ヒト癌におけるミスマッチ修復遺伝子欠損の分子病態

人类癌症错配修复基因缺陷的分子发病机制

• 批准号: 11146214
• 负责人: 清水 憲二
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11146214/
• 关键词: E2F4遺伝子; マイクロサテライト不安定性; hMSH3遺伝子; ミスマッチ修復; フレームシフト変異; DNAポリメラーゼ遺伝子; 組み換え修復遺伝子

【緒言】本研究では、独自に開発した遺伝子全領域同時SSCP法などの解析法を用いて、大腸癌や胃癌などのうち遺伝的不安定性を示すものを中心としてミスマッチ修復機構の欠損とその標的遺伝子変異への効果、修復欠損を起こす原因となった初発遺伝子異常はどのようなものかなどを明らかにすることを目的とした。【方法】1,研究検体の確保のため今までに約1,000例の腫瘍/正常組織を含む腫瘍バンクを設立した。2,微小な遺伝子異常検出法として遺伝子全領域同時SSCP法と蛍光標識マイクロサテライト(MS)解析法を開発し、癌に関係する遺伝子の異常解析を行った。【結果】これまでの本研究により、マイクロサテライトの不安定性(MI+)を示す胃癌と大腸癌の約37%に転写活性化因子で癌遺伝子ともなりうるE2F4のエキソン内マイクロサテライト変異を見い出した。またE2F4変異を持つ癌の80%以上が修復遺伝子であるhMSH3のエクソン内に1塩基フレームシフト変異を持つことを明らかにし、これらの癌ではE2F4遺伝子がhMSH3遺伝子の関与するミスマッチ修復機構の欠損の標的であることを初めて報告した。昨年度の研究で、変異型E2F4遺伝子をNIH3T3細胞で発現させると著明な増殖促進が見られることを明らかにしていたが、この効果は変異型E2F4による転写の活性化が上昇したことによることを本年度確認した。これらhMSH3,E2F4両遺伝子の変異を遺伝性非腺腫性大腸癌(HNPCC)と散発性大腸癌とで比較したところ、HNPCCではこれらの変異が有意に低く、また変異の形式がリピート数の減少を主にしており、散発性癌と大きく異なっていた。散発性のMI+癌における修復遺伝子欠損変異の成因を解明するために、DNAの修復と複製に関わるDNAポリメラーゼδ,εとPCNAなどの遺伝子の癌特異的変異を検索したが、有意な結果は得られなかった。しかし共同研究によって、DNAのミスマッチ修復に関わると思われるDNAポリメラーゼβ遺伝子の癌特異的変異を6例の胃癌において発見し、その変異は除去修復能を失活させることを報告した。また、食道癌などの検体で見られた染色体17番長腕の微小な欠失領域中にDNAの組み換え修復に関与する遺伝子が局在することをごく最近見い出した。この知見はDNAの組み換え修復に重要な役割を果たす遺伝子の半数化または異常が癌化の前提条件としてのゲノム不安定性に関与する可能性を示唆するものと考えられ、重要な発見であるため、本課題研究期間終了後も引き続き解析する予定である。

This study exordium 】 【 で は, alone に 発 し た heritage 伝 son all areas and at the same time SSCP method な ど の analytic method を with い て, colorectal cancer や stomach な ど の う ち heritage 伝 unrest を shown す も の を center と し て ミ ス マ ッ チ repair agency の owe loss と そ の mark heritage 伝 sub - different へ の unseen fruit, repair owe loss を こ す reason と な っ た early 発 heritage 伝 child abnormal は ど The purpose of ような ような な な を を is to clarify ら にする にする とを とを とを. 【 Method 】1. The 検 body <s:1> was studied to ensure that approximately 1,000 cases of <s:1> abscesses/normal tissues を containing む abscesses バ <s:1> を を were established for た. 2, tiny traces of な 伝 child abnormal 検 method と し て heritage 伝 son all areas and at the same time SSCP method と 蛍 light logo マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト (MS) analytical method を open 発 し, cancer に masato is す る heritage 伝 son の exceptions resolution を line っ た. 【 results 】 こ れ ま で の this study に よ り, マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト の instability (MI +) を す stomach と の colorectal cancer by about 37% in に heritage planning write activation factor で carcinoma 伝 son と も な り う る E2F4 の エ キ ソ ン within マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト - see different を い out し た. ま た E2F4 - different を holding more than 80% つ carcinoma の が repair heritage 伝 son で あ る hMSH3 の エ ク ソ ン に within 1 salt base フ レ ー ム シ フ ト - different を hold つ こ と を Ming ら か に し, こ れ ら の carcinoma で は E2F4 posthumous son 伝 が hMSH3 posthumous son 伝 の masato and す る ミ ス マ ッ チ repair agency の owe loss の mark で あ る こ と を early め て report し た. Yesterday's annual の research で, - traces of alien E2F4 伝 son を NIH3T3 cells で 発 now さ せ る と zhao Ming な raised colonization promote が see ら れ る こ と を Ming ら か に し て い た が, こ の unseen fruit は - alien E2F4 に よ る planning write の activeness が rise し た こ と に よ る こ と を confirmed this year し た. こ れ ら hMSH3, E2F4 struck posthumous son 伝 の - traces of different を 伝 sexual not swollen glands colorectal cancer (HNPCC) scattered 発 と colorectal cancer と で compare し た と こ ろ, HNPCC で は こ れ ら の - low vision が intentionally に く, ま た - form different の が リ ピ ー ト reduced の を main に し て お り, cancer と 発 sex き く different な っ て い た. Scattered 発 sex の MI + carcinoma に お け る repair heritage 伝 son owe causes loss - different の を interpret す る た め の に, DNA repair と copy に masato わ る DNA ポ リ メ ラ ー ゼ delta, epsilon と PCNA な ど の heritage 伝 son の carcinoma ex - different を 検 cable し た が, intentionally な results は ら れ な か っ た. し か し joint research に よ っ て, DNA の ミ ス マ ッ チ repair に masato わ る と think わ れ る DNA ポ リ メ ラ ー ゼ beta but 伝 son の carcinoma ex - six different を の stomach に お い て 発 し, そ の - different は can remove repair を inactivation さ せ る こ と を report し た. ま た, esophageal な ど の 検 body で see ら れ た chromosome 17 times long wrist の small な owe lost に み の group in え DNA repair in the field of に masato and す る heritage 伝 son が bureau in す る こ と を ご く to see い recently し た. こ の knowledge は DNA み の group in え repair に important な "を cut fruit た す posthumous son 伝 の half turn ま た は abnormal が canceration の precondition と し て の ゲ ノ ム labile に masato and す を る possibility in stopping す る も の と exam え ら れ, important な 発 see で あ る た め, period after the end of this topic research も lead き 続 き parsing す る designated で あ る.

项目成果

Kukita Akiko: "Osteoclast-derived zinc finger(OCZF) protein with POZ domain, a possible transcriptional repressor, is involved in osteoclastogenesis"Blood. 94. 1987-1997 (1999)

Kukita Akiko：“具有 POZ 结构域的破骨细胞衍生锌指 (OCZF) 蛋白是一种可能的转录抑制因子，参与破骨细胞生成”Blood。

Shibuya Kazuko: "Physical and functional association of αLβ2 integrin(LFA-1) with DNAM-1 adhesion molecule"Immunity. 11. 1-20 (1999)

涩谷和子：“αLβ2 整合素 (LFA-1) 与 DNAM-1 粘附分子的物理和功能关联”免疫。 11. 1-20 (1999)

渡辺和英: "CPY2C遺伝子型判定における制限酵素消化の陽性対照の設計"TMD研究. 17(1). 17-23 (2000)

Kazuhide Watanabe：“CPY2C 基因分型中限制酶消化的阳性对照的设计”TMD Research 17(1) (2000)。

Tanino Motohiko: "Transforming activity of the RL-akt gene, a c-akt gene activated by long terminal repeat insertion in murine leukemia RL♂1 cells"Mol. Carcinogenesis. 26. 286-297 (1999)

Tanino Motohiko：“RL-akt 基因的转化活性，这是一种通过鼠白血病 RL♂1 细胞中的长末端重复插入激活的 c-akt 基因”，Mol. 26. 286-297 (1999)。

Iwanaga Akinari: "Functional mutation of DNA polymerase β found in human gastric cancer - inability of the base excision repair in vitro"Mutation Res.. 435. 121-128 (1999)

Iwanaga Akinari：“在人胃癌中发现的 DNA 聚合酶 β 的功能突变 - 体外无法进行碱基切除修复”Mutation Res.. 435. 121-128 (1999)