生体防御系に関与する遺伝子群及びタンパク質群の分子進化の研究

生物防御系统涉及的基因和蛋白质的分子进化研究

基本信息

  • 批准号:
    07265219
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

米国産カブトガニ(Limulus polyphemus)のα_2マクログロブリンのcDNAクローニングと全アミノ酸配列:α_2マクログロブリン(α_2M)は、血漿中に多量存在する高分子量プロテアーゼインヒビターであり、無脊椎動物から脊椎動物に至るまで数多くの種から単離されている。カブトガニもその血漿及び血球細胞内に多量のα_2Mを含み、様々なプロテアーゼに対し阻害活性を示す。また、最近、Limulus α_2Mが赤血球を溶血させる補体様活性を持つことが報告されている。本年度は、Limulus α_2Mの構造と機能の相関を明らかにする一歩として、全アミノ酸配列の決定を行った。精製α_2Mの部分アミノ酸配列を基にPCR primerを作製し、血球total RNAを鋳型としてRT-PCRによりプローブを調製し、血球cDNAライブラリーのスクリーニングを行った。得られた3種のオーバーラッピングクローンと5′RACE法を用いることにより、Limulus α_2MをコードとするcDNAの全塩基配列を決定した。Limulus α_2Mは25残基のシグナル配列と1482残基のインヒビ-領域から成り、他の哺乳類のα_2Mとの相同性は、それぞれ、ヒト28%、ラット28%、マウス29%であった。α_2Mファミリーの特徴であるthiol-esterドメイン近傍は高い相同性(ヒトα_2Mと54.4%)を示したが、N末端部分においてはα_2Mファミリーとの相同性は低く、むしろヒトC8のγ鎖と相同性の高い領域が存在した。また、ヒト、ラット、マウスのα_2M間で保存されている2つのinterchainのシステイン残基はLimulus α_2Mでは存在しなかった。
The cDNA sequence of Limulus polyphemus is completely different from that of other species. α_2 M is abundant in plasma, and there are many species in invertebrate and vertebrate. A large amount of α_2M in the plasma and blood cells of the rat was detected. Recently, Limulus α_2M has been reported as a complement activity in erythrocytes. This year, Limulus α_2M structure and function related to the determination of a step, all kinds of acid allocation PCR primer for the purification of α_2M partial nucleotide sequence, total RNA of blood cells, RT-PCR, and cDNA sequencing. The complete sequence of cDNA was determined by using the 5′RACE method. Limulus α_2M residues 25 and 1482 residues were mapped to the same domain. The homology of α_2M in other mammals was 28%, 28% and 29%.α_2M is characterized by thiol-ester identity near the α_2M and 54.4% near the α_2M. The identity of α_2M is low in the N-terminal part, and the identity of α_2M is high in the N-terminal part. The residue Limulus α_2M is preserved in the interchain.

项目成果

期刊论文数量(13)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
津田博子(分担執筆): "血液凝固線溶異常-糖鎖の多様性を中心に-" 医学書院, 8 (1995)
Hiroko Tsuda(合著者):“凝血和纤维蛋白溶解异常 - 关注糖链的多样性 -” Igaku Shoin,8 (1995)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
岩永貞昭(分担執筆): "エンドトキシン-新しい治療・診断・検査" 講談社サイエンティフィク, 7 (1995)
Sadaaki Iwanaga(合著者):“内毒素 - 新治疗、诊断和测试”讲谈社科学,7 (1995)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Tetsu Saito: "A Novel Big Sefensin Found in Horseshoe Crab Hemocytes: Isolation, Amino Acid Sequence and Antibacterial Activity." J. Biochem.117. 1131-1137 (1995)
Tetsu Saito:“在鲎血细胞中发现的一种新型大 Sefensin:分离、氨基酸序列和抗菌活性。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Shinji Nishida: "cDNA Cloning and Deduced Amino Acid Sequence of Prothrombin Activator (Ecarin) from Kenyan Echis carinatus Venom: Structural Difference between Ecarin and RVV-X(Russel's Vipper Venom Factor X Activator)." Biochemistry. 34. 1771-1778 (1995
Shinji Nishida:“来自肯尼亚 Echis carinatus 毒液的凝血酶原激活剂 (Ecarin) 的 cDNA 克隆和推导的氨基酸序列:Ecarin 和 RVV-X(罗素蝰蛇毒液因子 X 激活剂)之间的结构差异。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Tetsu Saito: "A Novel Type of Limulus Lectin-L6: Purification, Covalent Structure and Antivacterial Activity." J. Biol. Chem.270(24). 14493-14499 (1995)
Tetsu Saito:“一种新型鲎凝集素-L6:纯化、共价结构和抗细菌活性。”
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  • 发表时间:
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    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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