心筋細胞の発生分化における核内がん遺伝子産物の役割

核癌基因产物在心肌细胞发育和分化中的作用

• 批准号: 08258226
• 负责人: 石井 俊輔
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08258226/
• 关键词: 心筋細胞; 細胞増殖; Myb; Ski; Sno; 転写制御; コアクティベータ-; シグナル伝達

Mybは従来未分化造血系細胞の増殖の制御に関与する転写因子と考えられてきた。しかし最近血液系以外の細胞でも発現していることが見出され、mitogen刺激による血管平滑筋細胞の増殖にはMybが機能していることが示されている。私達はMyb過剰発現トランスジェニックマウスでは心筋細胞のサイズが増大し、心肥大の症状を呈することをすでに報告した。しかし、c-myb遺伝子の完全欠損マウスは造血不全のため胎児13日目の段階で致死となり、心筋細胞の発生分化におけるMybの役割を解析できない。そこで、二段階相同組み換えを用いて、MybのDNA結合ドメインやインヒビター結合ドメイン内に点変異を導入した変異マウスの作製を試みた。これらのマウスではMyb活性が野生型の1/10または10倍になり、発展途上で致死とならず、心筋細胞等の増殖制御におけるMybの役割を検討できることが期待される。これまでにヘテロマウスを得ることができ、現在ホモ変異マウスを作製する目処をつけることができた。またMybの転写活性化に必要なコアクティベータ-を解析した結果、CBPがMybのコアクティベータ-として機能することが示された。CBPはCREB以外にもJum,Fos,MyoD,Stat2,核内受容体などのコアクティベータ-として機能することが最近明らかにされた。一連の解析の結果、CBPを取り合うことによりMyb活性がこれらの転写因子により阻害されることが示された。また私達は最近Mybに結合する制御因子をcDNAクローニングにより同定したが、この因子がCBPにも結合することを見い出した。したがって、この因子はMybとCBPの結合を制御することが推定された。一方別の核内がん遺伝子産物Skiおよびその関連遺伝子産物Snoは筋細胞の分化に関与することが培養細胞を用いた研究結果により示唆されている。snoの生理機能を理解するため、sno遺伝子欠損マウスを作製・解析した。sno欠損ホモマウスは胎児9.5〜10.5日目で致死となり、sno遺伝子が発生に必須であることが示された。そして、ヘテロ欠損マウスは正常に生まれるが、体が小さく、そのうち約1/3は生後1週間以内に死亡した。しかし、sno変異マウスでは心臓、骨格筋などの筋組織での異常はまったく認められなかった。

Myb 従 従 is related to the に control of <s:1> proliferation <e:1> in undifferentiated hematopoietic cells and する転 writing factors と to explore えられて た た た. し か し recent blood is の cells で も 発 now し て い る こ と が shows さ れ, mitogen stimulation に よ る vascular smooth muscle cell の raised colonization に は Myb が function し て い る こ と が shown さ れ て い る. Private da は Myb through turning 発 now ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス で は heart muscle cells の サ イ ズ が raised large し, symptoms of heart hypertrophy の を す る こ と を す で に report し た. し か し, c - traces of myb 伝 の son owe completely loss マ ウ ス は blood insufficiency の た め tire where 13 orders の Duan Jie で death と な り, heart muscle cells の 発 raw differentiation に お け る myb の service cut を parsing で き な い. そ こ で, two Duan Jie み in same group え を with い て, Myb の dna-binding ド メ イ ン や イ ン ヒ ビ タ ー combining ド メ イ ン に some variations in different を import し た - different マ ウ ス の cropping を try み た. こ れ ら の マ ウ ス で は Myb active が wild-type の 1/10 ま た は 10 times に な り, 発 exhibition to becoming で death と な ら ず suppression, such as heart muscle cells の raised colonization に お け る Myb の service cut を beg で 検 き る こ と が expect さ れ る. こ れ ま で に ヘ テ ロ マ ウ ス を have る こ と が で き, now ホ モ - different マ ウ ス を cropping す る mesh 処 を つ け る こ と が で き た. ま た Myb の planning write activeness に necessary な コ ア ク テ ィ ベ ー タ - を parsing し た results, CBP が Myb の コ ア ク テ ィ ベ ー タ - と し て function す る こ と が shown さ れ た. CBP は outside after CREB に も Jum, Fos, MyoD, Stat2, nuclear within the capacity of body な ど の コ ア ク テ ィ ベ ー タ - と し て function す る こ と が Ming recently ら か に さ れ た. For analytical の の results, CBP を take り う こ と に よ り Myb active が こ れ ら の planning write factor に よ り resistance against さ れ る こ と が shown さ れ た. Da は ま た private recently Myb に combining す る suppression factor を cDNA ク ロ ー ニ ン グ に よ り with fixed し た が, こ の factor が CBP に も combining す る こ と を see い out し た. The された たがって and <s:1> <s:1> factors たがって MybとCBP <s:1> combined with を control する とが とが とが presume された. Within the party don't の nuclear が ん heritage 伝 zi chan content Ski お よ び そ の masato even the heritage of the latter's 伝 content Sno は muscle cells の に masato and す る こ と が culture cell を with い た results に よ り in stopping さ れ て い る. The physiological functions of sno を understanding するため, the residual 伝 damage of sno ウスを mechanism · analysis た. Sno owe loss ホ モ マ ウ ス は tire where 9.5 ~ 10.5, mesh で death と な り, sno but 伝 が 発 raw に must で あ る こ と が shown さ れ た. そ し て, ヘ テ ロ owe loss マ ウ ス は born normal に ま れ る が, body small が さ く, そ の う ち 1/3 は born within 1 week between に death し た. <s:1> <s:1>, changes in sno ウスで, ウスで, な of the heart and tendons, な of the sinew, で of the sinew tissue で, <s:1>, まったく, recognition められな, った, った.

项目成果

Kanei-Ishii,C.et al.: "Structure and function of the proteins encoded by the myb gene family" Curr.Top.Micro.Imm.211. 89-98 (1996)

Kanei-Ishii,C.et al.：“myb 基因家族编码的蛋白质的结构和功能”Curr.Top.Micro.Imm.211。

Mimura N.et al.: "A transient increase of SnoN transcript by growth arrest upon serum deprivation and cell-to-cell contact" FEBS Lett.397. 253-259 (1996)

Mimura N.等人：“血清剥夺和细胞间接触时生长停滞导致 SnoN 转录物短暂增加”FEBS Lett.397。

Dai,P.et al.: "CBP as a transcriptional coactivator of c-Myb" Genes & Dev.10. 528-540 (1996)

Dai,P.et al.：“CBP 作为 c-Myb 的转录共激活因子”基因

Ogata,K.et al.: "The cavity in the hydrophobic core of Myb DNA-binding domain is reserved for DNA recognition and trans-activation." Nature Struct.Biol.3. 178-187 (1996)

Ogata,K.等人：“Myb DNA 结合结构域的疏水核心中的空腔是为 DNA 识别和反式激活而保留的。”

Deng Q-L.et al.: "Binding-site analysis of c-Myb : screening of potential binding site by using the mutation matrix derived from systematic binding affinity measurements" Nucleic Acids Res.24. 766-744 (1996)

Deng Q-L.等人：“c-Myb 的结合位点分析：通过使用源自系统结合亲和力测量的突变矩阵筛选潜在的结合位点”Nucleic Acids Res.24。