ジアシルグリセロールキナーゼの分子多様性の神経可塑性における意義

二酰甘油激酶分子多样性在神经可塑性中的意义

• 批准号: 07278203
• 负责人: 近藤 尚武
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07278203/
• 关键词: ジアシルグリセロールキナーゼ; 分子多様性; ラット; 脳; ショウジョウバエ; 核内情報伝達; ankyrin-like kepeat

神経可塑性の高い小脳でのイノシトールリン脂質代謝機構を明らかにすべく、ジアシルグリセロール(DG)キナーゼの分子多様性を遺伝子クローニングにより追究した。既に我々が世界に先駆けて同定したDGキナーゼtypeIとtypeIIに加えて、新たにtypeIIIとtypeIVのラットでの一次構造を明らかにした。このtypeIII DGキナーゼは分子量88kDaで、EF-hand構造に合致したCa依存性酵素活性を示した。このcDNAを発現させたCOS細胞の細胞分画では、膜分画と可溶性画分の双方にほぼ等しく検出されたので、活発な二者間のtranslocationがあると考えられた。界面活性剤処理後にもこの分子は不溶性画分に残存することから、細胞骨格との密接な関連が示唆された。全身の主な臓器での発現をnorthern blotで調べると、この分子の発現は脳に特異的であることが判明し、脳内では小脳Purkinje細胞に最も強く、次いで顆粒細胞に発現が認められた。一方、typeIV DGキナーゼは分子量104kDaであるが、他の三分子と異なり、EF-handを持たずにCa依存性は無い。その上、C末側にankyrin-like repeatを持っている。この一次構造は、既報のショウジョウバエの網膜変性ミュータント原因遺伝子の一つのrdgAであるDGキナーゼ分子と相同である。ただし、それとも異なり、typeIVにはunclear targeting motifが含まれており、COS細胞に強制発現をすると、細胞核に局在する。したがって、核内情報伝達に関与する分子であると考えられる。northern blotでは胸線に最も強い発現が認められ、次いで脳、そして眼、そのほかに小腸にも弱いながらその発現が検出される。脳では小脳と嗅球の灰白質に強く、大脳皮質にもかなりの発現が認められる。小脳皮質ではPurkinjie細胞で最も強い。網膜では双極細胞に発現があり、視細胞には有為の発現は認められない。

God 経 high plasticity の い 脳 で の イ ノ シ ト ー ル リ ン lipid metabolism institutions を Ming ら か に す べ く, ジ ア シ ル グ リ セ ロ ー ル (DG) キ ナ ー ゼ の molecular multiple others を heritage 伝 son ク ロ ー ニ ン グ に よ し り investigated た. Both に I 々 が world に 駆 first け て with fixed し た DG キ ナ ー ゼ typeI と typeII に plus え て, new た に typeIII と typeIV の ラ ッ ト で の a tectonic を Ming ら か に し た. <s:1> <s:1> typeIII DGキナ ゼ ゼ キナ molecular weight 88kDaで, EF-hand structure に combined with <s:1> た ca-dependent enzyme activity を indicates た. こ の cDNA を 発 now さ せ た COS cells の points draw で は and the film points painting と soluble の に ほ ぼ etc し く 検 out さ れ た の で, live 発 な between の translocation が あ る と exam え ら れ た. Interface active tonic 処 reason after に も こ の molecular は insoluble draw points に residual す る こ と か ら, cell skeleton と の contact な masato even が in stopping さ れ た. Systemic の main な viscera で の 発 を now northern blot で adjustable べ る と, こ の molecular の 発 now は 脳 に specific で あ る こ と が.at し, 脳 で は small 脳 Purkinje cell に も く, most times い で granulosa cells に 発 が now recognize め ら れ た. One party, typeIV DG キ ナ ー ゼ は molecular weight 104 kda で あ る が, molecular と の three different な り, EF - hand を hold た ず に Ca dependency は い. Youdaoplaceholder1 ankyrin-like repeatを holds って る る る. こ の は, a structure to both の シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ の retinal - sex ミ ュ ー タ ン ト reason but 伝 child の a つ の rdgA で あ る DG キ ナ ー ゼ molecular と same で あ る. た だ し, そ れ と も different な り, typeIV に は unclear targeting motif が containing ま れ て お り, COS cell に forced 発 now を す る と, nucleus に bureau in す る. Youdaoplaceholder0 たがって nuclear intelligence 伝 is related to に and する elements であると test えられる. Northern blot で は chest line the most strong も い に 発 が now recognize め ら れ, い で 脳, そ し て eye, そ の ほ か に small intestine に も weak い な が ら そ の 発 now が 検 out さ れ る. Small 脳 で は 脳 と olfactory bulb の gray matter に く, big 脳 cortex に も か な り の 発 が now recognize め ら れ る. The small 脳 cortex で で Purkinjie cells で are the most <s:1> strong 脳. Omental で bipolar cells に are present with があ, and visual cells に are present with <s:1> recognition められな められな.

项目成果

K.Goto,M.FunayamaとH.Kondo: "Cloning and expression of a cytoskeleton-associated diacylglyceral kinase that is dominantly expressed in cerebellum." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 91. 13042-13046 (1994)

K. Goto、M. Funayama 和 H. Kondo：“主要在小脑中表达的细胞骨架相关二酰基甘油激酶”，Proc. Natl Sci，1994 年。

O.Tanaka,H.SakagamiとH.Kondo: "Localization of mRNAs of voltage-dependent Ca^<2+>-channels: Four subtypes of α1-and β-subunits in developing and mature rat brain." Mol.Brain Res.30. 1-16 (1995)

O.Tanaka、H.Sakagami 和 H.Kondo：“电压依赖性 Ca^2+-通道 mRNA 的定位：发育和成熟大鼠大脑中 α1 和 β 亚基的四种亚型。” .30.1-16（1995）

K.Nagata,H.Sakagami,H.KondoとY.N: "Identification and localization of gene expression of a low Mr GTP-binding protein,ram p25 in pituitary gland" Biochem.Biophys.Res.Com.217. 1223-1230 (1995)

K. Nagata、H. Sakagami、H. Kondo 和 Y.N：“垂体中低 Mr GTP 结合蛋白 ram p25 基因表达的鉴定和定位”Biochem.Biophys.Res.Com.217（ 1995)

H.Sakagami,Y.SawamuraとH.Kondo: "Synchronous patchy pattern of gene expression for adenylyl cyclase and phospho-diesterase but discrete expression for G-protein in developing rat striatum." Mol.Brain Res.33. 185-191 (1995)

H. Sakagami、Y. Sawamura 和 H. Kondo：“发育中的大鼠纹状体中腺苷酸环化酶和磷酸二酯酶基因表达的同步斑块模式，但 G 蛋白的表达离散。”（Mol.Brain Res.33） 1995)

Y.Ito,K.GotoとH.Kondo: "Localization of mRNA for phosphatidylinositol 3-Kinase in brain of developing and mature rats." Mol.Brain Res.34. 149-153 (1995)

Y.Ito、K.Goto 和 H.Kondo：“发育中和成熟大鼠大脑中磷脂酰肌醇 3-激酶 mRNA 的定位”，Mol.Brain Res.34 (1995)。