权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

発達期の大脳皮質抑制性神経回路の特殊性に関与するCl^-トランスポーターの役割

Cl^-转运蛋白在发育过程中大脑皮层抑制性神经回路特性中的作用

基本信息

批准号：
09260226
负责人：
福田敦夫
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.fura-2でラベルした日齢7-14のラット大脳皮質スライス錐体細胞からの[Ca^<2+>]_iの光学測定をおこない、furosemideでCl^-排出機構を抑制した状態ではGABAが[Ca^<2+>]_i上昇を起こす事を明らかにした。これは、静止時の[Cl^-]_iが上昇しE_<Cl>が脱分極側にシフトしたためにGABAによるCl^-流入がCl^-流出となり、それによる脱分極で電位依存性Ca^<2+>チャンネルから一過性のCa^<2+>流入が起き、さらにグルタミン酸放出が促進されてNMDAレセプターチャンネルが開き持続の長い[Ca^<2+>]_i上昇が起きたためと考えられた。このように、Cl^-輸送体機能の変化はGABAの作用を変化させることにより神経回路機能に大きな影響をもたらすことが明らかとなった。2.神経回路の発達過程でのCl^-輸送体の種類・機能・局在による[Cl^-]_i変化とそれに伴うGABA作用の変化について知る目的で、Cl^-感受性蛍光指示薬のMEQを用いた光学的測定法により、大脳皮質スライス各層の神経細胞から直接的にしかも同時に[Cl^-]_i変化を測定できる方法の開発を行った。スライス中の細胞に還元型のdiH-MEQを負荷すると細胞内でMEQに酸化されるのでその蛍光強度を計ることにより[Cl^-]_iを長時間測定する事ができた。Clトランスポーター/ポンプ阻害剤がMEQの励起波長と干渉し、直接作用を見ることが不可能であったので、細胞内外のCl^-濃度固定法を行い、まずMEQ蛍光と[Cl^-]_iのstandard curveを作成した。生後11日では[Cl^-]_i=20mM前後で高値であったが、層による部位差は存在しなかった。3.GABAの投与によって起る大脳皮質各層での[Cl^-]_i変化の発達過程では、Cl^-の出入りが生後5日から25日の間で流出から流入に変化することを明らかにした。このことから生後発達の過程でE_<Cl>の過分極側へのシフトが起こっていることが示唆された。これに関与するCl^-輸送体の種類、輸送の向き、それらの機能の発達過程や皮質各層での差異について現在解析を進めている。4.大脳皮質VI層と白質の境界部付近の入力路を双極タングステン電極で電気刺激した。単発刺激では測定感度の問題でMEQの蛍光変化は捉えられなかったが、高頻度刺激を行った際の[Cl^-]_iの変化を記録することができた。大脳皮質各層での差異と発達過程について今後検討する。

On the 7th-14th day of the 1.fura-2 system, you can use the optical measurement system [Ca ^ & lt;2+>] _ I to control the status of the GABA system [Ca ^ & lt;2+>] _ I. At rest, [Cl^ -] _ I, on the E _ & lt;Cl> separation cycle, the GABA emission Cl^-inflow into the air, the outflow, the separation, the potential dependence, the dependence of the potential, the lt;2+>, the transition, etc. Inflow and release of acid into the NMDA to facilitate the opening of the operating system [Ca ^ & lt;2+>] _ I. The video camera, Cl^-delivery machine can change the GABA function. The loop machine can improve the performance of the computer system. two。 In order to realize the process of realization of the circuit, the computer science bureau is using optical methods to determine the purpose of the GABA, the optical sensitivity indicator, the optical measurement method, the optical measurement method, and the optical measurement method. The main purpose of this paper is to use the direct monitoring method of [Cl^ -] _ I to start the operation of the determination method. In the middle of the diH-MEQ cell, the MEQ is acidified, the light intensity is calculated, and the temperature is measured over a long period of time. The Cl is sensitive to the interference of the wave length, the direct effect is not possible, the extracellular and extracellular Cl^-temperature fixing method is used, and the MEQ photoluminescence [Cl^ -] _ ionization standard curve is used as the filter. On the 11th after birth, there were abnormal symptoms in the upper and lower parts of the i=20mM [Cl^ -] _ QR. The 3.GABA investment is related to the production process of the chemical treatment system [CL^ -] _ I, which is due to flow in and out of the hospital on the 5th and 25th after birth. After the death of a doctor, he or she has reached the end of the life cycle. There is a lot of information about how to do this, and how to make it through the process. Now there is a lot of progress. 4. The border department of the VI market pays close attention to the input road, which is used to stimulate the positive side of the electricity. The problem of MEQ sensitivity measurement is that high-intensity stimuli can be used to determine the sensitivity, and high-intensity stimuli can be used to determine the sensitivity. In the future, we will have to go through the whole process.