胚幹細胞への欠失変異導入法の開発

胚胎干细胞缺失突变导入方法的开发

• 批准号: 07260201
• 负责人: 宮崎 純一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07260201/
• 关键词: ノックアウトマウス; ジーンターゲッティング; ES細胞

マウス胚幹(ES)細胞にジーンターゲッティング技術を応用することにより、ある1つの遺伝子を不活化させるだけでなく、複数の遺伝子を含む領域の欠失を引き起こすことも可能になると考えられる。本研究では通常のジーンターゲッチィング法および、cre-loxPシステムを用いて、ジーンターゲッティングの技術を特定の染色体領域の欠失へ応用することを目標としている。通常のジーンターゲッティング法ではすでにいくつかの遺伝子(C3G,PAFR,IL-5R,IL-7Rなど)に関してES細胞でのジーンターゲッティングおよびノックアウトマウス作製に成功しており、各々のノックアクトマウスの解析を進めている。loxPで挟まれた配列をES細胞に取り込ませ、creを一過性に発現させると、その配列が効率よく除かれること、loxPで挟まされた配列をもつトランスジェニックマウスの受精卵にマイクロインジェクションでcreを一過性発現させると、効率よくその配列が除去されることが示された。ES細胞におけるcreの効率的な発現のために、アデノウイルスベクターにcreの発現ユニットを組み込んだものを作製した。loxPで挟まれた領域の欠失が効率的に除去されることが示された。さらにneo遺伝子以外の選択マーカー遺伝子としてbsrが利用できるように系の開発を進めている。

The first step is to activate the cell phone, and the second step is to activate the cell phone. This study aims to improve the efficiency of chromosome mapping in general, and to improve the efficiency of chromosome mapping in particular. In general, the analysis of ES cells in response to C3G,PAFR,IL-5R,IL-7R is successful in the production of ES cells, and in the analysis of ES cells in response to C3G,PAFR,IL-5R,IL-7R. Lox P is incorporated into ES cells, and the rate of incorporation is transiently detected. Lox P is incorporated into ES cells, and the rate of incorporation is transiently detected. ES cells can be used to control the development of cre. Lox P is the missing part of the field. In addition to neo gene selection, neo gene selection, neo

项目成果

Katagiri, H. et al.: "A novel isoform of syntaxin-binding protein homologous to yeast Secl expressed ubiquitously in mammalian cells." J. Biol. Chem.270. 4963-4966 (1995)

Katagiri, H. 等人：“一种新的突触融合蛋白结合蛋白亚型，与在哺乳动物细胞中普遍表达的酵母 Secl 同源。”

Sakai, K. et al.: "Efficient regulation of gene expression by adenovirus-mediated delivery of the Cre recombinase." Biochem. Biophys. Res. Commun.217. 393-401 (1995)

Sakai, K. 等人：“通过腺病毒介导的 Cre 重组酶递送来有效调控基因表达。”

Hagiwara,S.et al.: "An inhibitory role for phosphatidylinositol 3-kinase in insulin secretion from pancreatic b cell line MlN6." Biochem.Biophys.Res.Commun.214. 51-59 (1995)

Hagiwara,S.et al.：“磷脂酰肌醇 3-激酶对胰腺 b 细胞系 MlN6 胰岛素分泌的抑制作用。”

Yagi,N.et al.: "Expression of intracellular adhesion molecule-1 on pancreatic b-cells accelerates b-cell destruction by cytotoxic T-cells in murine autoimmune diabetes." Diabetes. 44. 744-752 (1995)

Yagi,N.等人：“在小鼠自身免疫性糖尿病中，胰腺 b 细胞上细胞内粘附分子 1 的表达加速了细胞毒性 T 细胞对 b 细胞的破坏。”

Araki,K. et al.: "Slite-specific recombination of a transgene in fertilized eggs by transient expression of Cre recombinase." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.92. 160-164 (1995)

荒木经惟，K.