腫瘍プロモ-タ-TPAによって発現誘導される新しい増殖関連遺伝子とシグナル伝達

肿瘤启动子TPA诱导的新增殖相关基因和信号转导

• 批准号: 02152106
• 负责人: 清水 信義
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02152106/
• 关键词: プロテインキナ-ゼC; 細胞内基質; 80KーH蛋白質; 80KーL蛋白質; Ca^<2+>・リン脂質依存性; Ser特異的リン酸化; MARCKS蛋白質; シグナル伝達

分子量8万の酸性蛋白(80K蛋白)は、プロテインキナ-ゼCの顕著な細胞内基質として知られている。我々はこの蛋白質をヒト扁平上皮癌細胞Ca9ー22株から精製することを試み、熱処理、硫安分画、MonoQカラム、proPRCカラム、ゲル瀘過などを用いて単一標品にまで精製することに成功した。その過程で、80K蛋白には分子量を若干異にする2種類の分子種があることを見出し、80kーLおよび80kーH蛋白と命名した(Hirai and Shimizu,1990)。また、精製したプロテインキナ-ゼCの3つのサブタイプ(I、II、III)で<in vitro>___ーのリン酸化反応を行ったところ、この2種類の基質はいずれもCa^<2+>およびリン脂質依存的にSer残基にリン酸化を受けた。80kーL蛋白はタイプIIIキナ-ゼCの優先的基質であり、80kーH蛋白はタイプI、IIキナ-ゼCによってより効果的にリン酸化されることが明らかになった。さらに、80kーH蛋白のcDNAをクロ-ニングしその塩基配列を解析した結果、特徴的な蛋白構造が推定された(Sakai et al.,1989)。一方、80kーL蛋白はそのcDNAの塩基配列からウシ脳由来のMARCKS蛋白と同等の蛋白質であることも最近明らかにした(Sakai et al.,in preparation)。今後は、これら2種類の80K蛋白のシグナル伝達における役割を追究していく。

The acidic protein (80K protein) with molecular weight of 80,000 is the most important protein in the intracellular matrix. We successfully purified the protein from squamous epithelial carcinoma cell line Ca9 - 22 by heat treatment, sulfur extraction, MonoQ purification, proPRC purification, and filtration. The molecular weight of 80K protein varies from two species to three species (Hirai and Shimizu,1990). In <in vitro>addition, these two kinds of substrates contain Ca^&lt;2+&gt; and lipid-dependent Ser residues. 80k-L protein III-C The cDNA sequence of 80k H protein was analyzed and the characteristic protein structure was estimated (Sakai et al., 1989)。The 80k L protein is the most recent protein in the cDNA sequence (Sakai et al., in preparation)。In the future, the two types of 80K protein will be investigated.

项目成果

Masamichi Hirai: "Purification of two distinct proteins of approximate Mr 80000 from human epithelial cells and identification as proper substrates for protein kinase C." Biochemical Journal. 270. 583-589 (1990)

Masamichi Hirai：“从人类上皮细胞中纯化出两种大约 Mr 80000 的不同蛋白质，并鉴定为蛋白激酶 C 的正确底物。”

Masamichi Hirai: "Protein kinase C and limited substrates for tyrosine kinase are involved in epidermal growth factor(EGF)ーdependent growth of a human squamous carcinoma cell variant." Cell Structure and Function. 15. 191-200 (1990)

Masamichi Hirai：“蛋白激酶 C 和酪氨酸激酶的有限底物参与人鳞状癌细胞变体的表皮生长因子 (EGF) 依赖性生长。” 15. 191-200 (1990)。