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外的ストレスによって誘導される組換え蛋白質群の二本鎖DNA切断修復機能の解析

外界应激诱导重组蛋白双链DNA断裂修复功能分析

基本信息

批准号：
07253204
负责人：
池田日出男
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、大腸菌ファージλによる非相同的組換え測定系を利用してDNAの再編成を観察し、DNAの二本鎖切断の起こる機構の解析を行った。まず、紫外線により誘導される組換え体ファージの解析を行い、約半分のファージの組換えが組換え高発部位(ホットスポット)で起きていることを見いだした。そして、その近傍に反復配列が存在することから、DNA損傷が反復配列間のスリッページを引き起こし、二本鎖切断に至ると考え、「反復配列に依存する二本鎖切断モデル」を提唱した。さらに、もう一つの二本鎖切断機構としてDNAトポイソメラーゼに依存するものがあると考え、外的ストレスなしにDNAの切断を引き起こすDNAジャイレースやDNAトポイソメラーゼの変異株を単離することに成功した。これらの酵素によるDNAの切断は、DNAの損傷や反復配列のないところで起き、組換え部位も異なるので、別の切断機構によって起こると考えられる。大腸菌のSOS機能の一つとして知られているRecQ蛋白質(3'→5'DNAヘリカーゼ)の機能を解析するために、recQ変異株における非相同的組換えの頻度を測定した。その結果、紫外線照射の有無にかかわらず、組換えが3倍から30倍に増大した。RecQ蛋白質は、紫外線や自然に生成したDNA損傷によって誘導される組換えの起こりやすいDNA構造を元に戻すことによって、非相同的組換えを抑制すると考えられる。最近、ブルーム症候群の原因遺伝子がrecQホモログであることが分かり、ブルーム症候群の患者において染色体異常が起こりやすいという症例と今回の我々の成果とは整合性があることが分かった。従って、今回のrecQ遺伝子の解析の成果は、真核生物のRecQの機能の解析にも役に立つと考えられる。

In our laboratory and university, the different components are determined by the use of DNA and the analysis of the operating system of the ordinary university of DNA. In the system, the ultraviolet ray and the ultraviolet ray are used to determine the accuracy of the system system. The system is divided into two parts. The system is located in the upper part of the system. There are two kinds of equipment in the anti-collocation system, such as the number of students, and the number of students. The DNA and primary university cut-off machines do not need to know if they are dependent on each other. In addition, the DNA cut-off mechanism has been successfully introduced, which has led to the failure of the DNA system and DNA equipment. In this paper, the enzyme is used to cut off the DNA, and the DNA is used to make sure that the system starts, the parts of the system are affected, and the equipment of the cutting machine is used to determine the temperature. The big fungus SOS machine can detect the RecQ protein (3', 5 'DNA fragments), and the recQ strain will not be the same as the other two. The results showed that ultraviolet ray irradiation had significant effect on tissue damage, and tissue damage was 3 times higher than 30 times higher than that of normal controls. RecQ protein expression, UV-ray radiation generation, DNA protein generation, UV detection, DNA generation, DNA generation, and tissue inhibition test. Recently, the cause of the disease is known as the recQ syndrome, the cause of the disease, the cause of the disease, the cause of the syndrome, the cause of the syndrome. This time, the results of recQ analysis, and the analysis of eukaryotes' RecQ mechanisms.