课题基金 / 基金详情

外的ストレスによって誘導される組換え蛋白質群の二本鎖DNA切断修復機能の解析

外的ストレスによって誘導される組換え蛋白質群の二本鎖DNA切断修復機能の解析
外界应激诱导重组蛋白双链DNA断裂修复功能分析
批准号:
07253204
负责人:
池田 日出男
金额:
$1.28万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份:
1995
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1995 至 --

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
我々は、大腸菌ファージλによる非相同的組換え測定系を利用してDNAの再編成を観察し、DNAの二本鎖切断の起こる機構の解析を行った。まず、紫外線により誘導される組換え体ファージの解析を行い、約半分のファージの組換えが組換え高発部位(ホットスポット)で起きていることを見いだした。そして、その近傍に反復配列が存在することから、DNA損傷が反復配列間のスリッページを引き起こし、二本鎖切断に至ると考え、「反復配列に依存する二本鎖切断モデル」を提唱した。さらに、もう一つの二本鎖切断機構としてDNAトポイソメラーゼに依存するものがあると考え、外的ストレスなしにDNAの切断を引き起こすDNAジャイレースやDNAトポイソメラーゼの変異株を単離することに成功した。これらの酵素によるDNAの切断は、DNAの損傷や反復配列のないところで起き、組換え部位も異なるので、別の切断機構によって起こると考えられる。大腸菌のSOS機能の一つとして知られているRecQ蛋白質(3'→5'DNAヘリカーゼ)の機能を解析するために、recQ変異株における非相同的組換えの頻度を測定した。その結果、紫外線照射の有無にかかわらず、組換えが3倍から30倍に増大した。RecQ蛋白質は、紫外線や自然に生成したDNA損傷によって誘導される組換えの起こりやすいDNA構造を元に戻すことによって、非相同的組換えを抑制すると考えられる。最近、ブルーム症候群の原因遺伝子がrecQホモログであることが分かり、ブルーム症候群の患者において染色体異常が起こりやすいという症例と今回の我々の成果とは整合性があることが分かった。従って、今回のrecQ遺伝子の解析の成果は、真核生物のRecQの機能の解析にも役に立つと考えられる。
英文摘要
我々は、大腸菌ファージλによる非相同的組換え測定系を利用してDNAの再編成を観察し、DNAの二本鎖切断の起こる機構の解析を行った。まず、紫外線により誘導される組換え体ファージの解析を行い、約半分のファージの組換えが組換え高発部位(ホットスポット)で起きていることを見いだした。そして、その近傍に反復配列が存在することから、DNA損傷が反復配列間のスリッページを引き起こし、二本鎖切断に至ると考え、「反復配列に依存する二本鎖切断モデル」を提唱した。さらに、もう一つの二本鎖切断機構としてDNAトポイソメラーゼに依存するものがあると考え、外的ストレスなしにDNAの切断を引き起こすDNAジャイレースやDNAトポイソメラーゼの変異株を単離することに成功した。これらの酵素によるDNAの切断は、DNAの損傷や反復配列のないところで起き、組換え部位も異なるので、別の切断機構によって起こると考えられる。大腸菌のSOS機能の一つとして知られているRecQ蛋白質(3'→5'DNAヘリカーゼ)の機能を解析するために、recQ変異株における非相同的組換えの頻度を測定した。その結果、紫外線照射の有無にかかわらず、組換えが3倍から30倍に増大した。RecQ蛋白質は、紫外線や自然に生成したDNA損傷によって誘導される組換えの起こりやすいDNA構造を元に戻すことによって、非相同的組換えを抑制すると考えられる。最近、ブルーム症候群の原因遺伝子がrecQホモログであることが分かり、ブルーム症候群の患者において染色体異常が起こりやすいという症例と今回の我々の成果とは整合性があることが分かった。従って、今回のrecQ遺伝子の解析の成果は、真核生物のRecQの機能の解析にも役に立つと考えられる。
期刊论文(18)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Kumagai,Y.: "Quinolone-resistant mutants of Escherichia coli DNA topoisomerase IV parC gene." Antimicrob.Agents Chemother.(in press).
Kumagai,Y.:“大肠杆菌 DNA 拓扑异构酶 IV parC 基因的喹诺酮抗性突变体。”
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
Ikeda,H.: "Anovel assay for illegitimate recombination in Escherichia coli:Formation of λbio transducing phage is enhanced by ultraviolet light independently of RecA function." Adv.Biophys.31. 197-208 (1995)
Ikeda, H.:“大肠杆菌中非法重组的新颖测定:紫外线增强 λbio 转导噬菌体的形成,与 RecA 功能无关。”197-208。
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
Shimizu,H.: "Molecular analysis of λbio transducing phage produced by oxolinic acid-incuced illegitimate recombination in vivo." Genetics. 140. 889-896 (1995)
Shimizu, H.:“奥林酸诱导的体内非法重组产生的 λbio 转导噬菌体的分子分析。” 140. 889-896 (1995)
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
Shobuike,T.: "Characterization of cDNA encoding mouse homolog of fission yeast dhpl^+ gene:Structural and functional conservation." Nucleic Acids Res.25. 357-361 (1995)
Shobuike,T.:“编码裂殖酵母 dhpl^ 基因的小鼠同源物 cDNA 的表征:结构和功能保守。”
DOI: --
发表时间:
期刊:
影响因子: --
作者: []
通讯作者:
9
    DNA二本鎖切断の際に染色体末端で形成されるエンドジョイニング複合体の構造と機能
    • 批准号:
      10159204
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额:
      $1.34万
    • 财政年份:
      1998
    • 负责人:
      池田 日出男
    • 依托单位:
    DNA二本鎖切断修復と非相同的組換えの分子機構
    • 批准号:
      10165204
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额:
      $1.34万
    • 财政年份:
      1998
    • 负责人:
      池田 日出男
    • 依托单位:
    発がんの原因となる染色体異常に関する研究
    • 批准号:
      10151207
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额:
      $2.37万
    • 财政年份:
      1998
    • 负责人:
      池田 日出男
    • 依托单位:
    減数分裂関連遺伝子出芽酵母SEP1のマウスホモログDhm2の機能と発現制御
    • 批准号:
      10160204
    • 项目类别:
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额:
      $1.28万
    • 财政年份:
      1998
    • 负责人:
      池田 日出男
    • 依托单位:
    海外基金