遺伝暗号解読のメカニズム

遗传密码破译机制

• 批准号: 03222102
• 负责人: 横山 茂之
• 金额: $ 24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03222102/
• 关键词: 遺伝暗号; コドン; tRNA; アンチコドン; 転写後修飾; アミノアシルtRNA合成酵素; tRNAアイデンティティ-; フレ-ムシフト

コドン認識におけるアンチコドン1字目の転写後修飾の役割.セミミクロHPLC/FRITーFAB・MASによる修飾ヌクレオシド分析の系を構築し,細菌における修飾の普遍性を確認した(石倉).NMR解析から,Cの4ーアセチル化および2'ー0ーメチル化によってコンホメ-ションが固くなり,「固い」コドン認識を行なうことを見いだした(河合,宮澤,横山).マイコプラズマ,マイクロカッカスなど高ATあるいは高GCゲノムの生物で,「ストップコドン」でない「ナンセンスコドン」の存在を証明し,AT圧,GC圧の実体の実験的な探索を試みた(安達).異常な翻訳.酵母のマイナ-なアルギニンtRNAが,熱ショック蛋白質の合成制御に関与することを見いだした(中村).挿入因子IS1のトランスポゼ-ス発現におけるフレ-ムシフト機構を調べた(大坪).哺乳類のセレノシステイニルtRNA合成には,ATPと2種の蛋白質(500K,20K)が必要であることを見いだした(水谷).特殊な蛍光特性をもつ非天然型アミノ酸を組み込んだヒト上皮成長因子の合成に成功した(宮澤,横山).tRNAアイデンティティ-.大腸菌のアイデンティティ-決定因子の全体像がほぼ明らかになった(長谷川,横山).セリン,ロイシン,アラニン以外のtRNAでアンチコドンが決定因子となっている.識別塩基は,多くの場合に重要である.イソロイシン,グルタミン酸およびリジンでは,修飾ヌクレオシドが必須である.イソロイシンtRNAの決定因子と酵素の結合にともない2次構造およびL字型3次構造が変形することがNMR解析,フットプリント解析などにより明らかになった(横山).セリン,ロイシン,チロシンでは長い可変ル-プが重要である(長谷川).酵母チロシンtRNAで,アミノアシルステムとアンチコドンア-ムの両方が必要であった(西川).停止コドンのサプレッションを指標にtRNAやアミノアシルtRNA合成酵素の変異株を検索した(井口).

コドン知におけるアンチコドン1字の転WRITTEN MODIFIED のservice cut.セミミクロHPLC/FRITーFAB・MASによる modified ヌクレオシド analysis of the system を construction し, bacterial における modification の universality を confirmation し た (Ishikura). NMR analysis か ら, C 4ーアセチル化および2'ー0ーメチル化によってコンホメ-ションがsolid くなり,「solid い」コドンknow を行なうことを见いだした(Kawai, Miyazawa, Yokoyama).マイコプラズマ,マイクロカッカスなど高ATあるいは高GCゲノムのbioticsで,「ストップコドン」でない「ナンセンスコドン」のExistence proofし,AT姧,GC姧の実体の実験的なExplorationをtrialみた(Adachi).Abnormal なturn訳.Yeast のマイナ-なアルギニンtRNAが, 热ショックprotein synthesis control に关与することを见いだした(中村).Insertion factor IS1のトランスポゼ-ス発向におけるフレ-ムシフト体を动べた(大平).BreastfeedingのセレノシステイニルtRNA synthesis には, ATP と 2 kinds of proteins (500K, 20K) がであることを见いだした(Mizutani). Special な蛍光性をもつUnnatural type アミノ acid を group み込んだヒトepithelial growth factor のsynthetic successした(Miyazawa, Yokoyama. River, Yokoyama). Determinant factor of tRNA other than セリン, ロイシン, and アラニン, となっている. It's important for many occasions.よびリジンでは,modify ヌクレオシドがmust である.イソロイシンtRNA のdeterminant とenzyme のbinding にともない 2nd structure および 3rd structure が変shaped することがNMR analysis,フットプリントanalytic などにより明らかになった(Yokoyama).セリン,ロイシン,チロシンでは长い可変ル-プがでYeast (Hasegawa). Yeast チロシンtRNA で, アミノアシルステムとアンチコドンア-ムの両square がであった(西川) ). Stop the コドンのサプレッションを indicator にtRNAやアミノアシルtRNA synthetase の変isotrope を検SOした (well mouth).

项目成果

K.Tamura: "Identity Determinunts of E.coli tRNA^<Val>" Biochem.Biophys.Res.Commun.177. 619-623 (1991)

K.Tamura：“大肠杆菌 tRNA^<Val> 的身份决定”Biochem.Biophys.Res.Commun.177。

O.Nureki: "The Methionyl-tRNA Synthetase Gene from an Extreme Thermophile,Themus thermophilus HB8.Molecular Cloning,Primary-Structure Analysis,Expression in Escherichia coli,and Site-Directed Mutaugenesis." J.Biol.Chem.266. 3268-3277 (1991)

O.Nureki：“来自极端嗜热菌，嗜热栖​​热菌 HB8 的甲硫氨酰-tRNA 合成酶基因。分子克隆、一级结构分析、在大肠杆菌中的表达以及定点诱变。”

T.Kigawa: "A Continuous Cell-Free Protein Synthesis System for Coupled Translation-Transcription." J.Biochem.110. 166-168 (1991)

T.Kikawa：“一种用于耦合翻译-转录的连续无细胞蛋白质合成系统。”

H.Himeno: "Conversion of Aminoacylation Specificity from tRNA^<Tyr> to tRNA^<Ser> in vitro." Nucleic Acids Res.18. 6815-6819 (1990)

H.Himeno：“体外将氨酰化特异性从 tRNA^<Tyr> 转换为 tRNA^<Ser>”。

K.Kawakami: "Autogenous Suppression of an Opal Mutation in the Gene Encoding Peptide Chain Release Factor 2." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 8432-8436 (1990)

K.Kawakami：“编码肽链释放因子 2 的基因中蛋白石突变的自体抑制。”