アラリアGPI アンカーの生合成遺伝子群のクローニング

Alaria GPI 锚定生物合成基因的克隆

基本信息

  • 批准号:
    08281209
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.05万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究は、熱帯熱マラリア原虫のGPIアンカー生合成遺伝子群を、哺乳動物と出芽酵母の遺伝子の相同性に基づいてクローニングすることを目的としている。ヒトと出芽酵母のように、遠くはなれた生物の相同遺伝子間で連続して保存されているアミノ酸配列は、他の生物でも保存されている可能性が高い。既知のGPIアンカー生合成遺伝子のうち、ヒトと出芽酵母間で最も相同性が高いPIG-A遺伝子(アミノ酸同一性45%)をとりあげ、ヒト、マウス、出芽酵母の配列を比較した。3つの生物間でアミノ酸同一性の高い領域を選び、それらの配列に応じてdegenerateしたPCRプライマーを合成した。熱帯熱マラリアFCR3株のDNA(阪大微研、堀井俊宏先生から供与された)を鋳型にし、nested PCRを行った。その産物をクローニングし塩基配列を決定した。得られたDNA断片の一つは、ヒト、マウス、出芽酵母と同様2つのプライマーPIGA-1と-4の領域間の46アミノ酸残基をコードしていた。この領域は、ヒトとマウスで完全に一致している領域であるが、マラリア原虫の配列はヒト、マウスと38残基、出芽酵母と21残基が同一であった。このDNA断片は熱帯熱マラリア原虫のPIG-A遺伝子の一部であると考えられた。現在、ゲノムライブラリー(大阪工大、田辺教授から供与された)から遺伝子全体をクローニングしつつある。今後、同様の手法を他の遺伝子にも適用していく予定である。
In this study, the GPI genus of the Thermomalarial protozoa and the mammals were analyzed. The budding yeast is the same as the budding yeast.ヒトとBudding Yeastのように、Far くはなれたbioticsの Same Remains 伝子间で连続して宝The probability of saving the acid is high, and the possibility of saving the other creatures is high. It is known that the highest similarity between GPI and budding yeast is the highest PIG- A をとりあげ, ヒト, マウス, and budding yeast の合线を した. 3. The high homogeneity of the acid between organisms is selected in the field, and the combination of the acid is degenerated and the PCR is synthesized. The DNA of the heat-resistant Malia FCR3 strain (provided by Mr. Toshihiro Horii and Handan University of Science and Technology) is a type of DNA, and a nested PCR is used. The product is determined by the base arrangement of the product. Get DNA fragments of られたの一つは, ヒト, マウス, budding yeast と同様2 つのプライマーPIGA-1と-4の46アミノacid residue をコードしていた.この区は、ヒトとマウスでCompletely consistent している区であるが、Maryla Ahara The worms are composed of the same 38 residues as はヒト and マウスと, and the 21 residues of budding yeast.このDNA Fragmentは热帯热マラリア protozoa のPIG-A 缝子の一一であると考えられた. Now, all the ゲノムライブラリー(Osaka Institute of Technology, Professor Tianbei's teachings and teachings) are all をクローニングしつつある. From now on, I will apply the same technique as the one I left behind.

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Reika Watanabe et al.: "PIG-A and PIG-H,which participate in glycosyl phosphatidyl-inositol anchor biosynthesis,form a protein complex in the endoplasmic reticulum." Journal of Biological Chemistry. 271・43. 26868-26875 (1996)
Reika Watanabe 等人:“参与糖基磷脂酰肌醇锚生物合成的 PIG-A 和 PIG-H 在内质网中形成蛋白质复合物。”Journal of Biological Chemistry 271·43 (1996)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Norimitsu Inoue et al.: "PIG-C,one of the three humon genes involved in the first step of glycosylphospha-tidylinositol biosynthesis is a homologue of Saccharomyces cerevisiae GP12." Biochemical and Biophysical Research Communications. 226. 193-199 (1996)
Norimitsu Inoue 等人:“PIG-C 是参与糖基磷脂酰肌醇生物合成第一步的三个人类基因之一,是酿酒酵母 GP12 的同源物。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Minoru Takahashiet al.: "PIG-B,a membrane protein of the endoplasmic reticulum with a large lumenal domain,is involved in transferring the third mannose of the GPI anchor." The EMBO Journal. 15・16. 4254-4261 (1996)
Minoru Takahashiet al.:“PIG-B 是一种具有大腔域的内质网膜蛋白,参与 GPI 锚定的第三个甘露糖的转移。” EMBO 杂志 15・16。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
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  • 通讯作者:
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知道了