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ポリホスホイノシタイトによる細胞増殖時のアクチンフィラメント再構築シグナルの発生

ポリホスホイノシタイトによる細胞増殖時のアクチンフィラメント再構築シグナルの発生
多磷酸肌醇在细胞增殖过程中产生肌动蛋白丝重塑信号
批准号：
06281220
负责人：
深見 希代子
金额：
$1.47万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1994 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06281220/
关键词：
ポリホスホイノシタイトα-アクチニンホスホリパーゼC

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
アクチン架橋蛋白質であるα-アクチニンがポリホスホイノシタイト(PIP2)結合蛋白質であり,PIP2が結合した平滑筋α-アクチニンはアクチンのゲル化活性を著しく増大することが判明した.そこで生体内ですでにPIP2を結合している骨格筋α-アクチニンにおけるPIP2結合部位を決定した.α-アクチニンをリジルエンドペプチダーゼで限定分解し,抗PIP2抗体によるドットブロット解析を行なったところ,N末端のアクチン結合部位中に存在する168-184番目の17個のアミノ酸がPIP2結合部位であることが判明した.これに対応する合成ペプチドはウシ胸腺から精製したホスホリパーゼCγおよびδの活性を非常に強く阻害した.またこの部位中のアルギニン,リジン2つの塩基性のアミノ酸をフェニルアラニンに置換し,大腸菌で発現した蛋白質はこのホスホリパーゼC活性の阻害活性が減弱したことからPIP2とα-アクチニンの結合には2つの塩基性のアミノ酸が重要であることが示唆された.さらに発現蛋白質とPIP2との直接の相互作用をPIP2/ホスファチジルコリンのリポソームとの共沈法により検討したところ,強い結合活性が観察されたことからα-アクチニンにおける168-184番目のアミノ酸が確かにPIP2結合部位であることがわかった.
英文摘要
アクチン架橋蛋白質であるα-アクチニンがポリホスホイノシタイト(PIP2)結合蛋白質であり,PIP2が結合した平滑筋α-アクチニンはアクチンのゲル化活性を著しく増大することが判明した.そこで生体内ですでにPIP2を結合している骨格筋α-アクチニンにおけるPIP2結合部位を決定した.α-アクチニンをリジルエンドペプチダーゼで限定分解し,抗PIP2抗体によるドットブロット解析を行なったところ,N末端のアクチン結合部位中に存在する168-184番目の17個のアミノ酸がPIP2結合部位であることが判明した.これに対応する合成ペプチドはウシ胸腺から精製したホスホリパーゼCγおよびδの活性を非常に強く阻害した.またこの部位中のアルギニン,リジン2つの塩基性のアミノ酸をフェニルアラニンに置換し,大腸菌で発現した蛋白質はこのホスホリパーゼC活性の阻害活性が減弱したことからPIP2とα-アクチニンの結合には2つの塩基性のアミノ酸が重要であることが示唆された.さらに発現蛋白質とPIP2との直接の相互作用をPIP2/ホスファチジルコリンのリポソームとの共沈法により検討したところ,強い結合活性が観察されたことからα-アクチニンにおける168-184番目のアミノ酸が確かにPIP2結合部位であることがわかった.
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会议论文
脂質代謝が脂肪の機能を制御する
  • 批准号：
    22659062
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.0万
  • 财政年份：
    2010
  • 负责人：
    深見 希代子
  • 依托单位：
    Tokyo University of Pharmacy and Life Science
表皮と毛包形成を制御するイノシトールリン脂質代謝
イノシトールリン脂質代謝を介した組織幹細胞の増殖と分化のスイッチング
幹細胞分化異常がもたらす上皮系腫瘍形成におけるリン脂質代謝の関与
  • 批准号：
    18013049
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $7.81万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    深見 希代子
  • 依托单位：
    Tokyo University of Pharmacy and Life Science
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