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増殖抑制誘導能を持つ糖転移酵素遺伝子の解析

具有诱导生长抑制能力的糖基转移酶基因分析

基本信息

批准号：
10152263
负责人：
辻崇一
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152263/
关键词：
ガングリオシド神経分化シアル酸転移酵素

项目摘要

本年度は昨年度に引き続き、得られた10種の異なるcDNA断片(GDAP-1〜-10)のORFのクローニングとその解析を行っている。その結果、1)GDAP一群の発現解析:これらはマウスの発生過程で見る限りいずれもE16-P7の時期に神経系に特異的に発現していた。また、P19細胞を神経系に分化させたときもGD,AP一群の発現が同様に見られることが明らかになった。2)GDAP-1のORFのクローニングと解析:マウス、ヒトのcDNAライブラリーからORFを含むクローンを幾つか得た。いずれも358アミノ酸からなり94%の相同性をもち、マウスとヒトとの間で高度に保存されたアミノ酸配列を持つタンパク質であることが明らかになった。現在のところデータベースに登録されておらず、新規タンパク質である。C-、N-末端側それぞれにMyc,FLAGを融合させNeuro2aに発現させると、N-末端側が細胞質、c-末端側がERに存在していた。アミノ酸配列を見ると、C-末端側近傍に一回膜貫通領域と推定される配列が見られる。また、細胞質領域に核移行シグナルに似た配列があることがあきらかになった。さらに、Two-hybrid systemを用いて、細胞質領域のGDAP-1と相互作用をするタンパク質を検索し、幾つかの候補を得たのでその同定・解析をも開始した今後、これらGDAP-群の解析やTwo-hybrid systemなどにより、この細胞増殖抑制機構を解明して行く予定である。

This year, compared with last year, 10 different cDNA fragments (GDAP-1 ~-10) were obtained and analyzed. The results are as follows: 1) Analysis of the occurrence of GDAP group: The occurrence of GDAP group is limited to the period of E16-P7. P19 cell line differentiation,AP group development and the same. 2) Analysis of ORF of GDAP-1: The ORF of GDAP-1 contains the ORF of GDAP-1. 94% identity between the two groups is highly conserved and the acid alignment is maintained. Now, the new rules are in place. C-and N-terminal sides are fused with Myc,FLAG, and Neuro2a, and N-terminal sides are cytoplasmic and c-terminal sides are ER. A membrane penetration field near the C-terminal side is presumed to be located in the vicinity of the acid alignment. In the cytoplasmic domain, nuclear migration occurs. In addition, the use of the Two-hybrid system, the cytoplasmic domain of GDAP-1 interaction, the quality of the search, the number of candidates to obtain the same determination, analysis began, in the future, the GDAP-group analysis and the Two-hybrid system, the cell growth inhibition mechanism to understand the predetermined determination.