分子構造情報としてのアンチセンスペプチドホモロジーボックス

作为分子结构信息的反义肽同源盒

• 批准号: 08272227
• 负责人: 岡田 秀親
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08272227/
• 关键词: アンチセンスペプチド; アンチセンスホモロジーボックス; C5aレセプター; C5a; カルシウムインフラックス; 高次構造; fMLP; 逆転写酵素

アンチセンスペプチドホモロジーボックス(AHB)を解析するコンピュータープログラムとして作成したANTISを用いて、C5aレセプターのAHBを解析した。その結果、いくつかのAHBが検出された。その中で、C5aレセプターのN末から226番目から245番目の20個のアミノ酸から成るAHBのペプチド(PR226)を10pM作用させると、細胞のC5aレセプターはC5aに対する感受性が増大し、subeffective doseのC5aに対してもCa^<++>インフラックスを起こすようになった。しかし、PR226だけではCa^<++>インフラックスは全く起こさないのでC5aレセプターの高次構造に変化を起こさせC5aとの反応が効率よく起こるようになったと推察された。細菌由来の起炎物質として発見されたfMLP (formyl-Met-Leu-Pro)はC5aと同様に強力なCa^<++>インフラックス誘発因子であり、そのレセプターはC5aレセプターと同様に7回膜貫通型のロドプシンタイプである。しかし、PR226はfMLP刺激に対しては、亢進作用も抑制作用も全く示さなかったので、PR226ペプチドの作用はC5aレセプターに特異的に作用するものと考えられた。PR226を0.5μMと比較的高濃度で作用させると、C5aのCa^<++>インフラックスに対して逆に抑制効果を示した。超低濃度で亢進作用を示し、高濃度で抑制作用を示すことの分子構造上の解釈については今後の問題として残された。アンチセンスペプチドの概念に立脚して、HIVの逆転写酵素に対して抑制作用を示すと期待できるペプチドの設計をジェネティックアルゴリズム法により行った。そのペプチドは逆転写酵素に分子比で1 : 100の濃度を加えるだけで強力な抑制作用を示すことができたので、任意の蛋白分子の機能を制御するペプチドを創生する技術としても活用できると期待される結果である。

ア ン チ セ ン ス ペ プ チ ド ホ モ ロ ジ ー ボ ッ ク ス (AHB) を parsing す る コ ン ピ ュ ー タ ー プ ロ グ ラ ム と し て made し た ANTIS を with い て, C5a レ セ プ タ ー の AHB を parsing し た. Youdaoplaceholder0 そ results, and そ く く された された <s:1> AHBが検 results in された. そ の で, C5a レ セ プ タ ー の N late か ら 226's mesh か ら 245's mesh の 20 の ア ミ ノ acid か ら into る AHB の ペ プ チ ド (PR226) を 10 PM role さ せ る と, cell の C5a レ セ プ タ ー は C5a に す seaborne る susceptibility が し, subeffective rights dose <s:1> C5aに is directed against て て Ca^<++> スを フラッ フラッ スを スを. し か し, PR226 だ け で は Ca ^ < + + > イ ン フ ラ ッ ク ス は く up all こ さ な い の で C5a レ セ プ タ ー の に high order structure - the を up こ さ せ C5a と の anti 応 が sharper rate よ く up こ る よ う に な っ た と push examine さ れ た. Bacterial origin の on inflammatory substances と し て 発 see さ れ た fMLP (formyl - Met - Leu - Pro) は C5a と with others に powerful な Ca ^ < + + > イ ン フ ラ ッ ク ス 発 lure factor で あ り, そ の レ セ プ タ ー は C5a レ セ プ タ ー と with others に type 7 transmembrane back の ロ ド プ シ ン タ イ プ で あ る. し か し, PR226 は fMLP stimulus に し seaborne て は も inhibition も full く, hyperthyroidism role さ な か っ た の で, PR226 ペ プ チ ド の role は C5a レ セ プ タ ー に specific に role す る も の と exam え ら れ た. PR226 を 0.5 mu M と comparative high concentrations of で role さ せ る と, C5a の Ca ^ < + + > イ ン フ ラ ッ ク ス に し seaborne て inverse に inhibition of unseen fruit を shown し た. Ultra-low concentration を で hyperfunction role し, high concentration を inhibiting effect で す indicated こ と の の solution on molecular structure 釈 に つ い て は の problem in the future と し て residual さ れ た. ア ン チ セ ン ス ペ プ チ ド の concept に footing し て HIV の inverse planning to write and enzyme に し seaborne て を inhibition role す と expect で き る ペ プ チ ド の design を ジ ェ ネ テ ィ ッ ク ア ル ゴ リ ズ ム method に よ り line っ た. そ の ペ プ チ ド は inverse planning write enzyme で に molecular ratio 1:100 の concentration を え る だ け で powerful な を inhibition role す こ と が で き た の で, arbitrary の function of protein molecules の を suppression す る ペ プ チ ド を creation す る technology と し て も use で き る と expect さ れ る results で あ る.

项目成果

Akatsu, H., Okada, H. et al.: "Unique expression of HRF20 (CD59) in human nervous tissue." Microbiol. Immunol.41 (in press). (1997)

Akatsu, H.、Okada, H. 等人：“HRF20 (CD59) 在人类神经组织中的独特表达。”

Nangaku, M., Okada, N., et al.: "Overexpression of Crry protects mesangeal cells from complement mediated injury." J. Am. Soc. Nephrol.(in press). (1997)

Nangaku, M.、Okada, N. 等人：“Crry 的过度表达可保护系膜细胞免受补体介导的损伤。”

Hosokawa, M., Okada, H. et al.: "Molecular cloning of guinea pig membrane cofactor protein (MCP) : Preferential expression in testis." J. Immunol.157. 4946-4952 (1996)

Hosokawa, M., Okada, H. 等人：“豚鼠膜辅因子蛋白 (MCP) 的分子克隆：睾丸中的优先表达。”

Rogers, C. A., Okada, N., et al.: "Expression and function of membrane regulators of complement on rat astrocytes in culture." Immunology. 88. 153-161 (1996)

Rogers, C. A.、Okada, N. 等人：“培养物中大鼠星形胶质细胞补体膜调节因子的表达和功能。”

Iwata, M., Okada, H. et al.: "Complement plays an essential role in shock following intestinal ischaemia in rats." Clin. Exp. Immunol.106. 156-159 (1996)

Iwata, M., Okada, H. 等人：“补体在大鼠肠道缺血后的休克中发挥着重要作用。”