ユ-イング肉腫発症の原因遺伝子の同定とクロ-ニング

尤文氏肉瘤发生基因的鉴定和克隆

• 批准号: 03265216
• 负责人: 清水 信義
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03265216/
• 关键词: ユ-イング肉腫; 末梢性神経上皮種; 染色体転座; 染色体ソ-ティング; リンキングクロ-ン; コスミドライブラリ-; 巨大DNA断片; 物理的地図

ユ-イング肉腫(Ewing's Sarcoma;ES)および末梢神経上皮腫(Peripheral Neuroepitheliom;PNE)では、すべての症例で染色体相互転座t(11;22)(q24;q12)が見られるので、第11まだは第22染色体の切断部位に未知のがん遺伝子が存在し転座によって活性化することが原因と考えられる。本研究ではこの未知がん遺伝子のクロ-ニングを行ない、切断点近傍の詳細な物理的地図を作成することを目的とした。すでに我々はセルソ-タ-を用いて高分解能のフロ-カリオタイプを作成し、任意の染色体を高純度でソ-ティングする技術を確立している。今回、SCCHー196、RDーES、NCRーEW2細胞株のフロ-カリオタイピングを行った。その結果、SCCHー196細胞は約36時間の倍化時間を示して比較的増殖がよく、20画分の良好なフロ-カリオタイプが得られた。ソ-ティングした各々の画分の染色体に第11・第22染色体のDNAマ-カ-をハイブリダイズした結果、転座染色体11q+(11ptetーq24::22q12ーqter)および22qー(22pterーq12::11q24ーqter)は、正常の第11・第22染色体と異なる画分にソ-ティングされることが明らかになった。さらに、D22S1マ-カ-は22qー染色体にハイブリダイズし11q+にはハイブリダイズしなかった。一方D22S15マ-カ-では逆の結果を示した。従って、ESおよびPNEの転座の切断点は両マ-カ-の間1.2cM内に位置すると限定された。また、第22染色体のNotIリンキングクロ-ンを多数分離した。さらに、コスミドライブラリ-も作成中である。今後これらのクロ-ンを用いて、マ-カ-S1とS15の間およびその前後のNotI制限酵素地図を作成し、隣接するNotI断片上のコスミドを分離して切断点に迫る予定である。

Ewing's Sarcoma (ES) and Peripheral Neuroepitheliom (PNE) are the most common cases of this disease. Chromosome interaction at chromosome t(11;22)(q24;q12) is observed at chromosome 11 and chromosome 22, and unknown genes exist at chromosome 11 and chromosome 22. This study aims at establishing detailed physical data near the cutoff point. We have established the technology to make high-resolution radio-telephony and high-purity arbitrary chromosomes. Today, SCCH-196, RD-ES, NCR-EW2 cell lines are running smoothly. As a result, SCCH-196 cells showed a good growth rate of about 36 minutes and a good growth rate of 20 minutes. Chromosome 11q+(11ptet q24::22q12 qter) and chromosome 22q (22pter q12::11q24 qter) are normal chromosomes.さらに、D22S1マ-カ-は22qー染色体にハイブリダイズし11q+にはハイブリダイズしなかった。One side D22S15-- The cutoff point of the base of the ES and PNE is limited to the position within 1.2 cM. Also, most of the NotI link links on chromosome 22 were separated. In the middle of the night, the girls were dressed in black. In the future, the NotI restriction enzyme before and after the NotI fragment is separated from the NotI fragment and the cutoff point is determined.

项目成果

Fukuyama,R.: "Regional Localization of the Hepatocyte Growth Factor(HGF)Gene to Human Chromosome 7 Band q21.1." Genomics. 11. 410-415 (1991)

Fukuyama, R.：“肝细胞生长因子 (HGF) 基因对人类 7 号染色体带 q21.1 的区域定位。”

Minoshima,S.: "FlowーSorting of Human Chromosome 22 Derivatives for Physical Mapping and Fine Structure Analysis." In Flow Cytometry and Image Analysis for Clinical Applications(eds)Nishiya,I.,Cram,L.S.and Gray,J.W.Elsevier Science Publ.B.V.,Amsterdam. 59-

Minoshima, S.：“用于物理绘图和精细结构分析的人类染色体 22 衍生物的流式分类”，载于临床应用的流式细胞术和图像分析（编辑）Nishiya, I.、Cram, L.S. 和 Gray，J.W. .B.V.，阿姆斯特丹 59-

Kawasaki,K.: "Shotgun Polymerase Chain Reaction: Construction of Clone Libraries Specific to a NotI Fragment of FlowーSorted Human Chromosome 22." Genomics. 13. (1992)

Kawasaki, K.：“鸟枪聚合酶链式反应：流式分选人类 22 号染色体基因组 NotI 片段的克隆文库的构建。”（1992 年）

Kawasaki,K.: "Methylation Status of Ribosomal RNA Gene Clusters in the FlowーSorted Human Acrocentric Chromosomes." Mammalian Genome. 2. (1992)

Kawasaki, K.：“流式分选的人类近端着丝粒染色体中核糖体 RNA 基因簇的甲基化状态。”(1992)。