標的遺伝子組み換え法を用いたサイトカインの生理機能の解析

利用靶向基因重组方法分析细胞因子生理功能

• 批准号: 07260204
• 负责人: 岩倉 洋一郎
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07260204/
• 关键词: 標的遺伝子組換え; 遺伝子欠損マウス; サイトカイン; インターロイキン-1; インターフェロン; エンドトキシンショック; ConA肝炎

1.インターロイキン-1(IL-1)遺伝子欠損マウスの作製とその解析昨年度にIL-1β遺伝子欠損マウスを作製しており、今年度はIL-1α及びIL-1α/βダブル欠損マウスの作製に成功した。特にαとβ遺伝子は非常に近接して存在しているために、IL-1β遺伝子を欠損したES細胞を用いて更にIL-1α遺伝子を欠損させた後、ダブル欠損マウスを作製した。これで3種類のIL-1遺伝子欠損マウスが揃ったが、現在までのところ健康状態や生殖能力には異常は認められない。それぞれ単独にαまたはβを欠損したマウスにLPSを投与してエンドトキシンショックに対する抵抗性を調べたが、どちらのマウスも野生型と差が見られず、LPSに対する感受性はαとβがお互いに相補している可能性が示唆された。一方、テレビン油を投与して発熱を誘導する実験では、IL-1α欠損マウスとは正常マウス同様に発熱するのに対して、IL-1β欠損マウスは発熱しないことがわかり、初めてαとβに機能の違いがあることを明らかにした。現在IL-1受容体のアンタゴニスト遺伝子の欠損マウスの作製も進めており、ダブル欠損マウスも用いて、様々な炎症・免疫反応におけるIL-1の機能を明らかにしていく予定である。2.インターフェロン-γ(IFN-γ)のConA肝炎における役割マウスにConAを投与すると肝炎を誘発できることが知られており、ヒトのウイルス性肝炎のモデルとして使われている。IFN-γがこの肝炎の病態に及ぼす影響について、すでに作製したIFN-γ遺伝子欠損マウスを用いて検討した。IFN-γ欠損マウスにConAを投与したところ、肝炎の発症が抑制され、肝臓細胞のアポトーシスが抑制されていた。ConA投与後のIFN-γ欠損マウスの肝臓においてFasの発現誘導が抑えられていた。Fas遺伝子に突然変異を持つlprマウスにConAを投与したところ、同様に肝炎の発症が抑えられたことから、ConA誘導肝炎において、IFN-γがFasシステムの活性化を促進し、肝臓細胞のアポトーシスを誘導することが明らかとなった。

1. イ ン タ ー ロ イ キ ン - 1 (IL 1) heritage 伝 son owe loss マ ウ ス の cropping と そ の parsing yesterday annual に IL - 1 beta heritage 伝 son owe loss マ ウ ス を cropping し て お り, our は IL - 1 alpha and び IL - 1 alpha/beta ダ ブ ル owe loss マ ウ ス の cropping に successful し た. Son, に alpha と beta heritage 伝 は very nearly meet し に て exist し て い る た め に, IL - 1 beta but 伝 を owe loss し た ES cells を using い て more に IL - 1 alpha heritage 伝 を son owe loss さ せ た, ダ ブ ル owe loss マ ウ ス を cropping し た. こ れ で 3 kinds の IL - 1 heritage 伝 son owe loss マ ウ ス が Jian っ た が, now ま で の と こ ろ health や reproductive に は abnormal は recognize め ら れ な い. そ れ ぞ れ 単 alone に alpha ま た は beta を owe loss し た マ ウ ス に LPS を cast with し て エ ン ド ト キ シ ン シ ョ ッ ク に す seaborne る resistance を adjustable べ た が, ど ち ら の マ ウ ス も wild-type と poor が see ら れ ず, LPS に す seaborne る susceptibility は alpha と beta が お mutual い に phase fill し て い が る possibility in stopping さ れ た. Party, テ レ ビ ン oil を cast and し て 発 thermal induced す を る be 験 で は, IL - 1 alpha owe damage マ ウ ス と は normal マ ウ ス with others に 発 hot す る の に し seaborne て, IL - 1 beta owes damage マ ウ ス は 発 hot し な い こ と が わ か り, early め て alpha と beta に function の violations い が あ る こ と を Ming ら か に し た. Now let IL - 1 body の ア ン タ ゴ ニ ス ト heritage 伝 の son owe loss マ ウ ス も into the の cropping め て お り, ダ ブ ル owe loss マ ウ ス も with い て, others 々 な inflammation, immune against 応 に お け る function of IL - 1 の を Ming ら か に し て い く designated で あ る. 2. イ ン タ ー フ ェ ロ ン - gamma (IFN - gamma) の ConA hepatitis に お け る service cut マ ウ ス に ConA を cast with す る と hepatitis を 発 lure で き る こ と が know ら れ て お り, ヒ ト の ウ イ ル ス sex hepatitis の モ デ ル と し て make わ れ て い る. IFN - gamma が こ の hepatitis の pathological に and ぼ す influence に つ い て, す で に cropping し た IFN - traces of gamma 伝 son owe loss マ ウ ス を with い て beg し 検 た. IFN - gamma owe loss マ ウ ス に ConA を cast with し た と こ ろ, hepatitis の 発 disease が inhibit さ れ routine, liver cell の ア ポ ト ー シ ス が inhibit さ れ て い た. After administration of ConA, <s:1> IFN-γ deficiency occurs in <s:1> ウス <s:1> liver にお て て てFas <e:1> inducing が inhibition えられて た た た た た た. Traces of Fas 伝 に son suddenly - different を hold つ LPR マ ウ ス に ConA を cast with し た と こ ろ, with others in に hepatitis の 発 disease が え suppression ら れ た こ と か ら, ConA induced hepatitis に お い て, IFN - gamma が Fas シ ス テ ム の activeness を promote し routine, liver cell の ア ポ ト ー シ ス を induced す る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Yoichiro Iwakura: "Autoimmunity induction by human T-cell leukemia virus type 1 in transgenic mice that develop chronic inflammatory arthropathy resembling rheumatoid arthritis in humans." Journal of Immunology. 155. 1588-1598 (1995)

Yoichiro Iwakura：“人类 T 细胞白血病病毒 1 型在转基因小鼠中诱导自身免疫，这些小鼠会出现类似于人类类风湿性关节炎的慢性炎症性关节病。”

Ichiko Nishijima: "A human GN-CSF receptor expressed in transgenic mice stimulates proliferation and differentiation of hemopoietic progenitors to all lineages in response to human GM-CSF" Molecular Biology of the Cell. 6. 497-508 (1995)

Ichiko Nishijima：“转基因小鼠中表达的人类 GN-CSF 受体会刺激造血祖细胞的增殖和分化，以响应人类 GM-CSF”《细胞分子生物学》。