权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

WD-40リピートを持つ核内蛋白質N-raf p56の機能

具有 WD-40 重复序列的核蛋白 N-raf p56 的功能

基本信息

批准号：
08274213
负责人：
清水憲二
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08274213/
关键词：
WD-40リピート非マトリックスコラーゲン核蛋白質

项目摘要

[目的]RAF-1をめぐる信号伝達系の研究過程で抗RAF単クローン抗体を用いた免疫スクリーニングによって、WD-40リピート構造を8回含む新規な核蛋白質のcDNAを見出した。本研究はこの新しいWD-40核蛋白質の生理的機能を明らかにすることを目的とする。[研究成果]今年度初期の段階で得られたcDNAクローンはMW55kDaのWD-40蛋白質をコードすると見られた。ところがcDNAの3′側に終止コドンが出現せず、コーディング領域はもっと大きいと予想された。そこでRACE法を併用したところ、全長4602bpのcDNAを得ることができ、うち4008bpがORFで、アミノ酸残基1336、推定分子量146kDaという大きな蛋白が全長であることが確定した。更に興味深いことに、WD-40リピート8個を含むN端側ドメインの下流に1.2kbp(400aa)に及ぶコラーゲン様配列(Gly-Pro-X)nを見出した。よりC端側にもGly,Pro,Argに富む5回の大きなリピート配列が存在する。このようにWDC-146と仮に名付けた本蛋白質はこれまで全く知られていなかったユニークな構造を持つことが判明した。本遺伝子のラット各臓器における発現を調べたところ、約5kbのmRNAが広汎な組織で弱く発現しており、特に精巣、次いで胸腺で高い発現が見られた。本遺伝子はヒトでは2q14.2〜21.1にマップされ既知の遺伝子との相同性はない。また本遺伝子のWD-40リピートのドメインのみをマウスNIH3T3細胞で発現させたところ、10-20%の細胞が多核となり、さらに培養後期に一斉にアポトーシス様の細胞死を起こすこと、細胞表面に多数の小胞構造を誘導することなど興味深い知見が得られつつある。現在本蛋白質のC端側ドメインをGST融合蛋白質として大腸菌で発現させることができたので特異的な抗体を得る努力を続けている。

[objective] in the course of the study of RAF-1 immune signal pathway, the anti-RAF antibody was used to generate 8 antigens containing novel nucleoprotein (NRN) and cDNA antibody (cDNA). The purpose of this study is to explore the physiological mechanism of WD-40 ribosomal protein. [research results] at the beginning of this year, we received the following information: cDNA, WD-40, protein, protein. Please tell me that you are not aware of the situation in the cDNA area. The full-length RACE method was used to determine the molecular weight of 146kDa, the full-length of ORF, the ORF of 4008bp, the acid residue of 1336, the putative molecular weight of 146kDa, the whole length of protein, and the whole length of the protein. To make sure that there is a deeper flavor, there are 8 words in the WD-40 box, including the N-terminal terminal, the dirty 1.2kbp (400aa), and the column (Gly-Pro-X) n, which contains the following information. The C-end Gly,Pro,Arg is rich. 5 back to the big box. There is an existing column. I don't know what to say. I don't know. I don't know. In this system, you can see that there is a significant difference between the two parts of the body, and the 5kb mRNA tissue is weak. You can see that the thymus is highly sensitive, sensitive, and sensitive. In this book, we don't know what we know. We know that we have the same 2q14.2~21.1. This is the first time that WD-40 cells have been detected, 10-20% of them have multinucleated cells, and in the later period of the culture, most of the cells on the surface of the cells have been found to be dead, and most of the cells on the surface of the cells have been found to have a deep smell. Now, the C-terminal of this protein, the GST fusion protein, the bacteria, the specific antibody, the antibody.