生体内情報伝達機構解明を指向したホスファターゼ抵抗性リン酸化ペプチドの合成

合成抗磷酸酶磷酸化肽，旨在阐明体内信号转导机制

• 批准号: 07268209
• 负责人: 大高 章
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07268209/
• 关键词: リン酸化; リン酸化ペプチド; ペプチド合成; 最終脱保護; ホスファターゼ; 細胞内情報伝達; ホスファターゼ抵抗性

蛋白質のチロシン、セリン、スレオニン残基のリン酸化、脱リン酸化が生体内情報伝達系において重要な役割を果していることが明らかになるにつれ、近年生体内情報伝達機構解明のためのリン酸化ペプチド・タンパク質の需要が高まっている。このような観点より『生体内情報伝達機構解明を指向したホスファターゼ抵抗性リン酸化ペプチドの合成』を遂行し以下のような実績をあげることができた。1.すでにホスファターゼ抵抗性ホスホチロシン誘導体として4-phosphono(difiuoromethyl)phenylalanine(F_2Pmp)の合成を完了していたので今年度はまずホスファイターゼ抵抗性ホスホセリン(F_2Pab)、スレオニン誘導体(F_2MPab)の合成に着手し、ホスホセリンミメティックの合成を完了させた。なお、ホスホスレオニンミメティックに関しては現在進行中である。2.ホスホチロシン、ホスホセリンミメティック含有ペプチドの合成について検討を加え、特に保護ペプチド樹脂の最終脱保護に関し、High Acidic[l M TMSOTf-thioanisole/TFA.m-cresol,EDT(ethanedithiol)]-Low Acidic[l M TMSOTf-thioanisole/TFA,m-cresol,EDT+TMSOTf+DMS(dimethyl sulfide)]からなる二段階脱保護法がホスファターゼ抵抗性リン酸化ペプチドの脱保護法に非常に有効であることを見出した。3.これら合成法を応用してT-cell receptorの細胞内ドメインのホスホチロシン部分を合成し、本合成ペプチドが実際の細胞系においてシグナル伝達を遮断することを明らかにした。またホスホセリンミメティック含有ペプチドに関しても現在ホスファターゼ阻害活性になどについて検討を加えている。

Protein protein protein residues are important for in vivo information system development, and in recent years, in vivo information system development, protein protein residues are important for protein development, protein residues are important for protein development, and protein residues are important for protein protein development. The information transmission mechanism in vivo is pointed out to be resistant to acidification and synthesis. 1. The synthesis of 4-phosphono(difluoromethyl)phenylalanine(F_2Pmp) was completed. The synthesis of 4-phosphono(difluoromethyl)phenylalanine(F_2Pab) and 4-phosphono (difluoromethyl) phenylalanine (F_2Pmp) was completed.なお、ホスホスレオニンミメティックに关しては现在进行中である。2. High Acidic [TMSOTf-thioanisole/TFA. m-cresol,EDT] High Acidic[TMSOTf-thioanisole/TFA.m-cresol,EDT (ethanedithiol)]-Low Acidic[l M TMSOTf-thioanisole/TFA,m-cresol,EDT+TMSOTf+DMS(dimethyl sulfide)]-A two-stage deprotection method is very effective in the treatment of resistant acidoids. 3. The synthesis method is used to synthesize the intracellular receptor of T-cell receptor. The synthesis method is used to block the intracellular receptor of T-cell receptor. The test results show that the test results are accurate, and the test results are accurate.

项目成果

Akira Otaka: "Synthesis and Application of N-Boc-L-2-amino-4-(diethylphosphono)-4,4-difluorobutanoic aeid for Solid-Phase Synthesis of Nonhydrolyzable Phosphoserine Peptide Analogue." Tetrahedron Letters. 36. 927-930 (1995)

Akira Otaka：“N-Boc-L-2-氨基-4-(二乙基膦酰基)-4,4-二氟丁酸的合成和应用，用于固相合成不可水解的磷酸丝氨酸肽类似物。”

Akira Otaka: "Practical Synthesis of Phosphopeptides Using Dimethyl-protected Phosphoamino Acid Derivatives" J.Chem.Soc.,Chem.Commun.1995. 387-389 (1995)

Akira Otaka：“使用二甲基保护的磷酸氨基酸衍生物实际合成磷酸肽”J.Chem.Soc.，Chem.Commun.1995。

Akira Otaka: "Development of Efficient Two-step Deprotection Methodology for Dimethyl-protected Phosphoamino Acid-Containing Peptide Resins and Its Application to the Practical Synthesis of Phoshopeptides." J.Org.Chem.60. 3967-3974 (1995)

Akira Otaka：“二甲基保护的含磷酸氨基酸肽树脂的高效两步脱保护方法的开发及其在磷酸肽实际合成中的应用。”

RonaldL.Wange: "Inhibition of TCR Signalling in Jurkat T Cells by a PTP-ase-resistant Phospho-TAM Peptide Analog" J.Biol.Chem.270. 944-948 (1995)

RonaldL.Wange：“PTP 酶抗性 Phospho-TAM 肽类似物对 Jurkat T 细胞中 TCR 信号传导的抑制”J.Biol.Chem.270。

LiChen: "Why Is Phosphonodifluoromethyl Phenylalanine a More Potent Inhibitory Moiety Than Phosphonomethyl Phenylalanine toward Protein-Tyrosine Phosphatases." Biochem.Biophys.Res.Commun.216. 976-984 (1995)

LiChen：“为什么磷酸二氟甲基苯丙氨酸对蛋白酪氨酸磷酸酶的抑制作用比磷酸甲基苯丙氨酸更有效。”