脳血管障害におけるゲノム創薬ターゲット探索法の開発

脑血管疾病基因组药物发现靶点搜索方法的开发

• 批准号: 14013029
• 负责人: 田中 利男
• 金额: $ 3.14万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14013029/
• 关键词: cerebral vasospasm; basilar artery; rat; antisense oligodeoxynucleotide; heat shock protein 72; heat shock protein 27

本研究の目的は、現在世界的に発展されつつあるゲノム創薬科学において、ゲノム上の新規創薬ターゲット探索法を確立することにある。特に脳血管攣縮病態においては、脳血管撃縮がくも膜下出血患者の最大の予後不良因子であり、脳虚血、脳梗塞からさらに死に至る重篤な病態である。しかしながら、確立された治療薬が存在しない。そこで、我々は、脳血管攣縮病態特異的遺伝子群を同定し、この遺伝子群の中から新しい創薬ターゲットを探索し、我々が独自に構築した医薬品、疾患に関連する遺伝子からなるゲノム創薬データベースとの統合により、新しいゲノム創薬ターゲット探索法の確立を試みた。具体的には、ラット脳血管攣縮病態における脳底動脈と正常脳底動脈からSMART-PCRによりds cDNAを作製し、サブトラクションにより脳血管攣縮病態の特異的に発現する遺伝子群のスクリーニングを行った。この遺伝子群アンチセンス解析により、small heat shock protein 27(HSP27)を特異的に抑制すると、遅発性攣縮の増悪が認められた。このことから、HSP27は、脳血管攣縮病態における新規創薬ターゲヅトであることが示差された。我々が、すでにアンチセンス解析により見出している創薬ターゲットheat shock protein 72(HSP72)は、その特異的抑制により、遅発性攣縮のピークで増悪する。これは、以前我々が報告したHeme Oxygenase-1(HO-1)の特異的抑制で得られた攣縮パターンとは異なり、別の作用機序で抗攣縮効果を発揮していると考えられる。さらに、薬物によりHSP72を誘導すると、脳血管攣縮の改善が認められたことから、脳血管攣縮の創薬ターゲットとしての有効性が確立された。我々の創薬ターゲット探索法は有効であったと考えられる。

这项研究的目的是建立一种在目前在全球范围内正在发展的基因组药物发现科学中基因组的新药物发现靶标的方法。特别是在脑血管痉挛中，脑血管痉挛是蛛网膜下腔出血患者中最大的预后因素，是一种严重的疾病，导致脑缺血和脑梗死，导致死亡。但是，没有建立的治疗剂。因此，我们确定了一组针对脑血管痉挛发病机理的基因，从这些组中搜索了新的药物发现靶标，并试图建立一种新的方法来搜索基因组药物发现靶标，通过将其与由我们独立构建的药物和疾病相关基因组成的基因组药物发现数据库进行集成。具体而言，DS cDNA是由大鼠脑血管痉挛病理学的基底动脉和正常基底动脉的Smart-PCR产生的，并通过减法筛选了在大脑血管痉挛病理中特异性表达的基因。该基因组的反义分析表明，当特别抑制小热激蛋白27（HSP27）时，会加剧延迟的痉挛。这表明HSP27是脑血管痉挛病理学中的一种新药物靶标。我们已经在反义分析中发现的药物发现靶热休克蛋白72（HSP72）加剧了由于其特异性抑制而在痉挛的峰值处加剧。这与先前报道的痉挛模式通过特异性抑制血红素氧酶-1（HO-1）获得，并且被认为通过不同的作用机理发挥抗骨效应。此外，用药物诱导HSP72改善了脑血管痉挛，并且已经建立了其作为药物发现靶标的有效性。据信，我们寻找药物发现靶标的方法是有效的。

项目成果

M.Hayashi: "Geneomic organization, chromosomal localization, and alternative splicing of the human phosphodiesterase 8B gene"Biochem. Biophys. Res. Commun. 297. 1253-1258 (2002)

M.Hayashi：“人类磷酸二酯酶 8B 基因的基因组组织、染色体定位和选择性剪接”Biochem。

Imai Y: "Clonig and characterization of the highly expressed ETEA gene from blood cells of atopic dermatitis patients"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 297. 1282-1290 (2002)

Imai Y：“特应性皮炎患者血细胞中高表达 ETEA 基因的克隆和表征”Biochem。