マウス発生工学を用いた核内レセプターRXRの機能解析

使用小鼠发育工程对核受体 RXR 进行功能分析

• 批准号: 07273206
• 负责人: 宮崎 純一
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07273206/
• 关键词: 核内レセプター; トランスジェニックマウス; 胸腺; ドミナントネガティブ

個体発生や細胞分化に重要な役割を果たす考えられるレチノイン酸(RA)や甲状腺ホルモン、ビタミンDは核内レセプターファミリーに属する特異的なレセプターに結合し、レチノイドXレセプター(RXR)とヘテロ二量体を構成し転写制御を行う。RXRβのC末端を欠失させることにより、ヘテロ2量体形成能・DNA結合能は保たれるが転写を強く抑制するRXRが作られる。このdominant negative変異RXRを発現させることにより、これらの核内受容体を不活化することができると考えられる。dominant negativeRXRβをコードするcDNAを肝臓特異的SAPプロモーター、胸腺特異的lckプロモーター、骨髄特異的MRPプロモーターの下流に結合した融合遺伝子を作製した。これをC57BL/6マウスの受精卵にマイクロインジェクション法により導入し、各々、13匹、7匹、17匹のトランスジェニックマウスを得た。これらのトランスジェニックマウスの肝臓、胸腺におけるRXRの発現を検討し、発現の最もよいトランスジェニックマウスを選び、繁殖させた。SAP-RXRトランスジェニックマウスについては、肝臓の切片の観察で肝細胞の増殖像が散見された。lck-RXRトランスジェニックマウスについては胸腺の肥大を示すものがいた。今後、SAP-RXRトランスジェニックマウスについてはクロフィブレートなどのペルオキシゾーム増殖剤をマウスに投与したときの肝臓の変化(ペルオキシゾームの増加など)を病理学的に調べる。クロフィブレートは肝臓の化学発癌剤としても作用するので、投与時の肝発癌の率を正常マウスと比較する。lck-RXRトランスジェニックマウスについては、胸腺におけるT細胞の分化(特に、CD4/8 double positiveからsingle positive T細胞への分化)を検討する。MRP-RXRトランスジェニックマウスについては骨髄細胞の顆粒細胞への分化を検討する。

For example, the combination of renicinoleic acid (RA), thyroid hormone, and vitamin D, which are specific elements of the nuclear renicinoleic acid molecule that play important roles in individual development and cell differentiation, constitutes a two-dimensional molecule of renicinoleic acid (RXR) and testosterone. RXRβ-terminal deletion is responsible for the formation of DNA binding energy and the inhibition of RXR activity. The dominant negative RXR is activated. dominant negativeRXR beta cDNA binds to liver-specific SAP, thymic-specific LCK and bone-specific MRP downstream and produces fusion proteins C57BL/6 was selected for the introduction of the fertilized eggs. 13, 7 and 17 eggs were selected for the introduction. The development of RXR in the liver and thymus is discussed, and the development of RXR in the liver and thymus is selected and propagated. SAP-RXR is a highly sensitive and sensitive tool for detecting liver cell proliferation. Lck-RXR is a very important tool for breast enlargement. In the future, SAP-RXR can be used for pathological studies. A comparison of liver cancer rates between normal and untreated liver cancer patients lck-RXR T cell differentiation (especially CD4/8 double positive or single positive T cell differentiation) in thymus is discussed. MRP-RXR is the first to investigate the differentiation of bone marrow cells and granular cells.

项目成果

Yagi,N.et al.: "Expression of intracellular adhesion molecule-1 on pancreatic b-cells accelerates b-cell destruction by cytotoxic T-cells in murine autoimmune diabetes." Diabetes. 44. 744-752 (1995)

Yagi,N.等人：“在小鼠自身免疫性糖尿病中，胰腺 b 细胞上细胞内粘附分子 1 的表达加速了细胞毒性 T 细胞对 b 细胞的破坏。”

Araki,K.et al.: "Site-specific recombination of a transgene in fertilized eggs by transient expression of Cre recombinase." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.92. 160-164 (1995)

Araki,K.et al.：“通过 Cre 重组酶的瞬时表达，在受精卵中进行转基因的位点特异性重组。”

Ohgawara,H.et al.: "Assessment of pore size of a semipermiable membrane for immunoisolation on xenoimplantation of pancreatic B cells using a diffusion chamber." Transpl.Proc.27. 3319-3320 (1995)

Ohkawara, H. 等人：“使用扩散室评估用于胰腺 B 细胞异种移植免疫隔离的半透膜孔径。”

Sakai, K. et al.: "Efficient regulation of gene expression by adenovirus-mediated delivery of the Cre recombinase." Biochem. Biophys. Res. Commun.217. 393-401 (1995)

Sakai, K. 等人：“通过腺病毒介导的 Cre 重组酶递送来有效调控基因表达。”

Hagiwara, S. et al.: "An inhibitory role for phosphatidylinositol 3-kinase in insulin secretion from pancreatic b cell line MIN6." Biochem. Biophys. Res. Commun.214. 51-59 (1995)

Hagiwara, S. 等人：“磷脂酰肌醇 3-激酶对胰腺 b 细胞系 MIN6 分泌胰岛素的抑制作用。”