抑制あるいは形態的に神経突起伸展に至るまでの過程を、それぞれ経時的に解析した。その結果、(i)当該遺伝子発現後、ほぼ2週間後に増殖が抑制されるとともに神経突起伸展が観察されること。(ii)GD3合成酵素遺伝子の発現をOnにした後、8時間後にはmRNAの発現が観察され、以後低レベルながらほぼ一定量の発現が見られた。(iii)GD3合成酵素遺伝子発現後4日後までは、GD3の合成・発現は増大し、以後経時的に減少していった。それに相反して、GD1b,GQ1bの発現量は次第に増加し、10日後以降ほぼ一定になることが明らかになった。これらの結果は、GD3の発現が直接増殖抑制に結びつくというよりは、幾つかの情報伝達系を経て増殖抑制に至ることを示唆している。今後、Differential display法などを用いてさらに詳細にGD3合成酵素の発現を誘導後、増殖抑制に至るまでなにが起こるのかを解析してゆく必要がある。2.他の糖鎖遺伝子に増殖抑制を促すものがあるか否かの検討:我々がクローニングした16種の糖転移酵素遺伝子の中にGD3合成酵素遺伝子と同様の作用を持つものがあるか否かを検討したが、本年度は新しい系を見つけることはできなかった。まだ幾つか検討しなければならない系が残っているので、今後も継続して調べてゆくことが必要である。

GD3 synthetase posthumous son 伝 を 発 now さ せ た cell に any が lead き こ さ れ て raised colonization inhibitory が こ る の か を molecular and cellular biology に interpret す る こ と, he の sugar but 伝 lock に with others の role を hold つ も の が あ る か no か beg す 検 る こ と を purpose と し parsing を into め た. 1. GD3 synthetase heritage 伝 son を 発 now さ せ た Neuro2a cells の resolution: this annual は, yesterday's annual open 発 し た テ ト ラ サ イ ク リ を ン department with い た GD3 synthetase の 発 の now On/Off を man-made に suppression で き を る department with い て GD3 synthesis and enzyme heritage 伝 発 presently after, ガ ン グ リ オ シ ド の synthetic と cell surface で の 発 process, な ら び に, raised colonization suppression あ る い は に 経 bumps に extend to god in the form of る ま で を の process, そ れ ぞ れ 経 に when parsing し た. そ の results, (I) when the legacy 伝 発 presently after, ほ ぼ に raised after 2 weeks between colonization が inhibit さ れ る と と も に god 経 protuberant stretch が 観 examine さ れ る こ と. (ii) GD3 synthetase posthumous son 伝 の 発 を now On に し た, 8 time after に は mRNA の 発 now が 観 examine さ れ, low after レ ベ ル な が ら ほ ぼ amount の 発 が now see ら れ た. (iii) Four days after the appearance of the 伝 enzyme of the GD3 synthetic enzyme, まで, the synthesis and appearance of GD3 <s:1> increase <s:1>, and then に decrease <s:1> て った った った over time. そ れ に instead し て, GD1b, GQ1b の は 発 now quantity and sizable に raised し, 10 days in ほ ぼ certain に な る こ と が Ming ら か に な っ た. こ れ ら の results は, GD3 の 発 が now directly raised colonization and inhibit に び つ く と い う よ り は, several つ か の intelligence 伝 da system を 経 て raised colonization to inhibit に る こ と を in stopping し て い る. In the future, the Differential display method な ど を with い て さ ら に detailed に GD3 synthetase の 発 を now after induction, the good breeding to inhibit に る ま で な に が up こ る の か を parsing し て ゆ く necessary が あ る. 2. He の sugar lock heritage 伝 son に raised colonization inhibit を promote す も の が あ る か no か の 検 please: I 々 が ク ロ ー ニ ン グ し た 16 の sugar heritage planning shift enzyme 伝 child の に GD3 synthetase heritage 伝 son と with others の role を hold つ も の が あ る か no か を beg し 検 た が, this year's new し は い wearing を つ け る こ と は で き な か っ た. Beg し ま だ several つ か 検 な け れ ば な ら な い department が residual っ て い る の で, future も 継 続 し て adjustable べ て ゆ く こ と が necessary で あ る.

项目成果

Hitoshi、S.: "Expression of the β-galactoside α1,2-fucosyltransferase gene suppresses axonal outgrowth of neuro2a neuroblastoma cells." J.Neurochem.66. 1633-1640 (1996)

Hitoshi, S.：“β-半乳糖苷 α1,2-岩藻糖基转移酶基因的表达抑制神经 2a 神经母细胞瘤细胞的轴突生长。J.Neurochem.66（1996）。

Tsuji,S.: "Systematic nomenclature for sialyltransferases." Glycobiology. 6(7). V-VII (1996)

Tsuji,S.：“唾液酸转移酶的系统命名法。”

Tsuji,S: "New evidence for the occurrence of a glycolipid-mediated signal transduction system" J.Lipid Mediators and Cell Signalling. 14. 289-294 (1996)

Tsuji,S：“糖脂介导的信号转导系统出现的新证据”J.Lipid Mediators and Cell Signalling。

Kojima N.: "Biosynthesis and expression of polysialic acid on the neural cell adhesion molecule is predominantly directed by ST8SiaII/STX during in vitro neuronal differentiation." J.Biol.Chem.271. 22058-22062 (1996)

Kojima N.：“在体外神经元分化过程中，神经细胞粘附分子上聚唾液酸的生物合成和表达主要由 ST8SiaII/STX 指导。”

Tsuji,S.: "Molecular cloning and functional analysis of sialyltransferases" J.Biochem.120. 1-13 (1996)

Tsuji,S.：“唾液酸转移酶的分子克隆和功能分析”J.Biochem.120。