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複合糖質の持つ神経栄養因子様活性と脳老化

复杂碳水化合物的神经营养因子样活性与大脑衰老

基本信息

批准号：
04268216
负责人：
辻崇一
金额：
$ 0.96万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は複合糖質特にガングリオシドの持つ神経栄養因子様活性を生化学的・生理学的に解析することを試みた。1.ガングリオシドの持つ神経栄養因子様活性の一つのモデルとして、ヒト由来の神経芽腫瘍細胞GOTOに対するガングリオシドGQ1bの持つ神経突起伸展作用を解析した。その結果、この神経突起伸展作用は、細胞膜を通過しないタンパクリン酸化阻害剤K252bで特異的に阻害されることを明らかにした。また、同阻害剤は、以前報告したガングリオシドGQ1bによる細胞表層リン酸化の活性化作用をも特異的に阻害した。従って、この二つの現象は相互に何等かの関連があるものと考えられる。今後は、GOTO細胞の細胞表層局在型リン酸化系に関与している基質、酵素タンパク質の単離精製を試みることが必要であると考えられる。2.さらに、ガングリオシド依存性の膜タンパクリン酸化を分子レベルで解析することを目的として、ラットで見られる72KDaのリン酸化に的を絞り、当該タンパク質の可溶化ならびに単離精製法を確立し、遺伝子のクローニングにより一次構造を明らかにすることを目標とした。その結果、電気泳動上単一バンドになるまで精製する法方を確立した。次いで、当該タンパク質の二つのリジルエンドペプチダーゼ断片の部分アミノ酸配列を明らかにし、この情報を基に、ラット脳のcDNAライブラリーから翻訳領域全長を含むと考えられるクローンを得た。今後は次のステップとして、大量発現系を確立すること、あるいはリン酸化部位近傍のペプチド断片を合成すること、などにより当該"基質"を調製し、これを用いて(リン酸化)酵素側の単離精製を開始する。

The purpose of this study is to analyze the physiology of physiology of biochemistry. 1. The reason for this is that the sprout buds GOTO the spores, the spores GQ1b holds the divine protuberance and stretches the function of the analysis. The results showed that the cell membrane was stretched and the membrane was acidified to block the damage of K252b. In the previous report, the blocking effect of acidizing, acidizing, activation, and special blocking effect was not found in the previous report. How do you like each other? you don't know what to do. In the future, the GOTO cell table will show that the acidizing system is different from the basic enzyme, and the enzyme is isolated from the essence. two。 The dependence of the membrane on the acidification of the molecules was analyzed. The purpose of the acidification was analyzed. The 72KDa was acidified. When the solution was dissolved, the precision was isolated. The result of the test, the electrophoretic activity, the accuracy of the method, the accuracy of the test results and the results of the electrophoretic exercise. In the second half of the year, when the system is used to improve the quality of the fragments, the information system, the information system, and the overall length of the field are shown in detail, including the overall length of the field. In the future, a large number of experiments have been made to make sure that the acidified part of the system is close to the temperature, and the temperature is very high. In the future, it is necessary to make sure that the acidified parts are close to the temperature.